目的观察先天性空肠闭锁Ⅰ型隔膜组织黏膜层内的潘氏细胞分布及黏膜层炎症反应。方法选用5例先天性空肠闭锁Ⅰ型患儿的隔膜组织,隔膜位置距离Treitz韧带<15 cm,术中行肠切除和肠吻合过程中钳取收集隔膜临近的正常肠壁作为对照。2组标本分别行免疫组化染色,并进行半定量比较溶菌酶蛋白、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达。采用Image pro plus 6.0软件分析免疫组化平均光密度。统计学方法采用独立样本t检验。结果隔膜组织黏膜绒毛结构少而紊乱,未见典型黏膜上皮隐窝,隔膜组织肠腺基底部未见发育形态完整的潘氏细胞,隔膜组织潘氏细胞的溶菌酶蛋白表达(0.110±0.015)较正常空肠标本(0.350±0.030)明显减少,差异有统计学意义(t=52.760,P=0.001)。隔膜组织黏膜层IL-6和TNF-α表达(分别为0.058±0.010、0.076±0.009)较正常空肠标本(分别为0.036±0.007、0.022±0.004)明显增多,差异均有统计学意义(t=52.760,P=0.012;t=86.520,P=0.001)。结论与正常肠壁相比,先天性空肠闭锁I型隔膜组织发育具有不完善性,由潘氏细胞介导的黏膜防御功能和屏障功能降低,黏膜炎症反应增强。胚胎期肠道干细胞向潘氏细胞分化异常可能参与了隔膜组织的形成。
目的观察Ⅰ型小肠闭锁肠腔隔膜组织黏膜β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TIR-domain-containing adapter-inducing interferon-β,TRIF)、肿瘤坏死因子受体相关因子蛋白3(tumor receptor associated factor,TRAF3)、干扰素-β(interferon-beta,IFN-β)和干扰素-λ1(interferon-λ1,IFN-λ1)分子的表达特征,探索胚胎期Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)-TRIF非依赖性信号通路与肠管再通过程的相关性。方法采用免疫组化技术观察和比较新生儿正常肠壁和Ⅰ型肠闭锁隔膜组织黏膜层内TRIF通路内重要分子的表达特征。收集16例患儿组织标本(解放军总医院儿科医学部1例,首都儿科研究所1例,河北医科大学第二医院6例,哈尔滨市儿童医院5例,长春市儿童医院3例),均为术中证实的Ⅰ型肠闭锁隔膜组织,为隔膜组;以同一患儿术中行肠切除、肠吻合过程中钳取收集的正常肠壁组织为对照组。患儿手术年龄为出生后1~3 d,其中空肠闭锁13例(男5例,女8例),回肠闭锁3例(男1例,女2例)。将组织标本转入快速组织处理系统进行组织标本连续切片。采用常规HE染色进行定位,隔膜组和对照组各16例,每个病例染色后随机取4个视野(非肌肉区域),应用图像分析软件Image pro plus 6.0测量积分光密度(integral-optical density,IOD)和面积(Area),并计算出平均吸光度(A)(OD)。OD=IOD/Area。采用t检验和双盲法分析免疫组化平均光密度。结果新生儿正常肠壁组织黏膜层的TRIF、TRAF3、IFN-β和IFN-λ1的分子表达不明显或低表达,在隔膜组织黏膜层表达显著。半定量分析结果显示,TLR4、MyD88、TRAF6和IRAK4分子在隔膜组织黏膜层表达比新生儿正常肠壁黏膜层多,二者差异有统计学意义(隔膜组织分别为0.6316±0.0268,0.5066±0.0378,0.6091±0.0270,0.3841±0.0610,正常肠壁分别为0.4333±0.0409,0.3758±0.0365,0.4108±0.0263,0.2108±0.0573,P值分别为0.0042,0.0360,0.0057,0.0137)。结论TLR4/MyD88信号通路参与了Ⅰ�
