马昱澍
- 作品数：33 被引量：24H指数：3
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 大肠杆菌热敏毒素B亚单位的真核表达方法
- 本发明涉及一种大肠杆菌热敏毒素B亚单位(E.coli heat-labile enterotoxin B subunit，LT-B)的真核表达方法，其主要步骤是：首先将LT-B的核酸序列(如SEQ ID NO：1所示)通...
- 魏东芝马兴元郑文云王天文罗晨马昱澍
- 文献传递
- 新型脂肪酶LipB52催化生物柴油被引量：11
- 2008年
- 一种来源于荧光假单胞菌的新型脂肪酶基因lipB52在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,并且利用Ni-NTA亲和柱对脂肪酶LipB52进行纯化。采用固定化脂肪酶LipB52催化大豆油与甲醇的转酯反应生产生物柴油。实验考察了温度、底物摩尔比、酶用量、有机溶剂、酶的种类以及油的类型对于反应的影响,结果表明:转酯反应的最佳反应条件为:m(酶)∶m(油)=20∶80,n(油)∶n(甲醇)=1∶4、正庚烷作为溶剂、反应温度为30℃,在此条件下脂肪酶LipB52表现出很高的催化活性,反应40 h后甲酯的产率高达92%。
- 王刚罗宇江正兵魏东芝马昱澍
- 关键词：生物柴油脂肪酶荧光假单胞菌转酯反应
- Serratia marcescens H30脂肪酶的重组可溶表达、固定化及其酶学性质
- 2014年
- 为了提高Serratia marcescens H30脂肪酶的可溶表达水平,分别将目的基因与p GEX-4T-1、p ET28a和p ET32a构建重组表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3),通过优化诱导过程,发现可溶性酶的最高活性可达25 000 U/L。再经Ni2+亲和柱纯化、LH-EP固定化后,固定化酶的比酶活为214 U/g(以1 g湿质量计),酶活回收率为51%。固定化后重组脂肪酶的最适温度由30℃提高到35℃,最适p H从7.0偏移至8.0左右,并且稳定性也有所增加。该固定化重组脂肪酶同样能够拆分消旋体反式-4-甲氧苯基缩水甘油酸甲酯,光学选择性没有改变。反应14 h,转化率为48.5%,底物的e.e.值为99.2%,表明该固定化脂肪酶能有效拆分消旋体反式-4-甲氧苯基缩水甘油酸甲酯,为工业生物催化制备地尔硫卓提供了可能。
- 徐晶晶苏二正吴向萍马昱澍魏东芝
- 关键词：黏质沙雷氏菌脂肪酶可溶表达固定化手性拆分
- 星海链霉菌卤化酶重组蛋白在大肠杆菌中可溶表达
- 2014年
- 大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)是表达异源蛋白的良好宿主,但常遇到蛋白表达产物不可溶的困难.在对来自星海链霉菌的卤化酶基因sinH进行大肠杆菌异源表达时,为克服蛋白表达产物可溶性低的问题,探讨了不同载体对蛋白可溶表达的影响.利用pET28a进行SinH表达时不能得到可溶的目标蛋白;使用含有泛素标签及内含肽的载体pHUIE实现了卤化酶蛋白SinH的可溶表达,但纯化后纯度不高;利用带有链霉菌分子伴侣蛋白基因的载体pET28a-SinH与pETcoco-pL1SL2在E.coli BL21(DE3)中共表达,在30℃,0.1mmol/L IPTG诱导条件下表达4h,成功获得大量可溶蛋白,使用亲和层析(Ni-NTA)纯化,获得了较纯的目标蛋白SinH,上述研究结果为在大肠杆菌中进行其他链霉菌蛋白的可溶表达提供了参考.
- 王玉梅赵心清马昱澍魏东芝
- 关键词：可溶表达蛋白纯化
- 脂肪酶基因以及工程菌和脂肪酶菌株
- 本发明提供了一种脂肪酶基因，其编码的脂肪酶，表达该酶的工程菌及工程菌的应用。本发明提供的脂肪酶基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明提供的基因工程菌可用于低温全细胞催化生产生物柴油，在10℃-25℃催化...
- 魏东芝高蓓马昱澍苏二正
- 文献传递
- 胰高血糖素样肽1受体N端片段与exendin-4的亲和位点分析被引量：2
- 2008年
- 通过易错PCR(epPCR)方法建立了一个鼠肺的胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)N端片段的噬菌体随机突变展示肽库。根据筛选出的突变体来分析突变后胰高血糖素样肽1受体N端片段(nGLP-1R)与exendin-4结合活性。实验结果显示:保守的半胱氨酸C26发生突变后并未引起nGLP-1R与其配体exendin-4结合能力的改变,第101位和108位氨基酸是nGLP-1R与exendin-4结合的潜在位点。
- 高蔚丰刘美云马昱澍
- 关键词：EXENDIN-4易错PCR噬菌体表面展示
- 一种获得目的mRNA的方法
- 本发明提供了一种获得目的mRNA的方法。该方法是将目的基因进行改造，在其3’末端引入oligo(dT)序列，然后分别在5’端和3’端加上限制性内切酶识别序列，并与载体结合，转化到大肠杆菌感受态细胞中，促使其高表达，提取大...
- 杨忠赵建龙马昱澍肖君华王锦之魏东芝
- 文献传递
- 一种有机溶剂缓释系统及其制备和在酶催化反应中的应用
- 本发明公开了一种有机溶剂缓释系统的制备及其在酶催化反应中的应用。本发明的有机溶剂缓释系统由多孔类固体物质和吸附在多孔类固体物质中的液态有机物构成；将液态有机物饱和的孔类固体物质和植物油在固定化脂肪酶和溶剂存在的情况下，3...
- 魏东芝罗宇马昱澍
- 文献传递
- 一种广藿香醇合酶突变体及其编码基因以及应用
- 本发明提供一种广藿香醇合酶突变体及其编码基因以及应用，所述广藿香醇合酶突变体包括以SEQ ID NO.2所示野生型的广藿香醇合酶为模板，第136位赖氨酸突变形成的突变体K136A、K136T、K136S、K136V，第2...
- 刘敏陶欣艺郭姣姣魏东芝马昱澍
- 受水杨酸盐浓度调控的细菌遏制系统
- 2008年
- 由于存在基因工程微生物(GEMs)不受控制地在环境中释放的风险,利用GEMs的生物降解能力治理环境污染的方法受到了限制。在大肠杆菌JM109中构建了一个受环境污染物调控的细菌遏制系统,该系统是由杀伤元件和调控元件组成的双质粒体系,使细菌的存活受环境中水杨酸盐浓度的调控。当培养基含水杨酸盐时,阻遏蛋白LacI合成,阻止自杀基因gef表达,细菌快速繁殖;当水杨酸盐不存在时,自杀基因gef的表达导致细胞杀伤,菌体大量死亡。该遏制系统可作为模型用于具有生物修复功能的基因工程菌的构建。
- 王红萍马昱澍
- 关键词：GEL细胞杀伤
