王华俊
- 作品数：76 被引量：104H指数：6
- 供职机构：河南省动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：河南省高等学校创新人才培养工程国家自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生理学更多>>
- 大片吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的原核表达及免疫原性分析被引量：3
- 2012年
- 构建大片吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶(Fg.TPx)原核表达质粒,经大肠埃希菌Rosetta表达融合蛋白(Fg.TPx/His)并对其进行纯化和初步鉴定。PCR扩增Fg.TPx的基因片段,亚克隆至pET32a(+)中构建重组表达载体pPET32a-Fg.TPx。IPTG诱导表达,经镍离子亲和层析分离纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。重组质粒经限制性内切酶双酶切和测序分析表明构建成功,表达产物以可溶性和包涵体形式存在,纯度为90%,Wsetern blot证实该蛋白可与抗His单克隆抗体发生特异性结合反应,分子质量为TPx和His分子质量之和,表明是融合蛋白。重组蛋白可以被大片吸虫感染水牛阳性血清特异性识别。免疫家兔产生的抗体效价最高可达1∶4 000。成功构建了p ET32a-Fg.TPx原核表达质粒,重组蛋白得到高浓度表达,具有抗原性,为进一步研究其在大片吸虫病诊断中的应用奠定了基础。
- 鲍玉芳李伍杰王华俊石云良王俊宁黄维义
- 关键词：大片吸虫抗原性
- 河南省腹泻病死仔猪主要病毒性腹泻病原调查
- 2024年
- 为了解导致河南省仔猪病毒性腹泻的主要病原种类及分布特征,2022年在豫东、豫南、豫西、豫北、豫中等地区无害化处理厂采集临床腹泻病死仔猪的肠管及其内容物样品共计496份,采用三重荧光RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PoRV)、猪冠状病毒(PDCoV)及猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV),并分析不同季节、不同地区以及不同病毒混合感染情况。检测结果显示:496份腹泻病料样品中,PoRV、PDCoV阳性检出率(7.66%、8.27%)相对较高,SADS-CoV未被检出;不同季节统计结果显示,TGEV仅在春季检出,PEDV、PoRV在春、冬两季检出,PDCoV一年四季均有检出;不同区域检测结果显示,TGEV仅在豫东被检出,PEDV在豫北的阳性检出率最高,PoRV、PDCoV在豫西的阳性检出率(16.67%、26.67%)最高;病毒混合感染统计结果显示,以2种病毒混合感染为主,其中PEDV+PDCoV阳性检出率最高(1.81%)。结果表明,河南省仔猪病毒性腹泻主要发生在冬、春季节,PEDV、PoRV、PDCoV为主要病毒性病原,且存在混合感染情况,其感染存在一定的区域特征。本研究结果为河南省养猪场和畜牧兽医主管部门制定猪病毒性腹泻防控策略提供了数据支持。
- 房大学刘光辉王华俊赵胜杰赵美雪宋丹郭洛生
- 关键词：病毒性腹泻仔猪
- 鉴别猪圆环病毒2型和3型的二重FQ-PCR检测试剂盒
- 本发明提供一种鉴别猪圆环病毒2型和3型的二重FQ‑PCR检测试剂盒。本发明是针对PCV2和PCV3的Rep蛋白和Cap蛋白基因同源性较低的特点，分别以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为扩增靶区域，各设计1...
- 闫若潜班付国赵雪丽王东方王华俊马震原王淑娟谢彩华曹伟伟房大学李桂莲仲伟平闫志玲张代宝
- 文献传递
- 大片形吸虫病免疫胶体金诊断试纸条的研制
- 大片形吸虫(Fasciola gigantica)病是由大片形吸虫感染引起的寄生虫病,呈全球性分布。动物感染大片形吸虫后引起急性、慢性疾病,或呈隐性经过,给全球经济动物的生产造成巨大经济损失;同时,大片形吸虫病也是一种食...
