孙松柏 作品数:23 被引量:108 H指数:9 供职机构: 中国科学院武汉病毒研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 中国科学院知识创新工程重要方向项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 化学工程 轻工技术与工程 更多>>
兔出血症病毒体外复制的研究 被引量:7 1992年 在几种动物细胞上,采用同步感染的方法研究了兔出血症病毒(RHDV)的复制特性。病毒感染细胞后(PI)48—72小时可观察到明显的细胞病变,血凝效价可增高5—10倍。病毒对细胞传代代数不同,敏感性也不同。在兔婴肾(RK)和兔婴肺(RL)细胞上以4—8代最为敏感。采用免疫荧光染色法,经病毒感染48—72小时的细胞中可观察到特异性荧光。细胞增殖的病毒经PEG-DS浓缩,Sepharose 4B柱层析提纯后,在电镜下可观察到完整的病毒粒子,将此病毒回接健康实验兔可致100%死亡。免疫双扩散和免疫电泳试验表明,细胞增殖的病毒抗原与来自病兔肝的RHDV抗血清之间产生明显的沉淀带。SDS-PAGE分析病毒获得四条多肽,其分子量大小与病兔肝组织提取的病毒蛋白多肽分子量相比略有差异。 罗经 杨学楼 刘虹 严银钫 王汉中 孙松柏关键词:兔出血症病毒 血凝效价 磷酯酶C对家兔血小板聚集和超微结构的影响 被引量:12 2003年 目的 应用电镜研究磷酯酶C(phospholipaseC ,PLC)对家兔血小板聚集和超微结构的影响 ,以探讨用药后PLC抗血小板聚集作用的机制。方法 家兔颈动脉插管取血 ,制备PRP ,将其分为 4组 :①空白对照组 ;②生理盐水组 ;③ 0 5UPLC组 ;④ 2 5UPLC组。 2~ 4组分别用ADP诱导聚集 ,测出其聚集抑制率 ,各组分别制成超薄切片样品进行电镜观察、摄片。结果 0 5、2 5UPLC明显抑制血小板聚集反应 ,聚集抑制率分别为 86 0 3 %± 12 6%和 82 47%±5 49% ;0 5UPLC抑制血小板形成伪足 ,α颗粒和致密颗粒较多 ,OCS管腔较小 ,其超微结构较生理盐水组变化小 ;2 5UPLC处理血小板的形态结构和超微结构与空白对照组无差异 ,血小板呈圆形或椭圆形 ,边缘光滑 ,无伪足样突起 ,α颗粒、致密颗粒、OCS等正常分布于胞质中。结论 PLC明显抑制ADP诱导的血小板聚集反应及其超微结构的改变 。 宋建华 陈明锴 王常高 孙松柏 陈涛关键词:血小板 超微结构 抗血小板聚集作用 一种磷酯酶制剂的制备方法 本发明公开了一种磷酯酶制剂的制备方法,首先是菌种活化,将无菌水滴入菌体的冻干管中混匀,再将菌种接在固体培养基上进行活化培养;其次是种子液的培养,将菌种接在装有液体培养基的种子罐中培养;再次是发酵液的培养,将种子液接入发酵... 陈涛 孙松柏 宋建华文献传递 高产磷酯酶C菌株筛选及其抗血小板功能的研究 被引量:10 2003年 在湖北省、湖南省、江苏省、山东省、广东省156个点采土样1268份,利用卵黄琼脂的LB培养基初筛获得产生乳白色晕圈的菌株648株;再用卵黄琼脂滤纸圆片检测获得产生乳白色晕圈和透明圈菌株266株;这些菌株用卵黄琼脂杯蝶法筛选出产生大于130mm乳白色晕圈及少量透明圈共73株,经过菌生物量、卵黄杯碟法和抗兔血小板聚集率的测定,从73株菌中筛选出15株,菌号为:183,198,247,424,587,596,692,744,7541,7912,779,970,998,1107,1182;将此15菌株经菌生物量、卵黄琼脂杯碟法、NPPC法和抗人血小板聚集率的测定,从中选出7541,779,970,1107四株菌进行分类鉴定和已知菌CW W 903菌对照比较的研究。 