李志敏
- 作品数：102 被引量：117H指数：6
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 重组大肠杆菌表达双功能谷胱甘肽合成酶的发酵工艺研究被引量：2
- 2013年
- 对重组表达双功能谷胱甘肽合成酶(GshF)的大肠杆菌进行了5L罐的发酵工艺探索,分别考察了不同培养基、诱导剂种类、诱导时机、诱导温度、补料流加碳源类型等对菌体生长、GshF蛋白表达及其酶活的影响。结果表明,采用葡萄糖进行补料流加,在优化工艺条件下,GshF表达量达到1.94g.L-1。
- 张松王德正李娓李志敏叶勤
- 关键词：发酵工艺蛋白表达
- 果糖和麦芽糖作为有氧碳源对大肠杆菌NZN111两阶段发酵中厌氧发酵的影响被引量：3
- 2011年
- 为了了解磷酸转移酶转运系统(PTS)依赖和非PTS依赖代谢的糖类对大肠杆菌生产琥珀酸的影响,进行了两阶段培养,有氧阶段采用PTS依赖型的果糖或非PTS依赖型的麦芽糖作为丙酮酸甲酸裂解酶(PFL)和乳酸脱氢酶(LDH)双突变株NZN111的碳源,研究其对NZN111厌氧阶段代谢葡萄糖的影响。5 L罐发酵结果表明,以果糖和麦芽糖为碳源有氧培养的细胞恢复了在厌氧条件下快速代谢葡萄糖的能力,琥珀酸和丙酮酸成为主要代谢产物,最终琥珀酸得率分别为0.84和0.75 mol/mol,丙酮酸得率分别达到了0.65和0.83 mol/mol,琥珀酸和丙酮酸终浓度比分别为1.73∶1和1.21∶1。果糖和麦芽糖培养的NZN111与葡萄糖培养的菌体代谢的明显差异推测是cyclic AMP(cAMP)依赖型和非cAMP依赖型的分解代谢物阻遏调控这两种机制共同作用的结果。
- 吴辉李志敏叶勤
- 关键词：代谢调控
- 根癌农杆菌介导的VHb异源表达及其对里氏木霉的影响
- 2014年
- 里氏木霉是生产纤维素酶的重要菌株，在其浸没式发酵过程中，氧传递是重要影响因素。为了减轻溶氧的限制，本研究借助根癌农杆菌将透明颤菌血红蛋白基因vgb引入里氏木霉。qPCR结果表明，pki及gpd启动子均可以有效启动vgb在里氏木霉中的表达。进一步实验结果表明，在摇瓶培养中，供氧充足情况下野生菌和转化株的生长无明显差异，但是在静止培养条件下，氧气供应受限，转化菌株的干重是野生菌的17．8—25．5倍。
- 张倩李志敏叶勤
- 关键词：里氏木霉纤维素酶透明颤菌血红蛋白
- 有机酸对肺炎克雷伯杆菌厌氧代谢甘油的影响被引量：1
- 2011年
- 在肺炎克雷伯杆菌厌氧发酵甘油生产1,3-丙二醇的过程中,大量的副产物,特别是乳酸和乙醇等副产物的生成,导致1,3-丙二醇的浓度和得率下降。为了进一步了解有机酸加入后菌体的代谢情况,在菌体生长期同时加入柠檬酸、琥珀酸和延胡索酸三种有机酸的混合液,使其浓度达到3.8 mmol·L-1。5 L罐发酵结果显示,产物的生成发生显著变化。同时,发酵动力学分析表明,有机酸加入后,甘油的比消耗速率和1,3-丙二醇的比生成速率显著提高,而乳酸和乙醇的比生成速率则明显下降。进一步对甘油代谢过程中的碳流分配分析表明,有机酸加入后,甘油进入还原途径的碳流比例由0.45显著增加为0.62,氧化途径的碳流比例由0.53减为0.35。
- 薛学东李伟李志敏周利夏月兰叶勤
- 关键词：有机酸肺炎克雷伯杆菌厌氧发酵甘油
- 一种热稳定的双功能谷胱甘肽合成酶突变体及其应用
- 本发明公开一种双功能谷胱甘肽合成酶的突变体，所述突变体为将SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.1的氨基酸序列进行重组，和/或对重组体进行定点突变，获得如SEQ ID NO.3所示氨基酸序列或其突变体。本发明的优点...
