余海鹏
- 作品数:5 被引量:5H指数:2
- 供职机构:浙江理工大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- BmNPV多角体基因(phlh)启动子结合蛋白的研究
- 多角体启动子在杆状病毒表达系统中被广泛应用,因其具有高效启动外源基因表达的能力,但是其调控机制迄今为止还尚阐明。因此,在本研究中以家蚕杆状病毒(BmNPV)多角体基因polh启动子为研究对象,利用酵母单杂交技术筛选与多角...
- 余海鹏
- 关键词:启动子DNA结合蛋白转录调控
- 文献传递
- 家蚕核型多角体病毒凋亡抑制基因iap的功能分析被引量:3
- 2015年
- 在昆虫杆状病毒基因组中普遍存在一类凋亡抑制基因iap(inhibitor of apotosis)。核型多角体病毒(BmNPV)基因组中的iap1和iap2基因为研究对象,分别构建BmNPV iap1、BmNPV iap2缺失型和补回型病毒,探究2个iap基因的生物学功能。病毒基因组DNA对BmN细胞的转染实验结果表明,BmNPV iap1基因缺失对病毒感染引起的细胞凋亡无显著影响,对病毒基因组的复制和基因转录也无明显影响;但BmNPV iap2基因的缺失可显著提高细胞的凋亡水平(P<0.05),当利用iap2缺失型病毒基因组DNA转染BmN细胞时,胞内凋亡启动蛋白Caspase-3的活性与野生型病毒转染组相比显著上升,并且病毒滴度降为0。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析结果表明,BmNPV iap2的缺失大大降低了病毒DNA的复制水平和基因转录水平。基于上述试验结果可知:BmNPV iap2具有抑制由病毒感染诱导的细胞凋亡的作用,并且是病毒增殖的必需基因;而BmNPV iap1对宿主细胞的凋亡没有明显调控作用,对病毒基因组DNA的复制和基因转录也没有明显影响。
- 陈滨余海鹏张媛媛李俊张婷全滟平于威
- 关键词:家蚕核型多角体病毒病毒复制基因转录
- 家蚕核型多角体病毒lef5基因对病毒基因组复制和转录调控的影响被引量:1
- 2015年
- lef5是杆状病毒的核心基因之一。构建家蚕核型多角体病毒(BmNPV)lef5基因敲除型病毒lef5-ko-Bacmid和补回型病毒lef5-re-Bacmid,研究lef5基因在BmNPV的基因组DNA复制及各时期基因转录调控中的作用。透射电子显微镜下观察lef5-ko-Bacmid转染BmN细胞后不能产生具有侵染活性的病毒粒子(BV)。荧光定量PCR(qPCR)发现lef5基因缺失对病毒基因组DNA的复制没有明显影响,但会导致病毒各时期基因的转录水平显著下降。进一步通过检测由BmNPV多角体蛋白基因(polh)启动子驱动的荧光素酶活性变化,明确lef5基因对polh基因启动子的调控作用,结果表明lef5基因对polh基因启动子有显著的正调控作用。研究结果提示,lef5基因缺失后不影响BmNPV基因组DNA的复制,但会影响病毒早期、晚期、极晚期基因的转录表达。
- 余海鹏李俊张婷陈滨潘慧慧全滟平于威
- 关键词:家蚕核型多角体病毒病毒复制基因转录
- BmNPV多角体基因(polh)启动子结合蛋白的研究
- 多角体启动子在杆状病毒表达系统中被广泛应用,因其具有高效启动外源基因表达的能力,但是其调控机制迄今为止还尚阐明。因此,在本研究中以家蚕杆状病毒(Bm NPV)多角体基因polh启动子为研究对象,利用酵母单杂交技术筛选与多...
- 余海鹏
- 关键词:DNA结合蛋白转录调控
- 文献传递