李方方
- 作品数：9 被引量：12H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- “十二五”期间重庆市公立医院科研产出分析被引量：3
- 2019年
- 目的分析"十二五"期间重庆市公立医院科研产出的情况。方法制定调查表对重庆市102所公立医院进行全面调查,分析各类科研产出指标的情况。结果 "十二五"期间重庆市公立医院承担科研项目共5 859项,获得科研经费138 674. 25万元,总体呈现增长的趋势,但也面临高水平科研项目不足、科研成果增长缓慢,发明专利不足等问题。结论公立医院应提高自身科研条件和能力、分类区别发展,同时加强医院间科研协作,提高科研产出。
- 李方方丁国富严波
- LincRNA AC027700.1在小鼠蜕膜化中的表达研究被引量：2
- 2022年
- 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度大于200 nt、不具有蛋白编码潜能的RNA分子。在细胞生长发育、物质代谢以及疾病等的发生发展过程中起关键调控作用,但在蜕膜化相关领域研究报道较少。为了探究lincRNA AC027700.1在早孕小鼠子宫内膜中的表达规律,初步探讨AC027700.1在小鼠蜕膜化中的作用,本研究利用qRT-PCR检测AC027700.1在小鼠孕第6 d胚胎着床点及着床旁子宫组织中的表达;构建了假孕小鼠体内人工诱导蜕膜化模型和原代小鼠子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化模型,qRT-PCR检测AC027700.1在人工诱导蜕膜化的组织和细胞中的表达;通过分离细胞核、细胞质RNA,qRT-PCR检测AC027700.1在胞核和胞质中的相对表达水平;利用GOseq和KOBAS软件对AC027700.1下游靶基因进行GO和KEGG分析。结果表明,AC027700.1在小鼠孕第6 d着床点子宫组织中的表达显著高于着床旁;AC027700.1在成功诱导蜕膜化的子宫内膜组织及细胞中的表达显著高于未诱导的组织及细胞;AC027700.1主要定位于细胞核内;AC027700.1下游靶基因主要富集于自噬通路、细胞周期以及RNA转运等通路。本研究初步揭示了lincRNA AC027700.1可能与早孕子宫内膜蜕膜化有关,但具体作用及调节机制还有待进一步研究。
- 谭丽萍高茹菲尹鑫陈雪梅李方方袁柳何俊琳
- 关键词：蜕膜化子宫内膜着床
- 孕早期增塑剂DEHP亚急性暴露影响蜕膜反应并增加流产风险
- 2024年
- 目的:探究邻苯二甲酸酯类增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)亚急性暴露对小鼠子宫内膜蜕膜反应和流产风险的影响。方法:分别选取300、1000、3000 mg·kg^(-1)·d^(-1)三个浓度梯度的DEHP对CD1小鼠进行经口亚急性暴露28 d。建立DEHP亚急性暴露小鼠早期自然妊娠模型和人工诱导假孕小鼠蜕膜反应模型,分别取自然妊娠第7天子宫组织和人工诱导蜕膜反应小鼠妊娠第8天诱导侧子宫组织,通过苏木精-伊红染色(HE染色)、Masson染色、TUNEL检测、蛋白质印迹法检测DEHP亚急性暴露对小鼠蜕膜反应的影响。构建300 mg·kg^(-1)·d^(-1) DEHP亚急性暴露小鼠自然流产模型,观察妊娠第10天的妊娠结局,探究蜕膜反应受损对小鼠妊娠的影响。结果:与空白对照组比较,DEHP大剂量组受孕率显著性降低(P<0.05);HE染色显示DEHP小剂量组和中剂量组蜕膜基质细胞排列杂乱、细胞核形态不规则、胞浆染色不均、多核细胞数显著降低;Masson染色显示DEHP小剂量组和中剂量组蜕膜组织的胶原纤维分布更多、数量增多、排列杂乱;TUNEL检测显示暴露组蜕膜组织细胞凋亡增加;蛋白质印迹法检测显示暴露组子宫内膜蜕膜反应标志分子BMP2蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01);在米非司酮流产刺激下DEHP小剂量组小鼠流产率、胚胎吸收率显著升高,胚胎数、子宫湿重、子宫面积、胎盘湿重显著减少(P<0.05或P<0.01)。结论:DEHP亚急性暴露导致小鼠子宫内膜蜕膜反应受损加重小鼠妊娠流产风险。
