马孝熙 作品数:14 被引量:117 H指数:8 供职机构: 天士力控股集团有限公司 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 中央高校基本科研业务费专项资金 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
基于ITS2条形码序列鉴定中药材佩兰及其混伪品 被引量:8 2013年 目的:对中药材佩兰及其混伪品进行ITS2条形码鉴定,以确保该药材的质量以及临床疗效。方法:提取佩兰的DNA,利用PCR技术扩增其ITS2序列,双向测序,所得序列经过CodonCodeAligner拼接后,用软件MEGA5进行相关数据分析,计算其种内、种间遗传距离,并构建系统发育树。结果:佩兰药材的ITS2序列长度为218 bp;佩兰种内最大K2P距离为0.009,与混伪品种间最小K2P距离为0.024。ITS2序列的NJ系统聚类树可明显区分佩兰药材及其混伪品,表现出良好的单系性。结论:ITS2条形码序列能够成功鉴定中药材佩兰与其混伪品,为保障临床安全用药提供了新的技术方法。 邬兰 陈科力 孙伟 胡志刚 凃媛 马孝熙 林韵涵 周红关键词:混伪品 远志药材及其混伪品的DNA条形码鉴定 被引量:13 2014年 目的:对中药材远志及其混伪品进行分子鉴定,保障药材质量及用药安全。方法:对46份样品进行DNA提取,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其psbA-trnH序列并双向测序,应用CodonCode Aligner V3.7.1对测序峰图校对拼接,去除低质量区和引物区,得到psbA-trnH序列,用MEGA 6.0对序列进行比对分析,基于K2P遗传距离构建系统聚类树。结果:通过相似性搜索法能准确鉴别远志及其混伪品,远志两个基原的种内最大K2P距离分别为0.004和0,均小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离(0.010和0.005),基于psbA-trnH序列的系统发育树可将远志药材及其混伪品明显区分开。结论:psbA-trnH序列能有效鉴别远志药材及其混伪品,为中药材的质量控制提供新方法。 马孝熙 任伟超 孙伟 凃媛 张雅琴 宋明 于俊林 黎斌 陈士林关键词:远志 DNA条形码 中药材半夏及其混伪品的DNA条形码鉴定研究 被引量:14 2014年 目的:采用ITS2序列对中药材半夏及其混伪品进行DNA条形码鉴定研究,为规范中药材半夏的市场流通,保障临床用药安全及疗效提供参考依据。方法:对半夏及其混伪品共59份样品,通过DNA提取及聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列,并采用Mega6.0软件进行多序列比对,计算种内及种间K2P遗传距离,采用邻接(NJ)法构建NJ系统聚类树。采用相似性搜索法、最小距离法、NJ树法考察ITS2序列的鉴定能力。结果:半夏药材的ITS2序列长度为251 bp,应用相似性搜索法表明ITS2序列能够准确鉴定半夏药材及其混伪品;半夏种内最大K2P距离小于半夏与混伪品间的最小K2P距离;NJ树显示半夏药材可与其混伪品明显分开。结论:ITS2序列能准确、稳定鉴定中药材半夏药材及其混伪品。 张雅琴 宋明 孙伟 向丽 马孝熙 樊佳佳 王俊 张晓存 刘霞关键词:半夏 DNA条形码 混伪品 基于ITS2序列鉴定苗药金铁锁及其混伪品 被引量:4 2014年 目的:本研究利用ITS2序列对苗药金铁锁及其混伪品进行鉴定研究,从而确保药材质量,保障临床用药安全。方法:提取金铁锁药材及其混伪品基因组DNA,PCR扩增并双向测序获得ITS2序列。所有序列经过CodonCode Aligner V3.7.1拼接后,采用MEGA5.1软件进行序列比对,计算种内和种间Kimura2-Parameter(K2P)遗传距离,并构建系统发育树。采用相似性搜索法、最近距离法、邻接(NJ)树法对ITS2序列鉴定能力进行评估。结果:金铁锁药材的ITS2序列长度为229 bp,其ITS2序列种内最大K2P遗传距离小于与混伪品的最小种间K2P遗传距离;应用相似性搜索法表明ITS2序列能够准确鉴定金铁锁药材及其混伪品;基于ITS2序列构建NJ树,金铁锁及其混伪品均表现出良好单系性,均能明显区分。结论:ITS2序列能够稳定、准确地鉴定金铁锁药材及其混伪品,DNA条形码技术可为金铁锁药材及其混伪品的鉴定提供新的方法。 宋明 张婉冰 张雅琴 孙伟 向丽 石晋丽 马孝熙 王俊 樊佳佳 张晓存 刘霞关键词:金铁锁 ITS2 混伪品 基于ITS2条形码序列鉴定中药材两头尖及其混伪品 被引量:2 2014年 目的:本研究利用ITS2序列对中药材两头尖及其混伪品进行DNA条形码鉴定,以确保该药材的质量及临床疗效。方法:采用试剂盒法对36份样品提取DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列并双向测序,所得序列经过CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA5.1进行数据分析,包括变异位点分析、种内种间距离计算及系统发育树构建。