高俊峰 作品数:112 被引量:161 H指数:6 供职机构: 黑龙江八一农垦大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 黑龙江省自然科学基金 国家自然科学基金 黑龙江省青年科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 文化科学 医药卫生 生物学 更多>>
中草药方剂治疗兔球虫病的研究 被引量:2 2013年 选用1-2月龄幼兔75只,随机分成5组,即中草药高剂量组、中草药中剂量组、中草药低剂量组、地克珠利组和空白对照组。通过观察临床症状,检测卵囊排出量、料重比、死亡率对药物效果进行评价。结果表明:中药高剂量组、地克珠利组可抑制兔球虫卵囊产生,降低发病率和死亡率,提高饲料转化率的作用均显著优于其他组,而高剂量组和地克珠利组之间无明显差异(P〉0.05)。试验表明,中草药治疗兔球虫病的效果理想。 高俊峰 贾斌 侯美如 李桂伟 王丽坤关键词:幼兔 兔球虫 中草药 NLRP3炎症小体对华支睾吸虫感染小鼠肝纤维化的影响 2025年 以华支睾吸虫人工感染小鼠为研究对象,研究华支睾吸虫感染过程中NLRP3炎症小体激活情况及其对肝损伤和肝纤维化的影响。将6~8周龄BALB/C小鼠随机分为对照组和感染组,6周后安乐死,采集2组小鼠的血清及肝脏组织样品,检测肝功能、肝纤维化及通路相关指标。与对照组相比,感染组肝组织HE染色结果显示,肝小叶结构遭到破坏,且有大量炎性细胞浸润;感染组血清中AST(P<0.001)和ALT的活力极显著增加(P<0.01),SOD活性极显著下降(P<0.01),肝组织中MDA含量显著增加(P<0.05),且GSH活性显著下降(P<0.05)。与对照组相比,感染组Masson染色切片中有胶原纤维沉积,免疫组化试验检测到肝星状细胞(HSCs)被极其显著激活(P<0.0001);RT-qPCR结果显示,感染组肝组织中α-SMA、Col3α1的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Col1α1的mRNA表达水平极显著升高(P<0.01);Western-blot结果显示,感染组肝组织中Col3α1的蛋白表达水平显著升高(P<0.05),α-SMA和Col1α1的蛋白表达水平极显著升高(P<0.01)。与对照组相比,感染组IL-1β的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),NLRP3、Caspase-1、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平极显著升高(P<0.01);感染组小鼠肝组织中IL-18和细胞外信号调节激酶(ERK)的蛋白表达水平显著升高(P<0.05),NLRP3、Caspase-1、IL-1β、p38(P<0.01)和p65(P<0.001)的蛋白表达水平极显著升高。此外,与对照组相比,感染组小鼠肝组织中NLRP3/ASC和NLRP3/Caspase-1的荧光聚集强度极其显著增加(P<0.001)。综上,华支睾吸虫感染可使小鼠肝组织中NLRP3炎症小体被激活,导致多种炎性细胞因子的产生并诱导小鼠出现肝损伤与肝纤维化。 白雪 孙云异 胡雁鸣 兰卓 侯美如 邱鸿宇 高俊峰 高俊峰 王春仁关键词:华支睾吸虫 肝纤维化 高含量痢菌净溶液的制备 被引量:1 2016年 通过了解痢菌净在不同溶剂及助溶剂的溶解情况,筛选并组合最佳溶剂,以制备高含量痢菌净溶液,为临床药剂开发提供参考依据。运用全波长扫描选取最适痢菌净检测波长,并建立痢菌净含量检测方法,测定不同溶剂及助溶剂对痢菌净的最大溶解量,组合形成可溶解高含量痢菌净溶液的混合溶剂。结果表明,痢菌净在373.0 nm、368.0nm、356.0 nm、254.0 nm、241.0 nm均有吸收峰,经与其他所选溶剂及助溶剂全波长扫描图谱比较,选取373为最适检测吸收波长。