马怀良
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
- 供职机构：扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划江苏省教育厅指导性计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 新城疫病毒分离株的生物学特性鉴定及F蛋白基因序列分析被引量：12
- 2009年
- 通过部分生物学特性鉴定、RT-PCR及F基因的序列测定与遗传进化分析,对2005~2006年从我国江苏省和广西省部分地区的发病鸡群和鹅群中分离到的20株新城疫病毒(NDV)进行了研究。各分离株经典毒力测定结果显示:MDT在45.3h^58.2h之间,ICPI在1.61~2.00之间,均为新城疫病毒强毒株特征。血凝解脱及血凝素热稳定性试验显示:各分离株的血凝解脱时间短,血凝素热稳定性较差,符合NDV强毒株的特征。F基因的序列测定表明,分离株之间的核苷酸序列具有79.7%~100%的同源性,与疫苗株LaSota的同源性为78.1%~83.4%;与国内标准强毒株F48E8同源性为80.2%~90.1%。推导其氨基酸序列分析表明,各分离株的F蛋白的裂解位点氨基酸组成为112R-R-Q-R/K-R-F117,具有NDV强毒株特征,与毒力测定结果相符。根据序列所绘制系统进化发生树,表明20株NDV分离株中有18株为基因Ⅶd型,2株为基因Ⅲ型。
- 姚春峰刘文博胡顺林马怀良薛峰刘慧谋刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒生物学特性F基因
- 鸡痘病毒ORF073基因克隆及原核表达被引量：1
- 2006年
- 根据已经发表的鸡痘病毒(FPV)美国致病株的ORF073基因序列,设计1对引物,分别以282E4FPV、LP株FPV、102E6FPV为模板,扩增出目的片段,将其克隆到pGEM-TEasy载体中,经酶切鉴定证实,并进行序列测定。目的片段包含了大小为522 bp的ORF073基因,与GenBank上的AF198100(FPVUS)和AJ581527(FP9)序列进行序列比较分析表明:3种病毒株的ORF073基因与鸡痘病毒美国致病株(FPVUS)和英国弱毒株(FP9)完全一致。克隆的ORF073基因与原核表达载体pET-28a构建重组表达载体,经IPTG诱导,在BL21(DE3)细菌中表达了分子质量约32 ku的蛋白。
- 王彦红马怀良胡顺林仇旭升刘秀梵
- 关键词：鸡痘病毒原核表达
- 重组鸡痘病毒首免与灭活疫苗加强免疫对高致病性禽流感免疫效果的影响被引量：1
- 2008年
- 用表达H5亚型禽流感病毒(AIV)HA与NA基因的重组鸡痘病毒(rFPV)rFPV-12LSH5NA对10日龄带有H5亚型AIV母源抗体的商品鸡进行了首次免疫,17日龄时再用H5亚型AIV全病毒灭活疫苗加强免疫。免疫鸡分为2个批次,分别在24和31日龄用H5亚型AIV进行致死性攻击。在24日龄攻毒组中,rFPV首免与全病毒灭活疫苗加强免疫组的死亡比例(0/17)显著低于17日龄全病毒灭活疫苗单独免疫组(16/17)。在31日龄攻毒组中,rFPV首免与全病毒灭活疫苗加强免疫组的死亡比例(0/17)显著低于10日龄rFPV单独免疫组(6/17)。结果显示,在鸡群普遍存在针对H5亚型AIV母源抗体的情况下,rFPV首免与全病毒灭活疫苗配合使用能使鸡体快速建立坚强的免疫保护反应,是一种非常有效的免疫策略。
- 刘武杰仇保丰马怀良王彦红陈素娟彭大新刘秀梵
- 关键词：H5亚型禽流感病毒重组鸡痘病毒加强免疫
- 鸡痘病毒ORF214原核表达蛋白单克隆抗体的制备及其初步鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的:经发表的鸡痘病毒美国致病株(FPVUS)ORF214基因序列,利用PCR方法扩增出目的片段,测序后并克隆至原核表达载体pET-28a,用表达产物制备抗FPVORF214蛋白单克隆抗体(mAb)。方法:以鸡痘病毒ORF214原核表达蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合,用间接ELISA方法检测筛选。结果:阳性细胞株经3代克隆纯化后,获得3株能稳定分泌抗FPVORF214蛋白mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为2F10C9、3C3B10、2G8G7。3株杂交瘤细胞分泌的抗体均能够特异地与FPVORF214蛋白反应,细胞上清ELISA效价均在1×102以上,mAb腹水效价达1×104以上。结论:该特异性mAb的研制成功为进一步研究ORF214的生物学特性奠定基础。
- 王彦红马怀良时红星吴培培彭大新刘秀梵
- 关键词：鸡痘病毒
- 新城疫病毒HN蛋白抗原变异株的鉴定
- 新城疫病毒的基因组共编码6种结构蛋白,其中血凝素神经氨酸酶蛋白(HN)是NDV囊膜上最大的纤突糖蛋白,在免疫反应中扮演着重要的角色。HN蛋白有跨膜区、茎部和球状区三个部分组成,其中球状区分布了所有与单克隆抗体所识别的抗原...
- 胡顺林孙庆马怀良吴艳涛刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒抗原位点变异株
- 文献传递
- 三种重组鸡痘病毒联合与单独免疫效力比较被引量：6
- 2008年
- 目的:利用针对不同病原的重组鸡痘病毒(rFPV)在鸡群进行间隔性的多次免疫时,后期免疫会受到前期免疫所诱生的载体特异性免疫反应的干扰,并导致其免疫效力下降。将这些rFPVs进行联合免疫或许是解决此问题的一种策略。为验证rFPVs联合免疫的可行性,研究中将三种针对不同病原的rFPVs以联合或单独的方式分别进行免疫,并对它们的免疫效力进行比较。方法:rFPV-12LSH9A、rFPV-12LSH5NA及rFPV-12LSHN为分别表达H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因、H5亚型AIV的HA和NA基因及新城疫病毒(NDV)HN基因的三种rFPVs。将这三种rFPVs分别在SPF鸡和带有针对H9、H5亚型AIV及NDV三种病原母源抗体的商品鸡上进行联合或单独免疫。结果:这三株rFPVs在SPF鸡上进行联合免疫时,所诱生的体液免疫应答受到了一定程度的抑制;个别成员株的排毒及死亡保护也受到了显著的干扰。结论:在进行rFPVs联合免疫时,有必要对各成员株rFPV的免疫效力进行比较分析,以确定其可行性。
- 刘武杰仇旭升马怀良孙蕾陈素娟彭大新刘秀梵
- 关键词：重组鸡痘病毒联合免疫H5亚型禽流感病毒H9亚型禽流感病毒新城疫病毒