- 李志敏崔向伟
- 文献传递
- 合成3-羟基-3-甲基丁酸的重组大肠杆菌及其构建方法
- 本发明公开了合成3‑羟基‑3‑甲基丁酸的重组大肠杆菌及其构建方法，以大肠杆菌为底盘菌株，敲除支链氨基酸合成的相关基因ilvE、ilvA、panB；增加前体丙酮酸的有效利用，敲除丙酮酸副产物合成相关基因ldhA、poxB；...
- 李志敏朱海姣
- 以乙酸为碳源生长菌体的两阶段培养生产L-半胱氨酸合成酶
- 2014年
- 假单胞菌F12能够将DL-2-氨基-△^2-噻唑啉4-羧酸（DL-2-amino-△^2-thiazoline-4-carboxylicacid，DL—ATC）转化为L-半胱氨酸。将该微生物转化过程分为以乙酸和氨为碳源和氮源的菌体生长阶段和利用DL—ATC诱导L-半胱氨酸合成酶产生阶段。考察了乙酸对菌体生长的影响以及菌体比生长速率对L-半胱氨酸合成酶诱导的影响。结果表明，当乙酸浓度大于4g／L时对菌体生长有显著抑制作用，乙酸的存在对L-半胱氨酸合成酶的诱导有抑制作用，菌体比生长速率较高时更有利于酶系的产生。在5L罐中进行的两阶段培养，最高体积酶活达到283U／mL，比优化前提高了150％，比分批培养提高了130％。
- 范翠丽李志敏叶勤
- 关键词：乙酸假单胞菌
- 提高真菌产酶和次级代谢物的方法
- 本发明是一种利用真菌生产次级代谢物、蛋白和其它生物活性物质的方法，通过(1)孢子液制备、(2)种子培养、(3)发酵生产、(4)分离提取等步骤获得酶和次级代谢产物；采用的菌种为土曲霉、黑曲霉、变色栓菌、绿色木霉；发酵生产中...
- 李志敏祖彩霞叶勤
- 大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19在氮源限制下的代谢和关键酶特性研究被引量：6
- 2007年
- 在氮源限制的基本培养基中对大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19进行连续培养,通过测定中心代谢途径关键酶的活性分析二者代谢差异。结果表明,DA19的6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和异柠檬酸脱氢酶(ICDH)活性高于DH5α,而磷酸果糖激酶(PFK)和乙酸激酶(ACK)活性低于DH5α,反映了DA19进入磷酸戊糖途径(PPP)的碳流增加,而进入酵解和乙酸产生(Ack-Pta)途径的碳流减少。因此,关键酶活差异与DA19菌体关于葡萄糖得率提高、副产物乙酸和丙酮酸的生成减少相一致。添加腺嘌呤后,DH5α的G6PDH和ICDH活性增加,PFK和ACK活性降低,而DA19各酶活变化不明显。乙酸钠的添加导致除PFK外的其他酶活性均降低,尤其是DH5α的ICDH明显降低,这些结果反映的中心代谢途径流量变化也与二者生长和代谢副产物积累的变化一致。
- 张晓云张艳军李志敏叶勤
- 关键词：大肠杆菌乙酸酶活
- 甲醇流加策略对重组毕赤酵母表达人肝再生增强因子的影响被引量：2
- 2008年
- 考察了5L发酵罐中三种甲醇流加策略(恒溶氧、恒比生长速率和恒甲醇浓度)对重组毕赤酵母表达人肝再生增强因子(hALR)的影响。控制恒定甲醇浓度为10g/L诱导时,甲醇比消耗速率和hALR表达速率显著高于其它两种流加策略,最终hALR表达水平为360mg/L。
- 平续斌李志敏叶勤黄秀东曹之舫
- 关键词：毕赤酵母人肝再生增强因子高密度发酵
