钟涛
- 作品数:6 被引量:22H指数:3
- 供职机构:东北农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金黑龙江省“十五”科技攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 间接竞争ELISA检测TGEV方法的建立
- 本研究用经Ni2+-NTA金属螯合层析柱纯化后获得纯化的重组N蛋白作为抗原检测试剂,抗重组N蛋白的单克隆抗体作为抗体诊断试剂,用非离子去污剂暴露出TGEV的核衣壳蛋白,利用竞争原理针对粪便中的TGEV建立了一种快速的间接...
- 钟涛
- 关键词:TGEV重组N蛋白间接竞争ELISA单克隆抗体猪轮状病毒
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎S基因A D抗原位点在昆虫杆状病毒系统中的表达被引量:2
- 2006年
- 张炳丽唐丽杰范京慧王玉玲边亚娟钟涛李一经
- 关键词:杆状病毒系统抗原位点S基因昆虫养猪业发展
- 间接竞争ELISA检测TGEV方法的建立被引量:6
- 2007年
- 钟涛唐丽杰李一经师东方王术德高慧江
- 关键词:ELISA检测猪传染性胃肠炎病毒TGEV冠状病毒科病毒粒子
- 猪传染性胃肠炎病毒S蛋白在乳酸菌中的表达被引量:7
- 2007年
- 目的:构建猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的细胞内表达重组乳酸乳球菌,确定其最佳表达条件,为重组乳酸菌作为口服疫苗防治猪传染性胃肠炎奠定基础。方法:根据猪传染性胃肠炎病毒纤突(S)蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,进行PCR,获得含有TGEVS基因4个主要抗原位点的约2000bp目的片段,将其与表达载体质粒pNZ8048进行连接,通过电转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内,在乳链菌肽(Nisin)的诱导下进行表达,确定最佳表达条件;并通过SDS-PAGE进行检测和Western-blot分析表达蛋白活性。结果:成功获得了TGEVS蛋白在乳酸乳球菌细胞内的表达并且表达的蛋白具有TGE全病毒的抗原性。确定了乳酸乳球菌表达TGEVS蛋白的最佳表达条件为在以1ng/ml的乳链杆菌肽nisin诱导下,诱导后3h,重组蛋白表达效率达最高,重组蛋白约占菌体总蛋白含量的8.7%。结论:在乳酸乳球菌细胞内表达的重组TGEVS蛋白获得了理想表达,为进一步研制开发防治TGE口服疫苗提供物质基础。
- 唐丽杰欧笛王荣军徐义刚钟涛李一经
- 关键词:TGEVS蛋白乳酸菌
- 猪传染性胃肠炎病毒纤突S蛋白干酪乳杆菌表达载体系统的构建被引量:2
- 2007年
- 根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)纤突(S)蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,进行PCR,获得含有TGEV S基因4个主要抗原位点的约2000 bp目的片段,将其分别与表达载体质粒pPG611.1和pPG612.1进行连接,通过电转化进入宿主菌Lacto-bacillus casei393细胞内,通过质粒提取、PCR鉴定、酶切鉴定和序列测定分析,表明TGEV S基因已成功插入到表达载体质粒中,获得了TGEV S蛋白干酪乳杆菌表达载体系统。
- 唐丽杰王荣军钟涛徐义刚汪淼欧笛李一经
- 关键词:猪传染性胃肠炎病毒S蛋白干酪乳杆菌表达载体系统
- 现代生物技术防治仔猪病毒性腹泻的研究
- 李一经唐丽杰任晓峰师东方马广鹏葛俊伟李海滨宋岩尹杰超姜骞陈淑红吴凌范京惠边亚娟张炳丽史达李丹丹钟涛夏春丽李宝贤
- 该项目研究建立了猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR快速监测方法;竞争性DOT-ELISA和竞争性ELISA病原检测方法以及猪流行性腹泻病毒RT-PCR快速检测方法;建立了猪传染性胃肠炎DOT-ELISA抗体快速检测方法;建立...
- 关键词:
- 关键词:仔猪病毒性腹泻生物技术