安秀梅 作品数:48 被引量:244 H指数:8 供职机构: 天津医科大学附属肿瘤医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市科技创新专项资金 天津市高等学校科技发展基金计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
新型肺癌DC疫苗的制备和抗肿瘤免疫活性研究 李慧 苏延军 黄宗堂 曹水 任秀宝 魏枫 于津浦 张澎 安秀梅 DC疫苗是肿瘤免疫治疗的重要手段之一,并已显示出良好的应用前景,通过探讨更为有效、实用的抗原负载形式、细胞诱导方法、与其他免疫治疗手段的联合应用等,进一步提高DC疫苗的抗肿瘤免疫活性,有助于最终提高其临床应用效果,对于D...关键词:关键词:DC疫苗 抗肿瘤 免疫活性 肺癌 母胎微嵌合在单倍体相合活化外周造血干细胞治疗肿瘤中的作用初探 2009年 目的探讨母胎微嵌合在单倍体相合活化外周造血干细胞治疗实体瘤中的作用。方法选取25例进行无预处理的人类白细胞抗原单倍体相合活化外周造血干细胞治疗的实体肿瘤患者,采用巢式PCR-序列特异引物法检测供、受者之间母胎微嵌合状态,比较不同母胎微嵌合状态的供、受者混合淋巴细胞增殖反应(MTT法),供者细胞植入情况(FISH法),血清Th1/Th2细胞因子水平(ELISA法)及生存时间。结果母子(女)移植的患者中母胎微嵌合检出率40%,父子(女)移植的患者中为0。母胎微嵌合阳性患者对其供者的增殖反应显著低于对无关第三人(P=0.03),而阴性患者则无此现象。FISH结果显示,只有1例母胎微嵌合阳性的男性患者供者干细胞植入。母胎微嵌合阴性17例患者IFNγ值从治疗后1周的171.4(26.3~258.4)ng/L,治疗后1个月急剧降至29.4(1.2~39.9)ng/L。比较所有母子(女)移植患者,发现母胎微嵌合阳性组生存时间(31.2±4.3)个月显著长于阴性组的生存时间(11.1±3.3)个月(P=0.036)。结论患者体内的母胎微嵌合可能通过诱导其对单倍体相合供者的特异性免疫耐受,延长供者细胞的体内停留时间,维持体内的正向免疫微环境,并延长生存时间。 曹水 于津浦 李慧 安秀梅 辛宁 任秀宝关键词:肿瘤 外周血干细胞移植 肿瘤细胞来源胞外体的分离鉴定与功能检测 被引量:1 2009年 目的:分离提纯和电镜鉴定乳腺癌细胞系MCF-7细胞分泌的胞外体,并观察其对淋巴细胞增殖的影响。方法:将细胞培养上清进行分步离心、浓缩、密度梯度离心获得纯化后的胞外体,并对胞外体进行透射电镜鉴定。将分离纯化的胞外体加入含有IL-2的淋巴细胞培养体系中,用MTT试验计算淋巴细胞的增殖率,观察胞外体对淋巴细胞增殖的影响。结果:从2×107个细胞可获得20mL纯化的胞外体,测得其总蛋白浓度为(1.84±0.01)g/L,经电镜鉴定MCF-7细胞来源的胞外体直径为55~70nm,为有膜包裹的囊泡状结构,大小较为均一,形态特征与观察到的多泡体的内部囊泡的大小和形态是一致的。MTT试验显示它能够抑制IL-2诱导的淋巴细胞增殖,并且随剂量增加抑制作用增强。结论:肿瘤细胞来源的胞外体可通过细胞培养上清分步离心浓缩纯化得到,其不仅具有胞外体的形态学特征,同时可对IL-2诱导的淋巴细胞增殖产生剂量依赖性的抑制作用。 崔焱 于津浦 李慧 杨莉莉 魏枫 安秀梅 任秀宝关键词:乳腺肿瘤 免疫耐受 细胞分离 TSLP在肺癌组织中的表达及其与调节性T细胞的相关性 被引量:7 2010年 目的:探讨胸腺基质淋巴生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)在肺癌组织中的表达及其与临床指标以及局部调节性T细胞(Regulatory T cells,Tregs)数量的相关性。方法:分别采用Q-RT-PCR和免疫组织化学染色方法检测TSLP在不同病变类型的肺组织中的表达,分析TSLP在不同病变肺组织中的表达差异;并运用免疫组化方法检测TSLP蛋白在不同病理类型的肺癌组织中的表达,分析TSLP表达与临床病理特征之间的相关性;采用免疫组化法检测肺癌组织中的Tregs细胞,分析TSLP表达与肿瘤局部Tregs细胞数量之间的关系。