韩卿
- 作品数：7 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院放射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 慢性粒细胞白血病的细胞凋亡分子机制及临床治疗研究进展被引量：1
- 2005年
- 慢性粒细胞白血病(CML)以染色体移位形成BCR／ABL融合基因为标志,编码的融合蛋白 P210BCR／ABL具有较强的蛋白酪氨酸激酶活性,可激活Ras-Raf-MAPK、STAT-Bcl-XL、PI3K-AKT、 NFκB等多条信号转导途径,直接或间接作用于细胞凋亡的开关——线粒体,使BCR／ABL阳性细胞耐受凋亡,导致肿瘤疾病发生。因此诱导凋亡是目前临床治疗慢性粒细胞白血病的重要方法之一,本文就慢性粒细胞白血病的细胞凋亡分子机制,以及在此基础上临床新近发展的一些治疗策略作一简述。
- 韩卿蒋纪恺
- 关键词：慢性粒细胞白血病线粒体临床治疗研究BCR/ABL信号转导途径染色体移位
- 高表达JNK3促进表阿霉素诱导的细胞凋亡
- 2008年
- 目的:构建人c-Jun氨基末端激酶3(JNK3)真核表达载体,转染HEK293细胞,建立稳定表达细胞系;以表阿霉素作为凋亡诱导剂研究JNK3与细胞凋亡关系.方法:以pD-BLeu-JNK3质粒为模板PCR扩增人JNK3基因全长,DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His B,经PCR和酶切鉴定,DNA测序正确,脂质体转染法转染HEK293细胞,通过G418选择培养,建立稳定表达细胞系.RT-PCR,Western Blot检测携带Myc标签的JNK3融合蛋白的表达,流式检测表阿霉素对稳定表达JNK3基因的HEK293细胞的促凋亡作用.结果:成功构建了pcDNA3.1-JNK3真核表达载体并已稳定转入HEK293细胞,建立了稳定表达细胞系,成功地表达目的基因;与对照细胞相比表阿霉素能明显促进高表达JNK3基因的HEK293细胞发生细胞凋亡.结论:JNK3稳定表达细胞系的建立和高表达JNK3促进表阿霉素诱导的细胞凋亡,为进一步研究JNK3的功能提供了良好的实验基础.
- 韩卿宋方洲易发平卜友泉李长燕杨晓明
- 关键词：真核表达载体转染基因表达细胞凋亡
- JNK3通过与RelA/p65相互作用抑制NF-κB信号通路减弱Bel-7402细胞的黏附能力(英文)被引量：1
- 2012年
- JNK信号通路在细胞的炎症、增殖与凋亡等生物学过程中发挥了重要的作用.我们采用酵母双杂交技术发现转录因子p65是JNK3的相互作用蛋白质.体内体外实验均证实JNK3与p65存在蛋白质相互作用.报告基因实验结果表明过表达JNK3抑制TNFα诱导NF-κB介导的转录激活.EMSA结果证明JNK3减弱NF-κB的DNA结合能力.实时定量PCR结果表明JNF3减少NF-κB靶基因的表达.综上所述,我们的研究结果表明JNK3做为一个调节分子在体内发挥了抑制p65转录活性的功能.