建立的痢菌净含量检测方法在1.25~20μg/m L浓度范围内,吸收度与浓度呈良好的线性关系,R2=0.9992。不同溶剂及助溶剂中,单一溶剂或助溶剂对痢菌净的溶解程度均较混合溶剂差,且以水杨酸钠效果最好,但其在350.0~500.0 nm区间有较低的吸收峰,对运用紫外分光光度法测定痢菌净含量有一定的影响,2种混合溶剂均有较好的溶解效果,混合溶剂1溶解量最大,达54.37 mg/m L。为以后痢菌净缓释药剂的开发奠定了基础。 侯美如 高俊峰 冯万宇 徐馨 周庆民关键词:痢菌净 溶剂 助溶剂 鸭东方次睾吸虫病间接ELISA诊断方法的建立 被引量:1 2021年 为评价候选蛋白烯醇化酶(Enolase)作为东方次睾吸虫ELISA诊断抗原的潜力,重组表达东方次睾吸虫烯醇化酶基因,以纯化好的重组蛋白为抗原,优化各检测条件,建立了鸭东方次睾吸虫病间接ELISA诊断方法并用该方法检测临床样品。结果显示,通过棋盘滴定法,确定了抗原的最佳包被质量浓度为2g/mL和血清最佳稀释度为1∶100,其他条件优化结果为:酶标二抗的最佳稀释度为1∶5000,最佳包被条件为4℃包被过夜,最佳封闭条件为50g/L脱脂奶粉溶液封闭2h,显色液最佳显色时间为10min。通过对25份未感染东方次睾吸虫鸭的阴性血清进行检测与统计分析,确定出该重组蛋白间接ELISA方法的阳性临界值为0.322。经优化反应条件后建立的间接ELISA方法具有特异性强、敏感性高和重复性好等优点。利用本研究中建立的ELISA方法检测120份临床血清,阳性率为14.2%,与粪便虫卵检测结果的符合率为94.74%,表明该烯醇化酶可作为东方次睾吸虫病血清学诊断的良好候选抗原。本研究为进一步研发鸭东方次睾吸虫病的血清学诊断试剂盒奠定了坚实的理论基础。 高俊峰 毛瑞锋 孙云异 马晓晓 兰卓 常巧呈 王春仁关键词:东方次睾吸虫 间接ELISA 烯醇化酶 血清学诊断 舟形嗜气管吸虫线粒体部分基因和核糖体全序列的扩增与进化分析 舟形嗜气管吸虫(Tracheophilus cymbius)隶属于枭形目(Strigeata)环腔科(Cyclocoelidae)嗜气管属(Tracheophilus),寄生于鸡、鸭、鹅等家禽的气管、支气管、气囊和鼻腔等... 李烨 李琦 高俊峰 张艳 王春仁关键词:线粒体基因 进化分析 文献传递 奶牛特异性转移因子的制备及其免疫活性检测 2015年 通过冷冻透析法制备奶牛隐性乳房炎特异性转移因子,并对其免疫活性进行检测。方法为采用匀浆、冻融、透析被免疫猪的脾脏,制备特异性转移因子,运用理化性质检验、安全试验、无菌试验检验所制备转移因子的纯度及安全性,并运用小鼠巨噬细胞吞噬功能试验及E玫瑰花环试验对特异性转移因子免疫活性进行检测。试验结果为:所制备的奶牛隐性乳房炎特异性转移因子多肽含量为1.3 p g/mL,核酸含量为24μg/mL,OD_(260 nm)/OD_(280 nm)值为2.08,且安全、无菌。巨噬细胞吞噬功能试验及E玫瑰花环形成试验表明转移因子可明显增加巨噬细胞吞噬能力并能增加E玫瑰花环的形成数。因此,本品可作为奶牛隐性乳房炎的治疗药物,亦可作为细胞免疫增强剂使用。 侯美如 刘宇 王岩 秦平伟 尹珺伊 高俊峰 史同瑞关键词:奶牛隐性乳房炎 特异性转移因子 免疫活性 一体式蒸发回流装置 本实用新型涉及的是一体式蒸发回流装置包括回流装置、蒸发装置及控制台,所述的回流装置为冷凝管,冷凝管上端设有出水口,下端设有进水口,冷凝管底部管口伸入蒸发装置内部;所述的蒸发装置包括上部的玻璃顶及下部的不锈钢底座,所述的玻... 高俊峰 杨淑萍 王丽坤 陈瑛琦 高磊 董树成 张琪 肖玉萍 翟莹 侯美如木霉菌T115D发酵条件及对大豆疫霉根腐病生物防治的研究 为了使木霉菌T115D尽快应用于生产,本文主要研究木霉菌T115D的发酵条件、木霉菌T115D发酵滤液对大豆疫霉菌的抑制作用、木霉菌对大豆疫霉菌生防机制的研究、木霉菌T115D发酵液对大豆疫霉根腐病的室内盆栽防效试验,为... 