谢常青
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胚胎干细胞建系、建库及诱导分化的系列研究及初步应用
- 林戈卢光琇欧阳琦杨胜陆长富杜丽丽杜娟王建周菂谢常青徐小明张前军
- 该项目在国家自然科学基金、863、973及省市各级有关项目的支持下，对人胚胎干细胞(hESCs)应用相关技术的研发取得了一系列原创性突破，主要技术创新如下：1、在国内率先建立具有自主知识产权的胚胎干细胞系，建立了国际上最...
- 关键词：
- 关键词：人胚胎干细胞冷冻技术
- 人类成纤维细胞作为人胚胎干细胞饲养层细胞的初步研究被引量：6
- 2002年
- 为了避免将来应用时,人类胚胎干细胞接触到小鼠细胞和小鼠可能存在的病原体,利用人类自身的成纤维细胞作为体外培养人胚胎干细胞的饲养层一直是其将来应用中需要解决的问题.用流产胎儿和成体包皮细胞分离的成纤维细胞作为饲养层,成功地将人类胚胎干细胞传代.传代过程中的人Es细胞在人类的成纤维细胞层上保持不分化的特征.
- 谢常青林戈卢光琇
- 关键词：人类胚胎干细胞饲养层层黏连蛋白整合素
- 人类体细胞克隆胚的构建被引量：5
- 2003年
- 人类体细胞克隆胚的构建是治疗性克隆的基础和前提.将供体细胞核注射到成熟卵母细胞,然后用钙离子载体(A23187)和6-甲基氨基嘌呤(6-DMAP)激活卵母细胞. 在卵母细胞活化并出现原核样核(2PN)后,去掉雌原核而保留供体细胞核,避免了去核时对卵母细胞进行DNA荧光染色和紫外线照射,同时也避免了去除过多的细胞质.经体外培养后,有少量核移植胚发育到囊胚阶段.
- 陆长富林戈谢常青龚斐周虹谭跃球卢光琇
- 关键词：治疗性克隆钙离子载体细胞质细胞核干细胞胚胎
- 小鼠胚胎成纤维细胞条件培养液的蛋白质组学初步分析被引量：2
- 2005年
- 目的:运用双向电泳、质谱技术对小鼠胚胎成纤维细胞饲养层条件培养液进行蛋白质组学分析,寻找 其中可能具有抑制分化作用的蛋白因子。方法:用60Coγ 射线照射昆明白小鼠胚胎成纤维细胞,制成饲养层,置于 ITS(胰岛素 转铁蛋白 硒钠盐)培养液中培养24h,收集条件培养液。用冷冻干燥、凝胶过滤层析、冷丙酮沉淀的方 法从条件培养液中提取蛋白质样品,经双向电泳和银染得到双向电泳图谱,用Imagemasterelite2.0软件进行图像 分析。取蛋白点进行酶解,再用CapLC ESI Q TOF质谱进行分析,使用Mascot软件在NCBInr数据库中进行搜索。 结果:双向电泳得到(221±67)个蛋白点的银染图谱,初步分析鉴定13个蛋白点。结论:昆明白小鼠胚胎成纤维细 胞条件培养液中含有β 半乳糖苷结合蛋白、半胱氨酸富集的酸性分泌蛋白(SPARC)等成分。
- 石敏谢常青卢光琇
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞饲养层条件培养液双向电泳质谱技术
- 人胚神经干细胞的分离培养和鉴定被引量：3
- 2004年
- 目的 :从流产人胚前脑中分离培养人胚神经干细胞。方法 :神经干细胞具有自我复制和多向分化潜能。本实验利用神经干细胞特定的培养增殖培养体系分离纯化人胚神经干细胞 ,并对分离得到的神经干细胞的分子标记及分化潜能进行鉴定。结果 :从 8～ 1 0周龄流产人胚胎分离得到了神经干细胞 ,它能表达神经干细胞特异性抗原nestin ,并能在体外诱导分化为神经元细胞和神经胶质细胞。结论 :在人胚中枢神经系统中存在神经干细胞 ,并能够在体外扩增 。
- 罗树伟谢常青卢光琇
- 关键词：神经干细胞细胞培养细胞分离细胞鉴定神经退行性疾病
- 人类胚胎干细胞体外分离与培养的初步研究被引量：1
- 2002年
- 林戈谢常青卢光琇
- 关键词：胚胎干细胞成纤维细胞囊胚细胞培养
- 人类胚胎干细胞向造血细胞和内皮细胞诱导分化的初步研究被引量：8
- 2005年
- 胚胎干(ES)细胞是一种能够自我更新、长期增殖并且具有多向分化潜能的干细胞。近年来的研究表明, 小鼠胚胎干细胞体外分化能够模拟体内造血发育的过程。为探讨诱导人类胚胎干细胞向造血细胞和内皮细胞的 分化的方法,将人类胚胎干细胞去饲养层,形成拟胚体(EB)培养3天后消化;采用基质细胞条件培养基联合细胞 因子的诱导体系,诱导8天后,种植到半固体培养基中培养7-14天。应用RT-PCR检测诱导细胞flk-1、BMI-1、scl、 Zeta-globin造血相关基因的表达;流式细胞术检测KDR、CD34等造血细胞表面抗原的表达;免疫组织化学检测集落 细胞的表面标记。结果表明:①半固体培养基中出现20-30个细胞组成的集落,集落细胞再种植仍然能够形成大 小相似的细胞集落;另外一些较大的细胞集落中CD45细胞呈阳性。②部分细胞贴壁生长形成内皮细胞样集落,Ⅷ 因子、KDR、UEA检测均为阳性。③在ES细胞内有少量flk-1、BMI-1表达,而scl、Zeta-globin基因不表达;自发分化 3天的EB可见flk-1、BMI-1表达上调;消化形成单细胞并诱导4天,检测到flk-1、BMI-1、scl、Zeta-globin基因的表 达,第8天仍然检测到flk-1、BMI-1、scl基因的表达,Zeta-globin基因不表达。④诱导8天的细胞中表达flk-1阳性细 胞的率为9.8％,CD34阳性细胞占总细胞量的16.8％。
- 王建赵惠萍谢常青林戈杨胜聂东宋王绮如卢光琇
- 关键词：胚胎干细胞诱导分化造血细胞内皮细胞
