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徐广峰: 作品数：44 被引量：46H指数：4; 供职机构：中国人民解放军第八二医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金南京市科技发展计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>

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miR-26b过表达对不同时间点人脂肪细胞分泌脂因子的影响: 目的探讨miR-26b过表达对不同时间点脂肪细胞上清各种肥胖及炎症相关蛋白分泌的影响.方法 miR-26b过表达的病毒感染人脂肪前体细胞,并诱导分化、收集不同时间点的细胞培养基上清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测...; 季晨博史春梅陈玲杨蕾庞玲霞徐广峰郭锡熔

microRNA的生物形成参与细胞生长/分化和肿瘤形成被引量：2: 2012年; microRNA(miRNA)作为一类非编码小分子调控RNAs,参与调节多种生理和病理过程。在动物细胞中,miRNA基因的转录初产物pri-miRNA被RNaseⅢ家族酶成员Drosa和DGCR8催化加工成为miRNA前体(pre-miRNA),然后由细胞核转运至细胞质中,经另一种核糖核酸酶ⅢDicer识别剪切为成熟miRNA。在pri-miRNA向成熟miRNA加工转化过程中发生的改变参与细胞生长、分化以及肿瘤形成。; 徐广峰付海龙赵亚萍; 关键词：细胞生长细胞分化肿瘤形成

化学发光法检测CA199假性增高一例被引量：1: 2018年; 目的：临床工作中发现化学发光法检测CA19-9出现不明原因假性增高一例，我们使用不同厂家仪器进行检测比对，发现采用鼠克隆抗体的化学发光试剂检测结果均假性增高。经分析推测该例CA19-9假性增高结果可能受到鼠克隆抗体的干扰（HAMA效应）。因此，临床对CA19-9增高者应结合其它指标联合判断，避免对临床诊疗造成一定的误判。; 黄艳丁颖徐广峰赵亚萍; 关键词：CA199 化学发光法

miR-1268重组慢病毒质粒构建及其在人前体脂肪细胞中的表达验证被引量：1: 2018年; 目的构建miR-1268重组慢病毒质粒,观察其在人前体脂肪细胞HPA中的表达情况。方法从NCBI Gen Bank数据库查找miR-1268的DNA序列,用Primer 5.0软件设计PCR引物,以HPA细胞的DNA为模板进行PCR扩增;克隆慢病毒表达载体,进而包装成空载慢病毒和miR-1268过表达慢病毒;HPA细胞分别感染空载慢病毒和miR-1268过表达慢病毒,荧光定量PCR检测miR-1268表达水平。结果测序结果表明,miR-1268前体序列与Gen Bank上的序列完全相同。与空载慢病毒感染的HPA细胞比较,miR-1268过表达慢病毒感染的HPA细胞miR-1268上调2.5倍。结论成功构建miR-1268重组慢病毒质粒,感染的HPA细胞高表达miR-1268。; 周雨森徐广峰赵亚萍汪春晖; 关键词：慢病毒载体

人miR-17-92 cluster慢病毒载体构建及其在人脂肪细胞的表达验证被引量：3: 2012年; 目的构建人miR-17-92cluster慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪细胞中过表达效果。方法以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR扩增包含miR-17-92cluster所在区域上下游100bp左右的基因组DNA,克隆入慢病毒表达载体,与Pcgvp、Rev、Vsvg包装质粒共转染HEK-293T细胞包装病毒,收取病毒上清液感染人脂肪细胞。36h开始观察荧光标记,72h收取细胞,抽提RNA,RT-PCR检测miR-17-92cluster各miRNA及miR-103、let-7e的表达。结果成功构建人miR-17-92cluster慢病毒表达载体。包装获得的病毒感染人脂肪细胞的效率可达到75%以上,miR-17-92cluster各miRNA的过表达效率均达到2倍以上,且没有干扰miRNA内源性成熟机制。结论成功构建了人miR-17-92cluster慢病毒表达载体。包被的慢病毒可以在人脂肪细胞中实现了该cluster的过表达效果,为研究人miR-17-92cluster在人脂肪细胞中的功能提供参考。; 史春梅陈玲徐广峰倪毓辉陈小慧朱春傅君芬郭锡熔季晨博; 关键词：CLUSTER 慢病毒载体

The Expression Of Mir-26b,An Obesity-Related Microrna,Regulated By Free Fatty Acids,Glucose,Glucocorticoids And Growth Hormone In Human Adipocytes: MicroRNAs (miRNAs) are short non-coding RNAs that are involved in multiple biological processes including obes...; 徐广峰史春梅季晨博陈玲杨蕾赵亚萍郭锡熔

游离脂肪酸对人成熟脂肪细胞中miR-335表达的调控被引量：1: 2013年; 目的观察游离脂肪酸（FFA）对人成熟脂肪细胞中miR-335表达的调节作用。方法体外培养人前体脂肪细胞，待生长融合后，采用1一甲基-3异丁基黄嘌呤（MIX）、胰岛素、地塞米松、罗格列酮方案诱导人前体脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞，使用含1mmol／L混合FFA的前脂肪细胞培养基（PAM）进行干预，分别培养4、8、24h后收集细胞，同时设未干预的人成熟脂肪细胞为对照组，采用实时荧光定量PCR技术检测成熟脂肪细胞中miR-335的相对表达量。结果对照组细胞中4、8、24hmiR-335的相对表达量与0h相比差异均无统计学意义（P均〉0．05）。使用snRU6作为内参时，FFA干预人成熟脂肪细胞4、8、24h后miR-335的相对表达量分别为9．03-t-O．31、9．85±2．41和11．23±0．62，与对照组0h相比，差异均有统计学意义（P均〈0．05）；使用miR-103作为内参时，同等时间点miR-335的相对表达量分别为4．73±0．60、5．38±1．25和4．57±0．52，与对照组0h相比，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论FFA可明显上调人成熟脂肪细胞中miR-335的表达，为进一步探索miR-335在脂肪细胞中的功能提供了一定的理论依据。; 朱璐崔焱倪毓辉徐广峰史春梅郭锡熔季晨博; 关键词：游离脂肪酸脂肪细胞

hsa-miR-17-92cluster及其同源体的生物信息学分析: 目的：对hsa-miR-17-92 cluster及其同源体进行系统的生物信息学分析,预测其可能参与的生物学过程,为深入研究其在脂肪细胞分化、肥胖发生等过程中的功能与机制奠定基础。方法：①应用Pubmed、Google等...; 史春梅徐广峰陈玲赵亚萍倪毓辉杨蕾季晨博郭锡熔; 关键词：信使核糖核酸生物信息基因序列; 文献传递

LYRM1基因沉默对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响: 目的:观察LYRM1基因沉默对脂肪细胞线粒体代谢的影响.方法:以3T3-L1前体脂肪细胞为研究对象,分别构建LYRM1基因沉默细胞株(pGPU6/NeoLYRM 1-shRNA)和空载细胞株(pGPU6/Neo-shRN...; 季晨博史春梅郭锡熔徐广峰赵亚萍陈小慧朱冠忠朱金政张春梅