张媛
- 作品数：17 被引量：47H指数：4
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- DNA直接测序法在血友病B患者基因诊断的应用
- 目的:血友病B(hemophiliaB,HB)是凝血因子□(factor□,F□)基因突变引起的X连锁隐性遗传性出血性疾病。F□基因位于Xq26.3-27.2,全长34kb,由8个外显子、7个内含子及侧翼顺序中的调控区域...
- 陈剑芳杨林花聂欣张耀方张媛王梅芳张睿娟
- 关键词：直接测序法基因诊断基因突变外显子侧翼序列
- 文献传递
- 应用基因测序技术检测血友病B患者F Ⅸ基因突变
- 目的:利用基因测序技术研究3个中国汉族无关血友病 B 患者凝血因子Ⅸ(FⅨ)基因突变的类型。方法:检测患者血浆 APTT 及 FⅨ:C 进行表型诊断;抽提患者外周血白细胞基因组 DNA,分8段扩增 FⅨ基因外显子序列,用...
- 张媛杨林花陆晔玲丁秋兰王学锋刘秀娥侯丽虹
- 关键词：基因测序技术基因突变外显子
- 文献传递
- klf4反义基因腺病毒载体的构建和鉴定
- 2010年
- 本研究针对klf4基因,利用AdEasy腺病毒载体系统构建人klf4反义基因重组腺病毒载体。klf4基因片段反向克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV,利用同源重组技术在大肠杆菌BJ5183内构建重组腺病毒Ad-反义klf4,酶切线性化重组载体,并在293细胞中扩增、制备重组病毒。经限制性酶切、PCR扩增和测序检测鉴定,证明Ad-反义klf4重组腺病毒基因正确插入后,将Ad-反义klf4转染人原代脐静脉内皮细胞,采用real-time PCR、Western blot方法观察其对内皮细胞中KLF4表达的抑制效果。结果表明:成功构建了重组klf4反义基因腺病毒载体,重组腺病毒可明显降低细胞内klf4 mRNA和KLF4蛋白表达。结论:成功构建了Ad-反义klf4重组腺病毒载体,这为进一步研究klf4的生物学功能及应用提供物质基础。
- 张耀方张睿娟杨林花张媛周剑峰曹阳陈彩虹
- 关键词：内皮细胞重组腺病毒载体
- JAK2V617F突变在骨髓增殖性疾病中的初步研究
- 2008年
- 骨髓增殖性疾病（myeloproliferative disorders，MPD）是骨髓中一系或多系细胞异常增殖，外周血出现一种或多种血细胞增多为特征的克隆性造血干细胞疾病。MPD主要包括：真性红细胞增多症（PV）、原发性血小板增多症（ET）、特发性骨髓纤维化（IMF）、慢性粒细胞白血病（CML）以及少见亚型如嗜酸粒细胞增多症（HES）、慢性嗜酸粒细胞白血病（CEL）等。目前，临床上所指的MPD通常为反应多能造血于细胞转化的PV、ET和IMF三种。
- 乔娜杨林花刘秀娥康建民闫文林张睿娟张媛郭志萍张青夏
- 关键词：骨髓增殖性疾病克隆性造血干细胞疾病慢性嗜酸粒细胞白血病特发性骨髓纤维化嗜酸粒细胞增多症
- 凝血因子Ⅸ无义突变R116X导致重型血友病B的分子机制研究
- 目的:血友病B(hemophilia B,HB)是凝血因子Ⅸ(factorⅨ,FⅨ)基因缺陷引起血浆FⅨ含量或活性下降所导致的一种X连锁隐性遗传性出血疾病。FⅨ基因缺陷具有明显异质性,其中无义突变是导致重型HB的重要原因...
