汪峰
- 作品数：15 被引量：25H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生水利工程建筑科学更多>>
- 60株铜绿假单胞菌耐药性分析及流行病学调查被引量：3
- 2013年
- 目的分析一段时期内60株铜绿假单胞菌(PA)的耐药性并及其DNA多态性。方法对临床分离的60株不重复铜绿假单胞菌采用Kirby-bauer(KB)法进行药敏试验,并进行随机引物多态性扩增。结果耐药率最高的是米诺环素和复方新磺胺甲恶唑,分别为100%和96.6%,其次是哌拉西林(55%),左氧氟沙星(51.6%),亚胺培南(48.3%)和美洛培南(46.6%),耐药率较低是头孢他啶(15.0%)和阿米卡星(38.3%)。各菌株基因型差别较大,在同一科室内有小范围的流行。结论 PA对多种抗菌药物耐药率均较高,仅头孢他啶与阿米卡星耐药率较低,临床可考虑选用。各菌株基因型差别较大,RAPD可以作为PA流行病学调查的手段之一。
- 徐令清汪峰刘彩林欧国平孙明月孙自镛
- 关键词：抗药性随机引物
- 铜绿假单胞菌对致病真菌的抑制作用被引量：5
- 2014年
- 目的观察临床分离的24株铜绿假单胞菌(PA)对致病性真菌(如白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、葡萄牙念珠菌等)的抑制作用。方法收集临床上24株PA,通过革兰染色、氧化酶试验及API 20NE(法国梅里埃公司产品)进行鉴定;通过纸片法、十字交叉划线法及共培养检测PA对致病性真菌的抑制作用。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对有抑制作用的PA和无抑制作用的PA分泌蛋白进行电泳。结果 24株PA中部分菌株对常见的致病性真菌有显著抑制作用,而部分PA菌株有一定抑制作用,另外一些完全没有抑制作用;共孵育试验显示PA可能是通过抑制真菌的菌丝生长而产生抑制作用。SDS-PAGE显示有抑制作用的PA和无抑制作用的PA分泌物蛋白间存在明显差异。结论PA对常见的致病真菌具有抑制作用,推测可能与抑制真菌的菌丝生长及分泌抑制真菌生长的各种蛋白类物质有关。
- 徐令清汪峰侯红艳刘彩林欧国平孙明月孙自镛
- 关键词：真菌绿脓菌素
- 重组小鼠Galectin-9在大肠杆菌中的表达以及体外功能检测被引量：1
- 2007年
- 本研究旨在构建重组Galectin-9（半乳糖凝集素9）原核表达质粒，并对表达蛋白进行纯化和功能学鉴定。
- 汪峰何文涛袁劲吴柯周鸿敏徐逸高英陈忠华
- 关键词：大肠杆菌体外小鼠原核表达质粒半乳糖凝集素
- 运用变性高效液相色谱快速检测TEM型超广谱β-内酰胺酶
- 目的应用变性高效液相色谱(DHPLC)技术对已确认产超广谱β-内酰胺酶临床分离株的TEM型质粒进行基因分型,试图建立一种快速检测TEM型ESBLs及其流行病学监测的新方法。方法采用PCR技术从临床分离株中扩增出TEM型质...
- 刘彩林孙自镛汪峰汪玥欧国平徐令清孙明月朱旭慧
- 关键词：变性高效液相色谱临床分离株TEMΒ-内酰胺酶
- 运用变性高效液相色谱快速检测TEM型产超广谱β-内酰胺酶菌株被引量：1
- 2012年
- 目的建立一种快速检测TEM型产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)临床分离菌及其流行病学监测的新方法。方法采用PCR技术从临床分离株中扩增出TEM型质粒的编码序列,扩增产物用变性高效液相色谱(DHPLC)技术进行分析并进行DNA测序,确定其基因突变的类型,最后通过比对确定其基因型。结果共检测66株临床分离菌,其中42株扩增出TEM型基因。经过DHPLC分析,35株表现为单一的洗脱峰,其形态与TEM-1标准菌株的峰型相一致,测序确定它们的碱基序列亦相一致,不存在变异,为TEM-1型;5株表现为一种异常的洗脱峰,它们均为双峰,形态一致,测序结果表明它们均存在两种相同的基因突变,经比对后确定为TEM-10型;另外2株表现为另一种异常的洗脱峰,测序结果显示为TEM-116型。结论 DHPLC技术可用于细菌耐药基因的分型检测,不但灵敏度和特异度高,而且具有经济、快捷、高通量等特点,具有很大的潜在临床应用价值。
- 刘彩林孙自镛汪峰汪玥欧国平廖亚龙徐令清孙明月朱旭慧
- 关键词：变性高效液相色谱超广谱Β-内酰胺酶TEM型基因分型
- 运用变性高效液相色谱快速检测TEM型超广谱β-内酰胺酶
- 刘彩林孙自镛汪峰汪玥欧国平徐令清孙明月朱旭慧
- Tim-3在CD8^+ T细胞上的表达及功能研究被引量：2
- 2010年
- 为探讨CD8+T细胞是否表达T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Ti m-3),并探讨Ti m-3分子是否和CD8+T细胞功能相关,通过致敏C57BL/6小鼠(取BALB/c小鼠皮肤移植到C57BL/6小鼠背部),术后第7天处死小鼠,分离小鼠引流淋巴结,流式细胞术观察CD8细胞上CD44、CD62L、Ti m-3表达;术后第10天分离受者脾细胞,流式分选CD8+T细胞,以此作为效应细胞去杀伤BALB/c小鼠脾细胞,实验组和对照组分别加入Ti m-3封闭抗体和PBS。结果发现,Ti m-3表达于活化的CD8+T细胞(表型为CD8+CD44highCD62Llow),但不表达于初始的CD8+T细胞。此外,使用Ti m-3封闭抗体后可减弱细胞毒性CD8+T细胞引起的杀伤反应,且在体内减少IFN-γ分泌水平。结果表明,Ti m-3分子表达于活化的CD8+T细胞,且和CD8+T功能相关。