高俊峰关键词:木霉 发酵条件 大豆疫霉菌 生防机制 生物防治 文献传递 蟾蜍棒线虫线粒体全基因组特征分析 2025年 【目的】获得蟾蜍棒线虫(Rhabdias bufonis)线粒体全基因组并分析其特征。【方法】通过PCR扩增蟾蜍棒线虫线粒体基因组序列,利用测序、注释、组装、拼接,获得线虫线粒体全基因组,对其进行序列分析;以湖沼驼形线虫(Camallanus lacustris)为外群,基于线粒体12个蛋白质编码基因(PCGs)氨基酸串联序列,采用邻接法(Neighbor-Joining,NJ)和贝叶斯法(Bayesian inference,BI)构建系统发育树进行进化分析。【结果】蟾蜍棒线虫线粒体基因组为环形结构,全长为14208 bp,由12个PCGs、22个转运RNA(tRNAs)、2个核糖体RNA(rRNAs)和2个非编码控制区组成;其线粒体基因组碱基组成中AT含量为75%、GC含量为25%,AT偏倚(AT-skew)为0.26,GC偏倚(GC-skew)为―0.36,呈现明显的AT偏向性。PCGs以ATG、GTG作为起始密码子,以TGA、TAA及不完整的TA-作为终止密码子。tRNAs二级结构分析显示,除trnS2和trnH基因缺少二氢尿嘧啶(DHU)臂外,其余均为典型的三叶草结构。系统进化树分析显示,垫刃亚目(Tylenchina)分为两个大的分支,首叶超科(Cephaloboidea)和垫刃超科(Tylenchoidea)形成分支Ⅰ,类圆超科(Strongyloidoidea)、斯氏超科(Steinernematoidea)、滑刃超科(Aphelenchoidea)及Panagrolaimoidea形成分支Ⅱ;在分支Ⅱ中,斯氏科(Steinernematidae)和棒线科(Rhabdiasidae)聚集在一起再与滑刃科(Aphelenchoidiae)和Panagrolaimidae形成的另一姐妹支形成一个大的分支,而类圆科(Strongyloididae)则独立形成另一个大的分支;林蛙源蟾蜍棒线虫与蟾蜍源蟾蜍棒线虫(OR725306)聚集在一起,两者关系较其他两株Rhabdias kafunata亲缘关系近;寄生于两栖类棒线虫与昆虫斯氏线虫聚为一支,且与寄生于植物的滑刃科线虫亲缘关系较寄生于哺乳动物的类圆线虫近。【结论】本研究成功获得林蛙源蟾蜍棒线虫线粒体全基因组序列,且斯氏科与棒线科的亲缘关系明显近于类圆科,支持斯氏超科作为独立分类阶元的 杨彦 胡雁鸣 丁健 李犇 何雨桐 刘雪薇 王佳文 兰卓 邱鸿宇 高俊峰 王春仁关键词:线粒体基因组 遗传进化分析 基于线粒体和核糖体部分基因的蛙两种重盘吸虫遗传多样性分析 2025年 为了解林蛙重盘吸虫的遗传多样性,对采自黑龙江省鹤岗、伊春、佳木斯、齐齐哈尔、鸡西五个地市林蛙肠道寄生的日本重盘吸虫和短肠重盘吸虫线粒体cox 1、nad 1以及核糖体ITS基因进行PCR测序和序列分析。结果表明,日本重盘吸虫3个基因部分序列的有效长度分别421 bp、905 bp和831 bp,短肠重盘吸虫3个基因部分序列有效长度分别为420 bp、739 bp和797 bp;3基因联合序列(cox1、nad1和ITS)分析不同地区50个日本重盘吸虫分离株中共发现34种单倍型,50个短肠重盘分离株中共发现46种单倍型,2种重盘吸虫各分离株均呈高单倍型多样性和低核苷酸多样性(H>0.5,π<0.005),表现出高度遗传多样性;系统发育分析显示2种重盘吸虫没有形成明显地理遗传结构;中性检验、错配分布分析结果显示,黑龙江省日本重盘吸虫可能经历过种群扩张而短肠重盘吸虫种群相对稳定。研究结果表明,黑龙江省2种重盘吸虫的遗传多样性较高,各种群间基因交流较为频繁,未形成显著的地理遗传结构。 陈滢钰 邱鸿宇 安琪 谢沛璇 李犇 刘雪薇 杨彦 闫艺萌 李秀文 高俊峰 王春仁关键词:遗传多样性分析 种群遗传