冯海燕
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
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- 银屑病患者骨髓间充质干细胞表面标志表达情况研究
- 2010年
- 目的研究银屑病患者骨髓间充质干细胞的体外分离培养及表面标志的表达情况,为银屑病患者间充质干细胞特性研究提供了基础。方法采用密度梯度离心法分离患者与对照组骨髓单一核细胞,通过贴壁法培养骨髓间充质干细胞,用流式细胞术鉴定细胞表面标志CD44、CD29、CD34、CD45、HLA-DR。结果经流式细胞仪测定的第三代培养的BMSCs表面标志CD44、CD29阳性表达,CD34、CD45、HLA-DR阴性表达。分析CD44、CD29,发现银屑病组明显低于对照组。结论密度梯度离心法结合贴壁法可获得较纯的BMSCs。银屑病患者表面标志CD44、CD29与正常人比较低表达。
- 张永翠冯海燕刘瑞风张开明
- 关键词：银屑病骨髓间充质干细胞CD44CD29
- 银屑病患者骨髓基质细胞生物学活性研究被引量：6
- 2011年
- 目的:通过比较银屑病患者与对照组骨髓基质细胞生物学活性(包括细胞形态、免疫表型、增殖活性、自发凋亡率以及分泌细胞因子)的差异,揭示银屑病患者骨髓基质细胞的异常。方法:采用密度梯度离心法分别分离患者组与对照组骨髓单一核细胞,通过贴壁法培养骨髓基质细胞,收集传3代后的骨髓基质细胞及细胞培养上清液,流式细胞术鉴定其免疫表型及细胞凋亡率、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测其增殖活性以及ELISA法检测细胞培养上清液中白介素(IL)-6、血小板源性生长因子(PDGF)和表皮生长因子(EGF)的水平。结果:患者组和对照组比较,骨髓基质细胞形态相似、表型相同,但细胞增殖活性、凋亡率以及细胞因子分泌水平均有差异(P<0.05)。结论:银屑病患者骨髓基质细胞生物学活性异常,表明患者骨髓造血微环境可能存在异常。
- 刘瑞风冯海燕张静尹国华张开明
- 关键词：银屑病骨髓基质细胞生物学活性造血微环境
- 胎牛血清对骨髓间充质干细胞增殖的影响被引量：3
- 2010年
- 目的揭示不同来源胎牛血清对骨髓间充质干细胞增殖的影响。方法采用密度梯度离心法分离骨髓单一核细胞,通过贴壁法分别使用2种不同来源的胎牛血清培养银屑病患者和正常对照者骨髓间充质干细胞,记录各组细胞传1代所需的时间;MTT比色法检测患者骨髓间充质干细胞的增殖活性;An-nexinV法检测银屑病患者骨髓间充质干细胞自发凋亡率。结果使用胎牛血清1,银屑病患者骨髓间充质干细胞在培养过程中逐渐出现凋亡,最后全部死亡,正常对照者骨髓间充质干细胞传代所需时间也较长;而使用胎牛血清2,患者细胞可以传代,正常对照细胞传代所需时间缩短(P<0.05)。结论胎牛血清是影响骨髓间充质干细胞增殖的重要因素。
- 刘瑞风冯海燕尹国华张开明
- 关键词：胎牛血清间充质干细胞骨髓增殖
- 人骨髓间充质干细胞体外分离培养及向血管内皮样细胞分化的研究被引量：5
- 2010年
- 目的:研究人骨髓间充质干细胞(hMSCs)的体外分离培养方法及在特定微环境下分化为血管内皮样细胞的潜能,可能为银屑病研究提供实验基础。方法:密度梯度离心法结合贴壁法分离人骨髓间充质干细胞(hMSCs),体外扩增培养并进行鉴定。加入血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导hMSCs向血管内皮细胞分化,流式细胞仪进行细胞表型鉴定,Dil-ac-LDL摄取实验鉴定血管内皮细胞功能。结果:经流式细胞仪测定分离培养的hMSCsCD71、CD44阳性表达,CD54、CD106、CD45弱阳性表达,CD34、CD31、VWF、KDR、HLA-DR阴性表达;经bFGF、VEGF诱导后的hMSCs可见类似内皮细胞样改变,经流式细胞术检测,与对照组相比内皮细胞特异表面标志CD34、CD31、VWF、KDR表达转为阳性(P<0.01),而HLA-DR、CD54、CD106、CD45表达明显上调(P<0.01);诱导分化后的内皮样细胞具有摄取Dil-ac-LDL的能力。结论:密度梯度离心法结合贴壁法可获得较纯的MSCs;在bFGF、VEGF诱导作用下,hMSCs具有向内皮细胞分化潜能,产生功能性内皮细胞。
- 冯海燕刘瑞风张开明
- 关键词：骨髓间充质干细胞血管内皮细胞血管内皮细胞生长因子碱性成纤维细胞生长因子
- 银屑病患者骨髓间充质干细胞体外自发向血管内皮细胞分化1例被引量：4
- 2010年
- 目的:揭示1例银屑病患者骨髓间充质干细胞体外自发向血管内皮细胞分化。方法:采用密度梯度离心法分离骨髓单一核细胞,通过贴壁法培养骨髓间充质干细胞,经全量换液和2次半量换液后(即培养9 d)流式细胞术鉴定正常对照细胞免疫表型,再培养2d,采用流式细胞术和Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色法,分别对患者的细胞和正常对照细胞进行内皮细胞鉴定。结果:患者细胞在培养11 d后大部分分化为血管内皮细胞,而正常对照则仍为较纯的间充质干细胞。结论:该患者骨髓间充质干细胞体外培养自发向血管内皮细胞分化,这一现象表明银屑病患者骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化过程中可能存在异常,其间充质干细胞有易于向血管内皮细胞分化的倾向。
- 刘瑞风冯海燕张静尹国华张开明
- 关键词：银屑病骨髓间充质干细胞血管内皮细胞