- 王华俊陈汉忠谢彩华
- 关键词：大片形吸虫单克隆抗体胶体金试纸条
- 文献传递
- 河南省主要动物疫病病原抗原基因分子遗传变异分析
- <正>引言猪蓝耳病、猪流行性腹泻等主要动物疫病一直以来对猪业养殖带来很大的影响,为了及时掌握我省几种主要猪病的流行变异规律,我省猪病防控做好预警预报及免疫措施,我中心就省内不同地区、不同猪场的主要疫病阳性病料进行了调查及...
- 谢彩华班付国闫若潜王东方王淑娟马震原王华俊赵雪丽曹伟伟
- 关键词：动物疫病分子遗传流行毒株猪蓝耳病病毒抗原基因
- 文献传递
- 水牛伊氏锥虫病免疫胶体金试纸条的研制及初步应用
- 为建立一种快速、简便、灵敏、适应现场应用的水牛伊氏锥虫病检测方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的OB6单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上涂加纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的TB7单克隆抗体和兔...
- 孟盟曹池陈汉忠刘明如王华俊奉彬陈国宝
- 关键词：伊氏锥虫病单克隆抗体胶体金试纸条
- 文献传递
- 猪δ冠状病毒和急性腹泻综合征冠状病毒检测试剂盒
- 本发明提供猪δ冠状病毒和急性腹泻综合征冠状病毒检测试剂盒。本发明提供的用于猪δ冠状病毒和猪急性腹泻综合征冠状病毒二重实时荧光定量PCR检测的引物和探针(SEQ ID NO:1‑6)，以及基于所述引物和探针建立的二重实时荧...
- 闫若潜班付国谢彩华王东方刘影马震原郭育培杨海波王淑娟王华俊柴茂刘梅芬赵雪丽刘敏赵美雪
- 大片形吸虫病免疫胶体金诊断试纸条的研制
- 大片形吸虫(Fasciola gigantica)病是由大片形吸虫感染引起的寄生虫病，呈全球性分布。动物感染大片形吸虫后引起急性、慢性疾病，或呈隐性经过，给全球经济动物的生产造成巨大经济损失;同时，大片形吸虫病也是一种食...
- 王华俊陈汉忠谢彩华
- 关键词：大片形吸虫单克隆抗体胶体金试纸条
- 塞内卡病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：10
- 2019年
- 为建立塞内卡病毒(SVA)荧光定量RT-PCR(FQ-PCR)检测方法,本研究根据GenBank中SVA 3D基因保守区域序列设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以SVA cDNA为模板,经优化反应条件,建立了SVA FQ-PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对28份临床疑似SVA感染样品进行了检测,并与本实验室建立的SVA RT-PCR方法检测结果及测序结果比较分析。结果显示,该方法仅对SVA出现阳性扩增信号,对BHK-21正常细胞对照和口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪伪狂犬病毒等5种病原均未出现扩增,特异性较强;该方法最低检测限为10.4拷贝/μL质粒标准品,比常规RT-PCR敏感性高10倍,敏感性较高;该方法批内及批间变异系数均小于4%,重复性好。利用该方法对28份疑似SVA感染样品检测显示,检出9份阳性样品,与测序结果一致,而常规RT-PCR仅检出6份阳性样品,其敏感性高于常规RT-PCR方法,两种方法的符合率为89.3%。本研究为SVA的早期检测提供了特异、敏感、快速的方法。
- 王淑娟王东方赵月龙谢彩华赵雪丽马震原王华俊杨朋霞闫若潜
- 关键词：荧光定量RT-PCR
- 重组猪α干扰素/白介素2融合蛋白的编码基因和制备方法
- 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及重组猪α干扰素/白介素2融合蛋白的编码基因和制备方法。本发明提供重组猪α干扰素/白介素2融合蛋白的编码基因，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。该重组猪α干扰素/白介素...
- 闫若潜班付国杨海波冯桂丹柴茂刘影刘梅芬王淑娟马震原赵雪丽谢彩华郭育培王东方王翠王华俊朱前磊刘敏
