胡兵
- 作品数：5 被引量：12H指数：1
- 供职机构：海南大学更多>>
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- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- hGH-双精氨酸C肽人胰岛素原基因的克隆表达及纯化研究被引量：1
- 2009年
- 旨在提高基因重组人胰岛素在大肠杆菌中表达的稳定性及表达包涵体蛋白的复性水平。在人胰岛素原N端前融合人生长素N端的一段序列来充当前导肽,同时将C肽设计为两个精氨酸,分10段合成长链寡核苷酸链,利用重叠延伸PCR技术(SOE PCR)扩增得到该基因片段。与表达载体PET-30a连接,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的融合蛋白采用Ni-NTA亲和层析纯化,纯化后的蛋白经复性、冻干等步骤后用胰蛋白酶,羧肽酶B双酶切再过DEAE Sepharose FastFlow阴离子交换柱,收集洗脱峰。对制备所得的胰岛素用SDS-PAGE,Western blot进行性质鉴定,及皮下注射小鼠测定生物活性。结果显示,目的蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了表达,表达产物以不溶性包涵体形式纯在,约占大肠杆菌总蛋白的30%。经Ni-NTA亲和层析得到的重组蛋白纯度为85%,DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换纯化得到单组分胰岛素。Western Blot显示制备所得的胰岛素具有胰岛素免疫原性,皮下给药注射小鼠活性测定表明具有明显的降血糖活性。获得了一种高效生产基因重组人胰岛素的方法,为研究胰岛素类似物奠定了前期基础同时也为今后探索胰岛素的非注射给药途径提供了原料。
- 胡兵黄超李文静邓柳红肖苏生张春发
- 关键词：重叠延伸PCR融合蛋白表达纯化活性测定
- 移动式珊瑚礁基
- 本实用新型属于海洋生态环境人工修复技术领域，涉及一种移动式珊瑚礁基，包括基柱和基盘，所述基柱设计为棱台形结构，基柱下底面的下方及其四周设置支撑柱、支撑钩，在基柱的顶部设置锁定机构；所述基盘设计为片式结构，基盘上设有固定孔...
- 李洪武刘建根师彦飞胡兵何志营李光毅李佳丽沈嘉明田洋
- 文献传递
- hGH，HSA-双精氨酸C肽人胰岛素原的表达、加工及重组胰岛素的降糖活性分析
- 胰岛素是1型和中重度2型糖尿病患者临床治疗中必不可少的药物,随着世界糖尿病患者的急剧增加,市场对胰岛素的需求量也迅速攀升,由此开发成本低、活性高和副作用小的人重组胰岛素原料药已成为国际医药业研究和竞争热点。
由于胰...
- 胡兵
- 关键词：重叠延伸PCR
- 文献传递
- 紫万年青的核型分析被引量：11
- 2010年
- 本文采用直接敲片法制作紫万年青植物染色体标本,通过体细胞染色体计数确定其染色体数目为12条,核型分析表明紫万年青植物染色体总长度为57.35μm,全组染色体平均长度9.56μm,其核型公式为K(2n)=12=3m+3Sm。同时通过观察、测量发现其染色体绝对长度变异范围为11.36～7.72μm,其相对长度组成为2n=12=6M2+6M1;最长染色体与最短染色体之比为1.47:1,臂比的变异范围为1.01～2.56,臂大于2的染色体占全组染色体的33.33%,属于"2A"类型。另一方面,间期附加核型特征确定紫万年青属于复杂染色中心型。本研究将对紫万年青植物的起源、系统演化及品种改良等提供必要的细胞遗传学依据。
- 王胜张春发邓柳红易小平肖苏生胡兵黄超庄南生
- 关键词：染色体核型
- 移动式珊瑚繁育装置
- 本实用新型属海洋生态环境人工修复技术领域，涉及一种移动式珊瑚繁育装置，包括基柱和繁育网，所述基柱设计为棱台形结构，基柱下底面的下方及其四周设置支撑柱、支撑钩，在基柱的顶部设置固定件；所述繁育网设计为网片结构，在繁育网的四...
- 李洪武刘建根师彦飞胡兵何志营李光毅李佳丽沈嘉明田洋
- 文献传递
