胡亚林
- 作品数：2 被引量：15H指数：2
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 一个新的内切葡聚糖酶基因umcel5K的克隆、表达及其表达产物的酶学特性被引量：6
- 2008年
- 从水牛瘤胃内容物的添加滤纸为碳源的富集培养物中提取未培养微生物的总DNA,以柯斯质粒为载体构建了1个含约8000个克隆的宏基因组文库,对文库进行活性筛选获得1个既表达CMCase活性又表达4-MUCase酶活性的克隆。亚克隆及测序分析发现1个潜在的可编码333个氨基酸的ORF(Open Reading Frame),其蛋白质产物与1个来源于未培养细菌的糖苷水解酶家族5的纤维素酶Cel A的同源性最高,两者的一致性为53%,相似性为68%。将PCR扩增的该基因完整的ORF克隆入表达载体pET30a(+),在大肠杆菌中得到其过量表达产物。经过Ni-NTA纯化后,该表达产物(Umcel5K)具有CMCase活性和4-MUCase酶活性,其最适pH是4.5~5.0,最适温度是50°C。pH耐受性检测表明,该酶在pH4~4.5比较稳定。温度耐受性实验表明该酶不耐高温,在55°C以下比较稳定。经过镍柱纯化的酶液比活为26.15 U/mg。部分金属离子如Fe3+、Cr2+或Cu2+会抑制该酶的酶活,而另外一些金属离子如K+、Li+等对Umcel5K的活性影响不大。
- 谭婉新刘利胡亚林段承杰唐纪良冯家勋
- 关键词：未培养微生物宏基因组文库内切葡聚糖酶克隆
- 两株纤维素降解真菌的分离鉴定及其产纤维素酶酶学性质的初步研究被引量：9
- 2008年
- 从纤维素富集的环境中采集82个落叶层下面的土壤和腐朽的树木样品，经过初筛获得大约3500株纤维素降解真菌，二次筛选后得到16株纤维素酶活性较高的真菌。以Avicel为底物，测定16株纤维素降解真菌的粗酶活性，发现真菌菌株S10和X5对Avicel有明显的活性，分别为0．119IU／mL、0．025IU／mL。通过形态学观察和rDNA的ITS（内转录间隔区）序列分析，菌株S10被鉴定为针尾曲霉（Aspergillus aculeatus），菌株X5为草酸青霉（Penicillium oxalicum）。对针尾曲霉S10和草酸青霉X5的粗纤维素酶的酶学性质进行初步研究，发现粗酶活性最高的最适pH值分别为5．0、6．0，最适反应温度分别为50～60℃、45～50℃。
- 胡亚林冼亮刘果段承杰冯家勋
- 关键词：真菌纤维素酶
