刘艳红
- 作品数:4 被引量:11H指数:2
- 供职机构:四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 化学修饰对川木通凝集素活性及构象的影响被引量:2
- 2009年
- 川木通干燥茎蛋白粗提液经DEAE-Sepharose离子交换柱和Sephacryl S-100分子筛分离后得到川木通凝集素(命名为CML)。Tricine SDS-PAGE分析表明CML的分子量为12.5 kDa,Sephacryl S-100分子筛分析CML的表观分子量为25.8 kDa,表明CML是由两个亚基组成的同源二聚体。过碘酸-希夫(periodic acid Schiff reacition,PAS)染色结果表明CML为糖蛋白,糖含量为12.2%。氨基酸残基修饰色氨酸(Trp)、精氨酸(Arg)和-SH CML凝血活性的必需基团。每分子CML中含有6个Trp。荧光光谱显示这些基团修饰后荧光强度都有不同程度的下降,最大发射峰位置也相应变化,表明这些残基修饰导致蛋白质构象变化。酪氨酸(Tyr)、苏氨酸(Ser/Thr)和组氨酸(His)修饰后,活性并没有变化,但荧光强度显著减弱,说明修饰后CML分子的活性中心的必需构象并没有受到破坏,但氨基酸的修饰导致色氨酸的微环境发生变化。
- 刘艳红张擘张帆季娜鲍锦库
- 关键词:化学修饰荧光光谱
- 利用荧光淬灭作用研究川泽泻凝集素微环境与生色基团的空间分布被引量:2
- 2007年
- 用不带电荷的极性淬灭剂丙烯酰胺和带电荷的I-离子、Cs+对川泽泻凝集素内源荧光进行淬灭研究,以揭示凝集素与小分子物质相互作用以及凝集素荧光生色基团的分布情况.天然川泽泻(Alisma plantago-aquatica Linn)凝集素在280nm和295nm波长下均显示λmax为328nm的荧光发射光谱,表明凝集素荧光生色基团位于相对疏水的环境中.中性淬灭剂丙烯酰胺对凝集素分子的荧光生色基团Tyr和Trp残基的可接近程度为96.81%,而对阴离子淬灭剂I-离子和阳离子淬灭剂Cs+离子的可接近程度分别为37.17%和21.96%.表明川泽泻凝集素荧光氨基酸残基主要位于分子内部的疏水核心.
- 刘超徐小超刘艳红徐雨孔杨钟绍东鲍锦库
- 关键词:荧光光谱荧光淬灭微环境
- 一支箭凝集素构象与生物学活性的关系研究被引量:5
- 2008年
- 采用荧光光谱研究了一支箭凝集素(OPA)在不同温度,pH值以及不同淬灭剂作用时,其活性和分子构象变化的关系,结果表明:OPA具有较强的温度和酸碱度的耐受性,分子构象也无较大变化,但在pH 12时,其分子构象发生较大变化,活性也基本丧失.荧光淬灭剂丙烯酰胺和琥珀酰亚胺对OPA中Trp淬灭程度达100%,KI淬灭约62.5%的Trp荧光.表明OPA发射荧光的氨基酸残基大部分位于分子表面,少部分位于分子内部疏水环境中,且发荧光氨基酸所处微环境带电荷.
- 赖媛媛吴传芳王维刘艳红刘震鲍锦库
- 关键词:荧光光谱温度PH值荧光淬灭
- 犁头尖凝集素色氨酸(Trp)所处微环境及构象的研究被引量:2
- 2008年
- 本文通过荧光淬灭的方法对犁头尖凝集素(TDL)的内源荧光进行了淬灭研究。研究结果表明:丙烯酰胺与TDL分子中Trp残基的可接近程度达到100%,而KI和CsCl与Trp残基的可接近程度分别为83.3%和50%,说明TDL中大部分Trp残基位于分子表面或近表面区域,且位于表面的Trp残基所处微环境中带正电荷基团约为带负电荷基团的一倍。荧光淬灭数据分析表明这三种淬灭剂对TDL的荧光淬灭作用均属动态淬灭机制。此外,本文还研究了变性剂对TDL凝血活性与荧光光谱的影响,研究表明同浓度的盐酸胍对TDL变性作用明显强于脲,TDL活性的丧失主要是由于其活性中心被变性剂破坏而造成。
- 钟绍东刘艳红徐小超鲍锦库
- 关键词:凝集素凝集活性微环境荧光淬灭