- 刘秋菊谭丽萍袁柳陈雪梅李方方何俊琳高茹菲
- 关键词：米非司酮流产小鼠
- 苯并[a]芘通过CXCL12/CXCR4轴影响早孕小鼠子宫内膜炎症反应被引量：2
- 2022年
- 目的探讨CXCL12/CXCR4轴在苯并[a]芘(Benzo[a]pyrene,B[a]P)影响早孕小鼠胚胎着床过程中的作用及其机制。方法将8周龄昆明小鼠每晚按雌雄2∶1比例合笼,次晨将查得阴栓者记为孕第1天(D1),并随机分为对照组和B[a]P组。B[a]P组孕鼠每日晨称重后以0.1 ml/10 g动物体重灌胃给予0.2 mg/(kg·d)B[a]P,对照组则灌胃等体积玉米油。体外分离小鼠原代子宫内膜基质细胞,将其分为对照组、B[a]P组和rhCXCL12+BaP联合处理组。ELISA法检测小鼠血清CXCL12水平;qRT-PCR、Western blot和免疫组化法检测CXCL12、CXCR4的表达;qRT-PCR和Western blot检测炎症因子IL-1β、IL-10、NLRP3和TNF-α的表达;Western blot检测着床相关因子MUC1、MMP9和HOXa10的表达情况。结果与对照组相比,B[a]P暴露明显降低孕早期小鼠血清中CXCL12含量,同时下调小鼠子宫组织及基质细胞内CXCL12和CXCR4的表达,抑制炎症反应的发生,影响着床相关因子表达。上调小鼠原代子宫内膜基质细胞内CXCL12表达,可缓解B[a]P所导致的炎症抑制和着床相关因子表达异常。结论B[a]P可能通过下调CXCL12/CXCR4表达,抑制炎症反应,影响孕早期小鼠胚胎植入过程。
- 黄佳颖刘敏徐翰婷杨节周美琳高茹菲李方方陈雪梅
- 关键词：CXCL12/CXCR4胚胎着床
- 缺氧/复氧经DNA甲基转移酶途径减弱人绒毛外滋养细胞的迁移和侵袭被引量：1
- 2023年
- 目的探讨缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)对人绒毛外滋养细胞(extravillous trophoblast,EVT)侵袭能力的调控机制。方法体外培养EVT永生化细胞系HTR-8/SVneo、早孕胎盘绒毛分离的原代EVT细胞和绒毛外植体,1%O2和20%O2浓度转换条件下模拟EVT细胞侵入子宫时的H/R环境,Western blot、免疫荧光技术检测细胞侵袭等关键因子的表达,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭。结果经H/R诱导后,HTR-8/SVneo细胞迁移和侵袭能力减弱,体外培养的绒毛外植体的外延能力和分离的原代EVT细胞迁移、侵袭能力均减弱;H/R条件下,HTR-8/SVneo细胞中基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9,整合素integrin-β1和integrin-α5蛋白水平降低(P<0.05),DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMTs)的蛋白表达亦下调(P<0.01);H/R条件下,原代EVT细胞中上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的正调控因子Slug、Snails等被抑制(P<0.05),上皮细胞标志因子E-cadherin表达上升(P<0.01),MMP-2和-9、integrin-β1和-α5蛋白水平下降(P<0.05),细胞侵袭能力下降并伴随DNMT1、DNMT3A的表达下降(P<0.05)。HTR-8/SVneo细胞中过表达DNMT1、DNMT3A和DNMT3B可促进间质型标志因子N-cadherin、MMP-2和-9的蛋白表达上调(P<0.05)。结论H/R通过DNMTs调控MMP-2/9等EMT相关因子的表达从而减弱EVT细胞迁移和侵袭能力。
- 胡司晨兰曦丁裕斌丁裕斌陈恩祥李方方
- 关键词：绒毛外滋养细胞DNA甲基转移酶上皮-间充质转化迁移
- 重庆市32所三甲医院科研投入产出研究
- 科学研究是三甲医院持续发展的动力，积极的科研活动在提高医疗服务水平和促进医院可持续发展发挥着重要作用，也是衡量医院医疗水平和学术水平的重要指标。《重庆市卫生计生发展“十三五”规划》中指出要充分发挥科技核心推动力的作用，促...