- 聂欣杨林花陈剑芳张耀方张媛王梅芳张睿娟
- 关键词：无义突变野生型真核表达载体分子机制
- 文献传递
- 凝血因子Ⅸ无义突变真核表达载体的构建及其在COS-7细胞的表达被引量：1
- 2010年
- 本研究以含有fⅨ cDNA的pcDNA3.1质粒为模板构建4种包含不同类型无义突变的fⅨ真核表达载体并进行鉴定,实现其在COS-7细胞中的表达。采用以PCR为基础的定点突变法体外构建fⅨ基因无义突变体,并通过DNA序列分析进一步鉴定证实;应用脂质体转化技术将野生型、突变型fⅨ表达载体分别瞬时转染COS-7细胞,采用实时定量PCR鉴定fⅨ mRNA在各组的相对表达水平。结果表明,4个突变型质粒除相应位点的无义突变外,未见其它突变,提示无义突变载体构建成功。实时定量PCR鉴定表明,各突变组真核表达载体已成功转染COS-7细胞株并能转录为mRNA。结论:采用以PCR为基础的定点突变法可在体外构建fⅨ真核表达载体,并可在COS-7细胞中表达,其转录过程中不引发mRNA降解,这为进一步研究无义突变引起FⅨ功能丧失及表达量降低的机制和治疗研究提供了物质基础。
- 聂欣杨林花柴宝峰申泉张媛张耀方陈剑芳
- 关键词：凝血因子IX真核表达载体血友病B
- 6个血友病B家系的基因诊断
- 目的:血友病B(hemophilia B,HB)是凝血因子Ⅸ(factorⅨ,FⅨ)基因突变引起的X连锁隐性遗传性出血性疾病。本研究采用DNA直接测序法对6个山西籍汉族无关HB家系先证者及其家系成员的FⅨ基因进行了全部外...
- 陈剑芳杨林花聂欣张耀方张媛王梅芳张睿娟
- 关键词：基因诊断外显子直接测序法侧翼序列先证者
- 文献传递
- 三个血友病B家系的基因诊断被引量：1
- 2008年
- 目的探讨中国汉族3个无关血友病B家系先证者凝血因子Ⅸ（FⅨ）基因突变及分子发病机制，对家系女性成员进行携带者诊断。方法家系先证者及成员采静脉血，先证者表型诊断确诊后，检测先证者及其家系成员6个STR位点的基因多态性，进行家系遗传连锁分析，应用PCR法对先证者及可疑携带者FⅨ8个外显子及其侧翼序列进行扩增，用末端标记双脱氧法检测核酸序列。结果家系1先证者FⅨ基因外显子6发现G22119A突变，家系2先证者FⅨ基因外显子2发现G7392C突变，家系3先证者FⅨ基因外显子8发现T32685C突变。结论血友病B先证者FⅨ基因缺陷是其发病的分子机制。
- 张媛杨林花陆晔玲丁秋兰王学锋刘秀娥张丽
- 关键词：血友病B短串联重复序列基因突变
- JAK2V617F点突变在原发性血小板增多症中的初步研究被引量：1
- 2008年
- 原发性血小板增多症（essential thrombocythemia．ET）是骨髓增殖性疾病（MPD）的一种，是多能干细胞慢性克隆增生性疾病，主要临床表现为外周血血小板计数持续显著升高。近来国外学者发现ET患者普遍存在JAK2（Januskinese2）基因12号外显子第1849位核苷酸G—T突变，使得负调控功能区JAK2蛋白的617位缬氨酸错义编码为苯丙氨酸。我们采用等位基因特异性聚合酶链反应（PCR）的方法对32例ET患者进行JAK2V617F的检测，报告如下。
- 乔娜杨林花刘秀娥康建民闫文林张睿娟张媛郭志萍张青夏
- 关键词：原发性血小板增多症等位基因特异性聚合酶链反应点突变骨髓增殖性疾病增生性疾病多能干细胞
- 血友病治疗研究进展被引量：9
- 2006年
- 血友病（hemophilia）是一种X染色体连锁隐性遗传性疾病，由于编码凝血因子的基因异常导致凝血因子生成障碍。以阳性家族史、幼年发病、自发或轻度外伤后出血不止、血肿形成及关节出血为特征，通常男性发病、女性携带。包括血友病A（HA）、血友病B（HB）及遗传性因子Ⅺ缺乏症。血友病的社会人群发病率为（5～10）／10万，婴儿发生率约1／5000。
- 张媛杨林花
- 关键词：血友病替代疗法基因治疗
