孙兆增
- 作品数:76 被引量:93H指数:6
- 供职机构:军事医学科学院实验动物中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 水疱性口炎病毒反向遗传重组载体的构建
- 随着RNA病毒反向遗传技术的进展,水疱性口炎病毒(vesivular stomatitisvirus,VSV)载体已被开发成为一种有效的治疗制剂。VSV病毒载体是一种高效的溶瘤病毒载体,具有非常广的溶瘤范围。资料报道VS...
- 孙兆增
- 关键词:水疱性口炎病毒
- 文献传递
- 比格犬不同发情周期个体中雌激素β受体的表达水平分析
- 为了探索比格犬雌激素β受体的表达是否与比格犬的发情调控具有相关性,选用6只成年雌性比格犬(3只处于发情期,3只处于间情期),通过实时荧光定量PCR和western blot技术分析了不同发情周期比格犬雌激素β受体的mRN...
- 任秀梅任秀梅赵彦斌孙兆增许琴张峰胡仲明曾林
- 关键词:发情周期雌激素Β受体比格犬
- 文献传递
- 封闭群比格犬遗传标志微卫星引物的筛选被引量:5
- 2009年
- 目的筛选出有效的微卫星引物,利用微卫星遗传标志对封闭群内比格犬的个体遗传情况进行分析。方法从文献中筛选杂合度在0.4~0.8的微卫星引物24对,对本场英系比格犬封闭群中随机筛选出的12只比格犬的混合基因组进行了扩增。结果24对引物中,有7对微卫星引物的扩增结果具有较好的多态性和重复性。利用这7对引物,对8只玛斯公司美系比格犬的混合基因组进行了扩增,结果与本场英系比格犬的扩增结果具有明显的差异。又利用这7对引物对随机筛选出的6只比格犬的个体遗传情况进行了分析,其中3只比格犬表现出明显的差异。结论作者筛选的7对微卫星引物可以对本场比格犬种群的个体遗传情况进行初步分析。
- 孙兆增曾林赵太云孔德强洪宝庆胡仲明
- 关键词:比格犬封闭群微卫星
- iRhom2及其突变基因重组慢病毒的包装和稳定表达细胞系的建立被引量:1
- 2015年
- 目的通过重组慢病毒感染,建立iRhom2及其突变基因的Vero细胞稳定细胞表达系,用于iRhom2的功能研究。方法将iRhom2及其突变基因克隆到慢病毒载体Lenti-OE-Flag,构建重组慢病毒载体Lenti-OEiRhom2和Lenti-OE-iRhom2mut,将重组质粒瞬时转染HEK-293T包装细胞,获得重组慢病毒。将重组病毒感染Vero细胞,利用puromycin进行加压筛选,获得二者的重组表达细胞系。结果构建了iRhom2及其突变基因的逆转录病毒载体,并获得了重组逆转录病毒,并利用该病毒获得了二者的稳定表达细胞系。Western-blot实验证实,二者能够在Vero细胞内稳定表达。结论利用重组逆转录病毒感染,成功获得了iRhom2及其突变系的Vero细胞稳定表达株,为进一步研究iRhom2的生物学功能及其机制奠定了良好的基础。
- 游颖马雨楠曾林孙兆增
- 关键词:慢病毒载体包装细胞
- 新大陆猴MHC Ⅰ类分子组成多态性和进化研究
- 科学家在相当长的一段时间内都认为新大陆猴的MHC Ⅰ 类分子的组成多态性低,并且进化模式与旧大陆猴有较大的不同。本研究以绒猴和棕头蜘蛛猴两种新大陆猴为研究对象,分析了二者MHC Ⅰ 类分子组成和进化模式。本研究共鉴定出1...
