胡争
- 作品数：7 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 用荧光原位杂交方法探索宫颈癌中HPV16整合对MYC拷贝数的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探索宫颈癌中HPV16整合与MYC基因拷贝数是否有相关性。方法:收集宫颈癌患者术后石蜡标本57例,其中FIGO I期29例,II期及以上28例。应用荧光原位杂交(FISH)技术检测宫颈癌石蜡标本中的HPV16整合和MYC基因拷贝数,并进行相关性比较。结果:MYC拷贝数在宫颈癌中增加,在所有标本中呈近似正态分布。HPV16整合或MYC拷贝数在宫颈癌分期中差异无统计学意义(P>0.05)。标本MYC拷贝数≥3在有HPV16整合组出现的比率为81.8%,MYC拷贝数≥3.5在有HPV16整合组出现的比率为69.7%,较无整合组明显增多(P=0.024,0.034)。结论:宫颈癌组织中HPV16整合会影响MYC拷贝数,有HPV16整合的癌组织更容易出现MYC高拷贝数的扩增。
- 祝达胡争张昌林王笑梨沈慧汪辉
- 关键词：宫颈癌荧光原位杂交MYC人乳头瘤病毒
- 锌指核酶针对Hela细胞OCT4敲除作用的研究
- 目的 观察锌指核酶定点敲除Oct4后,Hela细胞形态和功能的变化.方法 使用ZiFiT在线设计靶向于Oct4基因的锌指蛋白,及GFP作为敲入序列同源重组修复模板的质粒,转染Hela细胞.分为锌指组(只转染锌指蛋白,OZ...
- 于兰胡争王黎明汪辉
- p63基因在宫颈癌发展中拷贝数与表达的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:研究p63基因拷贝数与表达的改变与宫颈鳞状细胞癌(SCC)的发生、发展是否存在关联。方法:采用荧光原位杂交(FSIH)和免疫组织化学(IHC)技术分别检测48例宫颈上皮内瘤变(CIN)(CINⅠ级15例、CINⅡ级14例、CINⅢ级19例)及48例SCC组织标本中的p63基因拷贝数及表达变化情况。结果:CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和SCC中的p63基因拷贝数分别为(1.93±0.29)个、(2.52±0.37)个、(3.15±0.52)个和(5.54±0.59)个,CIN组与SCC组比较,差异有统计学意义(P<0.05);随着宫颈病变程度的加深,p63基因阳性表达率逐渐升高,CIN组与SCC组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:p63基因拷贝数与表达的增加与宫颈癌的发生、发展密切相关。
- 蒋孝会胡争丁文成祝达汪辉
- 关键词：宫颈上皮内瘤变宫颈癌P63基因荧光原位杂交免疫组织化学
- Fibulin-5表达对膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响
- 2010年
- 目的探讨fibulin-5表达在膀胱尿路上皮癌中的影响作用。方法经尿道切除获取膀胱尿路上皮癌标本20例，其中低级别（G1和G2）13例、高级别（G3）7例。蛋白质印迹法检测fibulin-5在膀胱尿路上皮癌和正常膀胱黏膜组织中的表达。将PCR扩增的fibulin-5eDNA克隆到pMD-19T载体中，构建p-EGFP—fibulin-5质粒。脂质体介导法将p-EGFP—fibulin-5质粒转染到人膀胱癌5637细胞株内，流式细胞仪分选，经G418筛选形成稳定的表达克隆。Boyden小室法检测未转染、转染空载体和转染fibulin-5的膀胱癌细胞迁移和侵袭能力。结果正常膀胱黏膜、低级别和高级别膀胱尿路上皮癌组织中fibulin-5蛋白相对表达量分别为1．16±0．28、0．57±0．32和0．44±0．42。与正常膀胱黏膜相比，膀胱癌组织中fibulin-5蛋白表达显著下调（P〈0．01），低级别和高级别癌之间差异无统计学意义（P〉0．05）。转染成功的膀胱癌5637细胞显示绿色荧光。未转染、转染空载体和转染{ibulin-5的膀胱癌细胞的迁移细胞数分别为136．9±5．7、139．3±7．7和127．6±3．1，侵袭细胞数分别为31．7±4．7、31．5±4．8和8．0±3．1。转染fibulin-5后膀胱癌细胞侵袭力明显降低（P〈0．01），其迁移力虽低于对照组但差异无统计学意义（P〉0，05）。结论Fibulin-5蛋白表达减少可能是膀胱癌发生和发展的机制之一，过表达fibulin-5可以抑制膀胱癌细胞侵袭力。
