目的探讨铁皮石斛多糖对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导星形胶质细胞腺苷酸激活蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)/UNC-51类似自噬激活激酶1(UNC-51 like autophagy activating kinase1,ULK1)通路相关自噬的影响。方法体外培养人星形胶质细胞,分为对照组、H/R组(H/R建模)、低浓度铁皮石斛多糖组(H/R建模+100μg·mL-1铁皮石斛多糖)、中浓度铁皮石斛多糖组(H/R建模+200μg·mL^(-1)铁皮石斛多糖)和高浓度铁皮石斛多糖组(H/R建模+400μg·mL^(-1)铁皮石斛多糖)。MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;试剂盒测定细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)水平;Westernblotting检测细胞中p-AMPK、AMPK、p-ULK1、ULK1、Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(light chain 3,LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达情况。结果与对照组相比,H/R组星形胶质细胞存活率、细胞中SOD水平及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ蛋白表达水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中MDA水平及p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1、Beclin1蛋白表达水平显著升高(P<0.05);随着铁皮石斛多糖的处理及处理浓度的升高,星形胶质细胞存活率、细胞中SOD水平及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中MDA水平及p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1、Beclin1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论铁皮石斛多糖对H/R诱导的星形胶质细胞AMPK/ULK1通路激活及自噬具有抑制作用,可促进细胞存活并减少细胞凋亡。