结果:TSLP基因在肺癌组织、癌旁组织、非肿瘤肺上皮均表达阳性,且表达差异无统计学意义;TSLP蛋白表达于胞浆中,其在肺癌组织中的阳性表达率(69.57%)显著高于肺的良性病变(13.33%)和非肿瘤肺上皮(30.00%),且TSLP表达与肿瘤大小和淋巴结转移有关;TSLP表达阳性的患者其肿瘤局部浸润的调节性T细胞数量明显高于TSLP阴性组(P<0.05)。结论:TSLP蛋白在肺癌组织中表达增加,且与肿瘤局部调节性T细胞数量增多有关,这提示TSLP可能是通过诱导Tregs增加在肺癌免疫耐受中发挥作用。 赵华 李慧 于津浦 苏延军 杨莉莉 魏枫 安秀梅 徐峰 岳东升 赵晓亮 任秀宝关键词:TSLP 调节性T细胞 FOXP3 免疫耐受 肺癌 CD4+CD25+调节性T细胞对肺癌患者CIK细胞活性的影响及其调控 李慧 黄宗堂 曹水 任秀宝 魏枫 刘虹 于津浦 张澎 安秀梅 本研究着重探讨CD4+CD25+调节性T细胞对CIK抗肿瘤活性的影响,以及树突状细胞对CD4+CD25 +细胞比例及功能的影响。首先,证实了CD4+CD25 +细胞确实可以抑制CIK细胞的增殖和杀伤活性;同时,通过抗体封...关键词:关键词:调节性T细胞 CIK细胞 肺癌 肿瘤患者自体CD3AK与LAK细胞生物学特性研究 被引量:5 2000年 目的 :CD3AK细胞是由抗CD3单克隆抗体和IL 2共同激活诱导的肿瘤杀伤细胞。对 30例肿瘤患者自体CD3AK细胞及LAK细胞进行了比较性研究。方法 :采用MTT法检测CD3AK细胞及LAK细胞的杀瘤活性 ,应用流式细胞术进行免疫标志物分析。结果与结论 :肿瘤患者PBMNC诱导后产生的CD3AK细胞较LAK细胞有更强的增殖能力 ,但对Raji、K5 6 2细胞的生长抑制作用无明显区别 ;40 %~ 6 0 %CD3AK细胞表达CTL样表型 (CD3+ CD8+ ) ,约 40 %CD3AK细胞表达NK表型 (CD5 6 + )。同时亦观察到不同患者的免疫功能存在明显的个体差异。 徐琪 安秀梅 邵莹 和世彦 郝希山关键词:CD3AK LAK 细胞 生物学特性 肿瘤 CD40L在CD4^+CIK诱导Fas抵抗乳腺癌细胞凋亡中的机制研究 被引量:1 2009年 目的:探讨CD40/CD40L交联在诱导Fas抵抗乳腺癌细胞凋亡中的免疫学机制。方法:体外大规模扩增自体CIKs细胞,利用磁珠分选系统纯化其中CD4+T细胞亚群(CD4+CIK)。用抗Fas激活性抗体CH11诱导乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞凋亡,比较有无CD4+CIK培养上清预处理对MDA-MB-231细胞凋亡率的影响。MDA-MB-231细胞与CD4+CIK在不同效靶比下共孵育6小时和24小时,分别用流式细胞仪检测凋亡率和膜Fas表达,定量RT-PCR法检测胞浆内Bax、Bcl-2、FADD和c-FLIP的mRNA含量。在共培养系统中加入抗FasL、抗CD40L和抗IFN-γ中和抗体,分别比较MDA-MB-231细胞凋亡率、膜Fas表达和四种凋亡相关基因的mRNA含量。结果:MDA-MB-231细胞对CH11诱导的凋亡有抵抗,但经过CD4+CIK培养上清预处理后,敏感性显著提高。MDA-MB-231细胞与CD4+CIK共孵育24小时后,细胞凋亡率明显升高,并与膜Fas表达量呈正相关(r=0.618,P<0.01)。在共培养体系中添加抗FasL和抗CD40L中和抗体可完全清除增加的细胞凋亡,而抗IFN-γ中和抗体只能部分清除,凋亡率分别从(33.70±2.77)%降至(7.57±1.15)%、(7.80±0.26)%和(14.21±1.70)%。但MDA-MB-231细胞膜Fas表达可以等效地被抗CD40L和抗IFN-γ中和抗体封闭,分别从(25.90±2.45)%降至(6.93±1.56)%和(8.73±4.70)%。定量RT-PCR结果显示MDA-MB-231细胞与CD4+CIK共孵育6小时时胞浆中c-FLIP表达下降与凋亡率显著相关(r=0.898,P<0.05),而抗CD40L中和抗体可诱导c-FLIP表达升高。结论:CD40/CD40L交联和IFN-γ刺激均参与了CD4+CIK诱导的MDA-MB-231细胞凋亡,但其Fas抵抗性的逆转主要是通过CD40/CD40L交联抑制c-FLIP的mRNA合成而实现的。 