王常高 陈明锴 高林 宋建华 孙松柏 陈涛关键词:菌株筛选 一株高产PLC的CW-W-90-3菌的鉴定 被引量:12 2002年 198 9年 ,筛选了 1株高产 phospholipaseC(PLC)的CW W 90 3菌株[1,2 ] ,据其形态特征、生理生化反应 ,初步将其归于弧菌科气单胞菌属[3 ] ,由于该菌株的许多生理生化特性与粘质沙雷氏菌相同。但其极生单鞭毛和无色素及少许生理生化特性与粘质沙雷氏菌相异。后经AutomatedBacteriaIdentificationSystem BiologMicroStationSystem检测 96种C源和N源的利用及其个体群体发育 ,说明其与粘质沙雷氏菌 (Serratiamarcescens)相符 ;并在基因组水平上研究该菌株的系统发育 ,从分子水平上对该菌株进行 16SrRNA序列分析煌同源性比较。根据CW W 90 3菌株 16SrRNA与GeneBank数据库中Serratiamarcescens的 16SrRNA的序列具有 99%的同源性 ,终将CW W 90 3菌株鉴定为粘质沙雷氏菌武汉株 (SerratiamarcescensWuhanstrain)。 宋建华 童骁 陈明锴 苏垒 田华 孙松柏 陈涛关键词:PLC 高产菌株 一株高产磷酯酶C的菌株 本发明是一株高产磷酯酶C的新菌株是气单胞菌属,其代谢产物是磷酯酶C,目前,国内外未见报道气单胞菌属的菌产磷酯酶C,与国外其它属种产磷酯C的菌种比较,产量高、成本低、工艺简单。 陈涛 孙松柏 王近芬 童骁 刘芳 蔡陈崚 刘嘉蓉 陈蔚 宋建华 宋冬林文献传递 丝状真菌发酵生产多不饱和脂肪酸的研究 被引量:26 2001年 用丝状真菌发酵生产多不饱和脂肪酸 ,对菌株筛选 ,诱变选育 ,中试发酵进行了研究 ,发酵生物量为 4 9g菌体 /L发酵液 ,含油率 4 2 .75 %~ 4 7.78% ,产油量 19.7g/L发酵液 ,γ -亚麻酸 5 .78%~ 6 .5 9% ,花生四烯酸 4 .6 % ,确定了工艺技术路线 ,分析了产品的理化指数 。 何东平 陈涛 孙松柏 童晓 宋建华 田华 宋光森关键词:丝状真菌 发酵 制取 多不饱和脂肪酸 猪脾细胞干扰素安全性的研究 (二)猪脾细胞干扰素局部毒性与过敏实验 1990年 猪脾细胞干扰素(PSIFN)在同源和异源细胞上都表现出较高的抗病毒活性。它不仅可用于干扰素的研究材料,同时在实际用途上亦有很大潜力。但只有在进行了对局部组织影响程度和过敏试验后才能考虑进行全身性用药的各项试验。本文报道PSIFN局部毒性与过敏试验的实验研究。 周晓峰 杨学楼 刘虹 罗经 孙松柏 王汉中关键词:干扰素 安全性 过敏试验 粘质沙雷氏菌武汉株PLA_1基因的克隆和序列 被引量:2 2002年 通过鸟枪法构建了粘质沙雷氏菌SerratiamarcescensCW W 90 3菌株的基因组文库。使用LB 卵黄平板 ,从中筛选出 1条含磷酯酶基因的 3 0 10bp的EcoRⅠ片段。通过测序及亚克隆分析 ,发现 1个编码磷酯酶的基因phlA ,长度为 96 3bp ,编码 1个由 32 0个氨基酸组成 ,分子量为 33ku的磷酯酶PHL。PHL的氨基酸序列与多种细菌产生的磷酯酶A1的氨基酸序列有很高的同源性。在 phlA下游发现 1个 75 6bp的ORF phlB ,编码 1条 2 5 1个氨基酸组成的蛋白质 ,分子量为 2 7ku ,将其命名为PHLS ,此基因的功能有待于进一步研究。 苏磊 童骁 宋建华 孙松柏 陈涛关键词:基因克隆 兔出血症细小病毒血清学的研究 1989年 应用免疫双扩散和酶联免疫吸附分析(ELISA)对七个不同地区兔出血症病原分离物进行了血清学比较研究。本试验用免疫双扩散和ELISA,证明七个兔出血症病毒分离物之间存在着基本相同的血清学关系,其中A_2R—3和H.E.二株抗原之间存在较大差异.证实我国流行的兔出血症病毒属于一个血清型,但不同地区的分离株可能出现亚型。 黄文林 刘虹 孙松柏 罗经 王汉中 吴晰莹 杨学楼关键词:兔出血症病毒 细小病毒 血清学