结果:两头尖药材的ITS2序列长度为216 bp,种内最大K2P距离为0.014,种间的最小K2P距离为0.021;NJ树结果显示两头尖与其混伪品可明显区分,表现出良好的单系性。结论:ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别两头尖药材,为其鉴定提供新的技术手段。 任伟超 马伟 安超 马孝熙 邬兰 孙伟关键词:两头尖 ITS2 混伪品 基于ITS2序列鉴定中药材金沸草、旋覆花及其近缘混伪品 被引量:14 2014年 目的:应用ITS2序列鉴定中药材金沸草、旋覆花及其近缘种混伪品,以确保药材质量,保障临床安全用药。方法:通过对金沸草、旋覆花等药材的3个基原物种条叶旋覆花、旋覆花和欧亚旋覆花及其同属近缘物种进行DNA提取、PCR扩增ITS2序列并双向测序,用CodonCode Aligner对测序峰图进行拼接后,用MEGA5.0软件进行相关数据分析,并构建NJ系统聚类树以直观反映鉴定结果。结果:各基原物种ITS2序列变异位点稳定,其种内平均K2P距离均远小于各自药材以及同属近缘混伪品的种间平均K2P距离;基于ITS2序列的NJ树可以将金沸草和旋覆花药材与同属其它近缘混伪品明显区分开。结论:ITS2序列可准确鉴别中药材金沸草和旋覆花及其同属近缘混伪品。 郭力城 胡志刚 凃媛 张卫东 金慧子 孙伟 贺海波 马孝熙 黄必胜关键词:旋覆花 近缘物种 远志药材及其混伪品的DNA条形码鉴定 目的:对中药材远志及其混伪品进行分子鉴定,以保障药材质量及用药安全.方法:对46份样品进行DNA提取,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其psbA-trnH序列并双向测序,应用CodonCode Aligner V3.7.... 马孝熙 任伟超 涂媛 张雅琴 宋明 孙伟关键词:远志 DNA条形码 基于ITS2序列鉴定中药材升麻及其混伪品 被引量:11 2014年 该研究选用ITS2序列对升麻及其混伪品进行分子鉴定,从而确保用药安全。实验采用DNA条形码技术,对升麻及其混伪品的ITS2核基因片段进行扩增并双向测序,经CodonCode Aligner V3.7.1拼接后,利用MEGA 5.0软件对相关数据分析,构建邻接(NJ)系统聚类树进行鉴定分析。结果表明升麻药材的3个基原物种:大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia、升麻C.foetida、兴安升麻C.dahurica,其ITS2序列长度分别为217,219,219 bp,3个基原物种ITS2序列与混伪品的种间平均K2P距离大于其种内平均K2P距离,ITS2系统发育树显示,升麻的3个基原物种均各自聚为一单系分支,并与其他混伪品明显分开。ITS2序列能够有效准确地鉴别中药材升麻及其混伪品。 任伟超 马孝熙 于俊林 马伟 孙伟关键词:DNA条形码 ITS2 升麻 蒲黄、松花粉等花粉类药材及其混伪品的DNA条形码鉴定 被引量:9 2014年 目前市场上花粉类药材品种较多,由于在外观形态均呈粉末状,很难区分,加之市场价格较高等因素,故混用和掺伪的情况时有发生,因此花粉类药材的准确鉴定对公众的用药安全显得尤为重要。该研究采用DNA条形码技术,对蒲黄、松花粉及其混伪品的基原植物及药材共60份样本进行研究。通过primer premier 6.0设计出蒲黄ITS2特异性引物PhF-R,其扩增效率高达100%,实验结果表明蒲黄药材的ITS2序列长度为234-249 bp,种内K2P平均距离与同属种间K2P平均距离十分接近,但远小于其与混伪品的种间K2P平均距离;松花粉药材的ITS2序列长度均为247 bp,ITS2序列种内平均K2P遗传距离远小于其与混伪品种间平均K2P距离。利用ITS2序列构建的邻接(NJ)树表明蒲黄、松花粉及其混伪品可明显区分,并呈现出良好的单系性。因此,DNA条形码可对该实验材料准确鉴定,有助于花粉类药材的监管及市场流通。 马孝熙 孙伟 任伟超 向丽 赵博 张雅琴 宋明 慕泽泾 陈士林关键词:ITS2 松花粉 DNA条形码 蕨类药材石韦及其混伪品的psbA-trnH序列鉴定 被引量:13 2014年 为考察psbA-trnH序列鉴定蕨类药材的可行性,该研究以蕨类药材石韦及其混伪品作为研究对象,对其106份样品提取基因组DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其叶绿体psbA-trnH序列,并采用Mega6.0软件进行多序列比对,计算种内及种间K2P遗传距离,采用最大似然法(ML)构建系统聚类树。结果表明:石韦药材3个基原植物的psbA-trnH序列种内最大遗传距离均小于其与混伪品的种间最小遗传距离;ML树显示石韦药材可与其混伪品明显分开;psbA-trnH序列可作为蕨类药材的DNA条形码,能准确、稳定鉴定蕨类药材石韦及其混伪品。 张雅琴 石钺 宋明 林韵涵 马孝熙 孙伟 向丽 刘霞关键词:DNA条形码 混伪品 蕨类