于津浦 蒋华蔚 曹水 李慧 安秀梅 付晓达 任秀宝关键词:CIK FAS CD40L C-FLIP VAV1蛋白与肿瘤T细胞免疫抑制的深入实验研究 任秀宝 杨莉莉 李亦工 张维红 安秀梅 韩颖 魏枫 付晓达 张澎 本项目通过对Vav1与肿瘤浸润T淋巴细胞活性的研究,提出肿瘤诱导的T细胞失能的分子机制;初步探讨肿瘤浸润T淋巴细胞中Vav1基因的表达情况及肿瘤局部微环境中IDO的表达的相关性,提出肿瘤诱导的T细胞失能的可能分子机制;分...关键词:关键词:肿瘤诱导 蛋白 T淋巴细胞 分子机制 HLA半相合外周血活化干细胞治疗晚期实体瘤的疗效 被引量:7 2010年 目的:观察HLA半相合外周血活化干细胞(HLA haploidentical peripheral blood stem cells,haplo-PBSCs)对晚期难治性实体瘤患者的临床抗肿瘤疗效以及不良反应。方法:入组42例全部为2004年10月至2007年10月天津医科大学肿瘤医院生物治疗科收治的晚期难治性恶性肿瘤患者(所有入组患者均知情同意,试验工作经医院伦理委员会批准),其中卵巢癌12例,肾癌9例,肺癌8例,乳腺癌8例,结肠癌2例,胃癌2例,恶性黑素瘤1例。供者为患者健康直系亲属,进行haplo-PB-SCs的动员、采集和体外rhIL-2活化。经HLA半相合外周血干细胞治疗后,分别通过CT/PET-CT检查、RESIST标准、KPS评分、临床症状缓解率等指标来评估HLA半相合外周血干细胞的临床疗效及不良反应情况。结果:42例患者接受1个疗程治疗后,全体患者中位无进展生存期(PFS)为6个月,临床获益率(CR+PR+SD)为73.8%;患者生活质量总获益率为76.2%,生活质量评分(KPS)较治疗前平均提高20分(0~30分)。其中,KIR不相合方向为GVH组的临床获益率、无进展生存期、生活质量总获益率均显著优于HVG(或相合)组[94.1%vs60.0%,(13.4±1.3)vs(8.0±0.9)个月,89.5%vs65.2%,均P<0.05];供受者关系为母子/女组的治疗有效率、患者生存期和生活质量均显著优于父子/女组(均P<0.05);肾癌和卵巢癌的临床获益率分别为90.0%和81.8%,相对于其他类肿瘤类型高,在治疗反应性和敏感性上可能占优势。结论:HLA半相合外周血活化干细胞治疗后,机体产生非特异性的抗肿瘤作用,对改善患者症状和提高生活质量有显著效果。 韩颖 于津浦 李慧 任宝柱 曹水 张迺宁 安秀梅 任秀宝关键词:晚期实体肿瘤 HLA半相合 免疫治疗 细胞因子诱导的杀伤细胞逆转耐顺铂肺腺癌细胞系A549/DDP耐药性的研究 被引量:3 2012年 目的:观察细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)对耐顺铂(DDP)人肺腺癌细胞系A549/DDP的耐药逆转作用及其逆转A549/DDP耐药的可能机制。方法:A549/DDP与CIK细胞采用Transwell非接触共培养。四氮甲唑兰比色法(MTT法)验证A549/DDP的DDP耐药性及检测共培养前后A549/DDP对DDP耐药性的变化。RT-PCR法筛选A549与A549/DDP有差异表达的基因作为检测耐药性变化的观察指标,并检测共培养前后A549/DDP中基因表达水平的变化;Western blot检测A549及共培养前后A549/DDP中基因蛋白水平的变化结果:A549/DDP的耐药系数为14.5,具有较强的DDP耐药性。RT-PCR筛选出A549与A549/DDP表达有差异的耐药相关基因为谷胱甘肽转移酶(glutathione-S-transferase,GST-π)基因、人类铜离子转运蛋白(human copper transporter1,hCTR1)基因,A549/DDP中GST-π表达量明显增加,hCTR1表达量明显降低。与CIK细胞共培养后,A549/DDP对DDP的耐药性明显下降,共培养20h后耐药逆转倍数约为4.93倍,细胞内GST-π基因及蛋白水平的表达明显降低(P<0.05)。结论:CIK细胞对A549/DDP有逆转DDP耐药的作用,其机制可能与下调GST-π基因及蛋白水平的表达有关。 杜春娟 李慧 于津浦 安秀梅 于文文 齐静 任秀宝 曹水关键词:化疗耐药 肺腺癌 GST-Π