- 孙兆增李爱学刘一曹玉华严翔刘冰隋丽华曾林
- 川西亚种猕猴Mamu-A^*01等位基因的筛查
- 2009年
- 目的对川西亚种猕猴Mamu-A^*01等位基因的存在情况进行初步筛查。方法随机筛选2007年出生的猕猴101只,股静脉采取抗凝血200μl,提取基因组。根据Mamu.A^*01等位基因的特异性序列设计引物,利用序列特异性引物PCR(PCR—SSP)筛查101只猕猴Mamu—A^*01等位基因的存在情况。结果从101只猕猴中筛选到6只携带Mamu—A^*01等位基因的猕猴,但扩增所得到的序列与印度猕猴对应序列的同源性只有96%。结论在川西亚种猕猴群内存在Mamu—A^*01类似等位基因,但与印度猕猴有一定的差异,其作用和功能需要进一步的研究。
- 孙兆增李爱学胡仲明时彦胜白杰英曾林
- 关键词:中国猕猴等位基因
- 猕猴腹泻治疗操作与护理被引量:2
- 2009年
- 腹泻是猕猴消化道疾病中最主要的症状,常见于由志贺氏菌、沙门氏菌等细菌引起的胃肠炎,也见于由气候骤变、过食等各种应激引起的消化不良。由于猕猴自身存在的某些特点,腹泻治疗过程的操作与护理不当可直接影响治疗效果和疾病的恢复,甚至造成不必要的死亡。因此,根据不同病情,选择合适的操作和护理方法对于提高治愈率具有十分重要意义。笔者在长期动物医疗实践中积累了一些经验,现介绍如下。
- 耿志贤时彦胜孙兆增花秀春崔晓霞杨贤达
- 关键词:护理方法腹泻猕猴消化道疾病志贺氏菌沙门氏菌
- 鼠层粘蛋白α5链E_3、LG_4、LG_5片段的克隆及表达
- 2004年
- 从鼠的肝脏组织中提取总 RNA,采用 RT- PCR获得了鼠层粘蛋白 ( laminin)α5链的 E3 ( L G4 - 5)、L G4 和 L G5等 3个基因片段 ,与 NCBI数据库参考序列相比 ,同源性在 99%以上。将 E3 ( L G4 ,5)、L G4 和 L G5定向克隆到原核高效表达载体 Pet- 2 8a中 ,构建 Pet- 2 8a- E3 、Pet- 2 8a- L G4 、Pet- 2 8a- L G5等 3个原核表达质粒。将表达质粒转化表达受体菌 BL2 1中 ,IPTG诱导表达。收集菌液进行 SDS- PAGE电泳、Western- blotting分析 ,结果显示 ,这 3段基因在原核细胞中成功表达 ,薄层扫描显示表达蛋白占细胞总蛋白的 2 0 %以上。大量提取包涵体 ,纯化后免疫家兔 ,8周后得多克隆抗体 ,间接 EL ISA在抗体稀释到 1∶ 1 2 80
- 孙兆增张玉静展德文张艳宇连继勤
- 关键词:层粘蛋白克隆细胞基质信号分子
- 利用CRISPR-Cas9系统敲除小鼠黑色素瘤细胞系MATP基因的初步研究
- 2017年
- 目的利用CRISPR/Cas9系统,敲除小鼠黑色素瘤细胞系的MATP基因,为MATP基因的功能研究奠定基础。方法利用http://crispr.mit.edu/网站,设计针对MATP的特异性引物,并将引物链接到pCAS9/gRNA1载体。将阳性载体转染小鼠黑色素瘤细胞系B16F10,利用无限稀释的方法获得转染后的单克隆细胞株。提取不同细胞株的基因组,通过测序的方法进一步筛选出发生MATP基因切割的细胞株,并利用Western-blot的方法验证MATP的表达情况。结果成功获得了3株MATP基因敲除的细胞株,Western-blot结果表明,该细胞株不表达MATP蛋白。结论利用pCAS9/gRNA1载体,可以实现B16F10细胞系MATP基因的敲除。
- 殷慧慧李丹李钰孙菲董施施孔江峰王洪宝曾林法云智孙兆增
- 关键词:黑色素瘤细胞
- 猕猴外伤及其感染的治疗与护理被引量:2
- 2009年
- 目的对38只病猴的治疗及其方法进行探讨和总结,以达到提高,临床治愈率,寻求较为科学、有效的治疗方法。方法针对创伤及其感染程度采用新鲜创伤和感染创伤方法进行治疗。结果31只新鲜创伤病猴,经过认真治疗,2周内全部痊愈,治愈率为100%。7只感染创伤病猴,采用清创、抗菌消炎及合并治疗,加上精心护理,7只感染创伤病猴中除1只感染严重未能治愈外,其它6只全部治愈。结论外伤多发生在夏、秋季,做好季节性的防范工作很有必要。对于感染的猕猴,认真清洗创面是预防感染的最有效手段。
- 花秀春时彦胜耿志贤孙兆增孔德强曾林
- 关键词:猕猴外伤