- 汪峰孙自镛朱旭慧廖亚龙汪月刘彩林
- 关键词：TIM-3CD8^+T细胞细胞毒性IFN-Γ
- TGF—β1诱导的调节性T细胞体内输注延长小鼠皮肤移植物存活
- 2008年
- 目的利用TGF-β1体外诱导naiveT细胞分化为调节性T细胞（Treg），通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间，并研究其相关机制。方法根据诱导条件不同分为3组：对照组（加入IL-2培养的C57BL／6小鼠T细胞）、MLR组（即混合淋巴细胞反应组，经同种抗原刺激活化的C57BL／6小鼠T细胞）和TGF-β组（经同种抗原刺激活化的C57BL／6小鼠T细胞，同时加入5．0ng／ml TGF-β1诱导）。利用FACS检测CD4^＋CD25^＋T细胞比例，并用RT—PCR检测Foxp3的表达水平。建立小鼠皮肤移植模型，并于第0、1、2和3天输注上述细胞，观察皮肤移植物存活时间。术后第9天，取部分受鼠行移植物病理检测，用FACS检测脾脏中TH1、TH2和CD4^＋CD25^＋Treg比例，并用AlamarBlue法检测淋巴细胞增殖能力。结果TGF-β组中CD4^＋CD25^＋T细胞比例高于对照组和MLR组（P〈0．05），且其高表达Foxp3。将培养的细胞输注给受鼠后发现，输注MLR组细胞的受鼠其移植物平均存活时间（mean survival time，MST）为（9．4±1．3）d，低于对照组（P〈0．05）；而输注TGF-β组细胞小鼠MST为（22．8±1．9）d，较对照组和MLR组明显延长（P〈0．05）。病理检测亦显示TGF-β组受鼠移植物结构完整，无明显淋巴细胞浸润。FACS结果显示TGF-β组小鼠体内TH1细胞（CD4^＋TIM-3^＋）比例低于对照组和MLR组（P〈0．05），而TH2细胞（CD4^＋TIM-1^＋）比例则与MLR组类似（P〉0．05），但低于对照组（P〈0．05）；而且TGF-β组中CD4^＋CD25^＋Treg比例明显高于对照组和MLR组（P〈0．05）。用AlamarBlue法检测受鼠外周淋巴细胞增殖活性显示，TGF-β组受鼠淋巴细胞增殖能力被明显抑制，低于对照组（P〈0．05）。结论TGF-β，可诱导T细胞分化为具有抑制能力的Treg，将诱导后的细胞进行过继输注可使小鼠体内CD4^＋CD25^＋T。比例升高，同时抑制TH1和TH2细胞分化扩增，并�
- 袁劲吴轲何文涛汪峰陈忠华
- 关键词：调节性T细胞皮肤移植
- 铜绿假单胞菌多位点序列分析被引量：2
- 2017年
- 目的研究铜绿假单胞菌临床分离株的遗传基因型,明确铜绿假单胞菌携带株的流行特征。方法用多位点序列分型技术(MLST),以铜绿假单胞菌7个管家基因acsA、aroE、guaA、mutL、nuoD、ppsA和trpE的内部特定核酸片段作为检测的靶基因,对60株铜绿假单胞菌的靶基因进行PCR扩增和测序,通过eBURST方法对其进行进化聚类分析,同时通过SplitsTree软件进行菌株基因遗传进化分析。结果 MLST分析显示60株铜绿假单胞菌可分为11个ST型,即ST262、ST195、ST767、ST274、ST527、ST849、ST639、ST871、ST244、ST636和ST645型,未发现新的型别;其中ST244和ST274是优势ST型别,分别占26.67%,18.33%;且ST244型在ICU及呼吸内科数量显著高于其他科室(P<0.05)。结论本地区以ST244和ST274为优势克隆株,尤其在ICU及呼吸内科数量显著高于其他科室,提示医院内存在小范围的传播;MLST对于流行病学研究具有重要意义。
- 徐令清王欢温伟洪李介华汪峰侯红艳孙自镛
- 关键词：铜绿假单胞菌流行病学MLST
- 嗜麦芽寡养单胞菌对念珠菌抑制作用观察被引量：1
- 2016年
- 目的观察嗜麦芽寡养单胞菌(SMA)对常见念珠菌属,如白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌等的抑制作用。方法收集临床上20株SMA,通过革兰染色、氧化酶试验及API 20NE(法国梅里埃公司产品)进行鉴定;通过纸片法、十字交叉划线试验及共孵育试验检测SMA对念珠菌属的抑制作用。结果 20株SMA中部分菌株对常见念珠菌有显著抑制作用,但对质控菌株大肠埃希菌(ATCC 25922)、肺炎克雷伯菌(ATCC 700603)、铜绿假单胞菌(ATCC 27953)没有抑制作用。结论 SMA对常见念珠菌具有抑制作用,推测可能是与分泌一些代谢产物抑制真菌的菌丝形成有关。
- 徐令清王欢温伟洪李介华钟国权汪峰侯红艳孙自镛
- 关键词：嗜麦芽寡养单胞菌念珠菌