- 闫永吉胡争艾青吴准李俊马鑫李宏召史涛坪王保军龚道静倪栋
- 关键词：膀胱肿瘤肿瘤侵润FIBULIN-5
- CRISPR／Cas系统对人宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响及其机制探讨
- 2015年
- 目的研究靶向于HPV16型的-E7（HPV16-E7）基因的成簇规律间隔短回文重复序列及其相关系统（CRISPR/Cas）对HPV16阳性宫颈癌细胞株SiHa增殖和凋亡的影响及其机制。 方法培养HPV16阳性的宫颈癌细胞株SiHa和HPV阴性的人胚肾上皮细胞株HEK293，分别将SiHa细胞和HEK293细胞分为3组：Cri组（按照1∶3的比例转染向导RNA与Cas9质粒）、C9组（只转染等量的Cas9质粒）和对照组（不处理）。T7核酸内切酶Ⅰ法检测双链DNA断裂情况，流式细胞术检测细胞凋亡，CCK8法评价细胞增殖，Western blotting检测E7和成视网膜母细胞瘤蛋白（pRb）表达。结果转染48 h后，SiHa细胞Cri组PCR产物被切开。SiHa细胞Cri组凋亡率为26.6%，明显高于对照组（2.6%，χ2=5.455，P=0.020）和C9组（3.1%，χ2=6.279，P=0.012）。HEK293细胞对照组、C9组和Cri组的凋亡率分别为7.4%、7.6%、7.9%，Cri组与对照组和C9组比较，差异均无统计学意义（χ2=0.032，P=0.858；χ2=0.034，P=0.853）。转染72 h后，SiHa细胞Cri组增殖抑制率为29.4%，明显高于对照组（15.0%，χ2=22.481，P=0.000）和C9组（18.0%，χ2=24.879，P=0.000）。Cri组HEK293细胞在72 h的增殖抑制率为3.2%，与C9组（2.2%，χ2=2.857，P=0.091）和对照组（2.3%，χ2=3.438，P=0.064）比较差异均无统计学意义。转染48 h后，与对照组相比，SiHa细胞Cri组E7蛋白表达明显下调，pRb蛋白表达明显上升，而C9组E7蛋白和pRb蛋白含量没有明显变化。结论靶向HPV16-E7的CRISPR可以特异性地促进HPV16阳性的SiHa细胞凋亡、抑制细胞增殖。其机制可能是通过特异性地作用于HPV16-E7基因使其双链DNA断裂、功能破坏，同时上调抑癌蛋白pRb表达。
- 王瑞玲胡争夏薇魏波叶望莲朱红芳
- 关键词：宫颈肿瘤人乳头瘤病毒16
- Fibulin-5过表达对膀胱癌细胞增殖的影响被引量：3
- 2010年
- 目的观察Fibulin-5对膀胱癌细胞增殖的影响。方法采用脂质体介导法将构建好的P—EGFP—NI—Fibulin-5表达载体转染到膀胱癌5637细胞中。通过噻唑蓝（MVr）比色法和细胞计数法检测Fibulin-5表达上调后膀胱癌细胞生长率的变化。结果酶切鉴定及DNA测序结果显示Fibulin-5cDNA插入正确；转染48h后，观测到p-EGFP—N1-F5表达载体转染成功的细胞均有不同程度的绿色荧光表达。培养第7天，MTY法测得转染Fibulin-5、转染空载体和未转染的膀胱癌细胞的吸光值分别为n330±0．025、0．640±0．030和0．720±0．060。绘制生长曲线发现转染Fibulin-5的膀胱癌细胞的生长率明显低于转染空载体（P〈0．05）和未转染的细胞（P〈0．05）。细胞计数结果和MTF一致。结论Fibulin-5可能通过抑制膀胱癌细胞的增殖而在膀胱癌中起抑癌基因的作用。
- 闫永吉胡争艾青吴准李俊马鑫李宏召史涛坪王保军龚道静倪栋
- 关键词：膀胱癌FIBULIN-5增殖
- 宫颈癌石蜡切片组织荧光原位杂交预处理方法的探讨
- 2014年
- 目的:探讨宫颈癌石蜡切片组织荧光原位杂交过程中不同预处理方法对实验效果的影响。方法:分别采用硫氢化钠法和亚硫酸氢钠法预处理宫颈癌石蜡组织切片,从细胞核消化程度以及荧光信号质量等方面比较不同的消化时间、变性温度以及不同年份的石蜡切片的荧光原位杂交实验效果的差异。结果:①优化后的亚硫酸氢钠法和硫氢化钠法处理石蜡切片都能得到较好的荧光原位杂交信号。②石蜡切片消化处理后以变性温度90℃处理切片,能得到高质量的荧光原位杂交信号。③两种预处理方法处理不同年份的石蜡切片得到的实验结果不同,硫氢化钠法可以处理年代更久远的石蜡切片。结论:与亚硫酸氢钠法相比,硫氢化钠法能得到质量更高的荧光原位杂交信号,在科研方面有更广阔的应用前景。
- 张昌林祝达丁文成胡争王笑犁王黎明沈慧蒋孝会于兰汪辉
- 关键词：宫颈癌荧光原位杂交