- 李方方
- 关键词：数据包络分析
- 孕早期增塑剂DEHP暴露降低长链非编码RNA RP24-315D19.10表达影响子宫内膜蜕膜反应被引量：2
- 2023年
- 目的:探索孕早期增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)暴露对小鼠子宫内膜蜕膜反应的影响及长链非编码RNA RP24-315D19.10的作用。方法:构建DEHP(1000 mg·kg^(-1)·d^(-1))暴露的早孕小鼠模型,取妊娠第6天子宫,通过苏木精-伊红染色和免疫荧光检测其对小鼠子宫内膜蜕膜区病理变化及相关分子表达。构建DEHP暴露(0.1、0.5、2.5、12.5、62.5μmol/L)的原代小鼠子宫内膜基质细胞体外蜕膜诱导模型,通过光学显微镜和鬼笔环肽染色观察细胞形态变化,免疫荧光、实时逆转录PCR、蛋白质印迹法检测蜕膜反应标志蛋白的表达情况。实时逆转录PCR分别检测RP24-315D19.10在蜕膜组织和蜕膜细胞中的表达。利用在线工具lnc Locator和RNA荧光原位杂交检测RP24-315D19.10的细胞定位,并运用在线工具Anno Lnc2预测与RP24-315D19.10相结合的微RNA(mi RNA)。结果:DEHP暴露组的胚胎着床点数、子宫湿重、子宫面积显著低于空白对照组,蜕膜反应标志蛋白基质金属蛋白酶、同源异型框A10的表达也明显少于空白对照组(均P<0.05)。随着DEHP浓度增加,蜕膜细胞中dtprp的表达逐渐降低。2.5μmol/L DEHP暴露组中基质细胞向蜕膜细胞的形态转化受到明显抑制,蜕膜反应标志蛋白同源异型框A10、骨形成蛋白2及增殖细胞核抗原表达水平显著低于空白对照组(均P<0.05)。DEHP暴露的蜕膜组织和蜕膜细胞中RP24-315D19.10的表达显著减少(均P<0.05)。RP24-315D19.10主要定位于细胞质,与45个mi RNA有潜在结合位点,其中mi R-138-5p、mi R-155-5p、mi R-183-5p及mi R-223-3p与子宫内膜蜕膜反应有关。结论:孕早期DEHP暴露导致小鼠蜕膜反应损伤可能与RP24-315D19.10表达下调有关。
- 袁柳谭丽萍孙智芳陈雪梅李方方何俊琳高茹菲
- 关键词：长链非编码RNA微RNA小鼠
- 聚苯乙烯微塑料联合高脂处理对血管内皮细胞的影响
- 2025年
- 目的:探讨聚苯乙烯微塑料(polystyrene microplastics,PS-MPs)联合高脂处理对血管内皮细胞的影响。方法:使用含5%胎牛血清的DMEM培养基培养人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)。对HUVECs采用常规培养、高脂处理和PS-MPs联合高脂处理。实验分为对照组、高脂处理组和PS-MPs联合高脂处理组。采用CCK-8试剂检测细胞活力,F-actin染色检测细胞形态变化情况,流式细胞术、划痕实验和管腔形成实验检测细胞凋亡、迁移和成管能力。结果:HUVECs暴露于高脂环境后,细胞活力明显降低,细胞形态皱缩,细胞凋亡水平明显增加,细胞迁移和成管能力均明显降低。相较于高脂处理组,PS-MPs联合高脂处理后,细胞活力,细胞形态,细胞凋亡水平和细胞迁移能力均没有明显变化,但细胞成管能力进一步受损。结论:高脂处理会影响细胞活力,改变细胞形态,损伤血管内皮细胞功能;在高脂处理基础上联合PS-MPs处理后,可加剧血管内皮细胞功能损伤。
- 王静刁家妮龙菁何渝广谭丽萍陈雪梅李方方何俊琳王应雄高茹菲李伟轲
- 关键词：高脂人脐静脉血管内皮细胞
- 腺病毒介导靶向VEGFsiRNA对K562细胞凋亡及凋亡抑制基因survivin表达影响的研究
- 第一部分靶向VEGF siRNA重组腺病毒构建及鉴定
目的
构建携带靶向血管内皮生长因子小干扰RNA/(VEGF siRNA/)的重组腺病毒质粒,收获高滴度的重组腺病毒,为进一步研究提供载体工具。...
- 李方方
- 关键词：重组腺病毒SURVIVIN细胞凋亡
- 文献传递