- 李强韩卿虞东辉唐留军王建王晓辉许望翔詹轶群李长燕葛常辉于淼杨晓明
- 关键词：NF-ΚBP65细胞黏附蛋白质相互作用
- JNK3重组腺病毒促进表柔比星诱导的人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡被引量：1
- 2008年
- 目的:构建人JNK3基因重组腺病毒,检测其对人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖的影响;以表柔比星作为凋亡诱导剂,检测其对细胞凋亡的影响。方法:以pDBLeu-JNK3质粒为模板PCR扩增人JNK3基因全长,构建重组穿梭载体pAdTrack-CMV-JNK3,线性化后与骨架载体pAdEasy-1在细菌BJ5183内同源重组,在HEK293细胞中进行病毒包装和扩增,经PCR方法鉴定后,用包装后的病毒上清感染人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞,Western印迹方法检测JNK3蛋白的表达;MTT实验检测其对细胞增殖的影响;流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳检测表柔比星诱导的细胞凋亡情况。结果:核酸测序和PCR鉴定表明成功构建Ad-JNK3,终点稀释试验测定扩增的腺病毒滴度为6.5×1010pfu/ml;Ad-JNK3在SH-SY5Y细胞中表达JNK3蛋白;MTT检测结果表明Ad-JNK3可抑制SH-SY5Y细胞生长,抑制率为28.08%;流式细胞术结果表明Ad-JNK3可明显促进表柔比星诱导的细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳可观察到DNA梯形条带。结论:重组腺病毒Ad-JNK3能显著抑制SH-SY5Y细胞增殖,促进表柔比星诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,为研究JNK3的作用机制及将其用于人成神经细胞瘤的基因治疗提供了条件。
- 韩卿宋方洲易发平卜友泉王治东李长燕杨晓明
- 关键词：JNK丝裂原活化蛋白激酶类重组腺病毒表柔比星细胞凋亡
- JNK3抑制NF-κB转录活性的研究被引量：2
- 2008年
- 目的研究人c-Jun氨基末端激酶3(c-Jun N-terminal kinases3,JNK3)对核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)转录活性的影响。方法构建人JNK3真核表达载体pcDNA3.1-JNK3,与3×κB-luc报告基因质粒共转染人胚胎肾细胞293(HEK293),分别进行如下处理:共转染50ngpCMV-Myc-p65质粒;转染24h后,加入浓度为10ng/ml的TNF-α或IL-1β刺激6h,收集细胞,检测荧光素酶活性。结果成功构建了pcDNA3.1-JNK3真核表达载体;提高细胞内p65水平,加入TNF-α或IL-1β刺激均可明显激活NF-κB的转录,JNK3对NF-κB的转录活性有明显抑制作用,且随着JNK3转染剂量的增加,抑制作用增强。结论JNK3能明显抑制NF-κB的转录活性。
- 韩卿宋方洲易发平卜友泉李长燕杨晓明
- 关键词：核因子ΚB荧光素酶报告基因转录活性
- 稳定表达人JNK3的SHSY5Y细胞系的建立及鉴定
- 2009年
- 目的构建人c-jun氨基末端激酶3（c-jun N—terminal kinase 3，JNK3）真核表达载体，并在人神经母细胞瘤细胞（SHSY5Y）中稳定表达以探讨JNK3对细胞凋亡的影响。方法以pDBleu—JNK3为模板，PCR扩增人JNK3基因全长，目的片段亚克隆至真核表达载体pEGFP—C3，酶切及测序鉴定。Lipofeetamine^TM 2000转染SHSY5Y细胞，并通过G418选择性培养建立稳定表达JNK3的SHSY5Y细胞系，荧光垃微镜下观察细胞中JNK3表达，RT—PCR、Western印迹检测JNK3表达。结果成功构建了pEGFP—C3-JNK3真核表达载体，并建立了稳定表达人JNK3的SHSY5Y细胞系，与对照组相比，其人JNK3基因表达明显升高。结论稳定表达人JNK3的SHSY5Y细胞系的建立，为进一步研究人JNK3的功能及其与细胞凋亡的关系提供了重要的细胞模型和实验基础。
- 秦琴韩卿张琴卜友泉易发平宋方洲
- 关键词：细胞凋亡
- JNK3与p65相互作用的分子机制及其功能研究
- 本课题是在用高通量酵母双杂交技术筛选诱饵蛋白c-Jun氨基末端激酶3(c-Jun N-terminal kinases 3，JNK3)在人肝脏eDNA文库相互作用蛋白结果上的深入研究，p65是筛选到的JNK3的猎物之一。...
- 韩卿
- 关键词：神经细胞凋亡C-JUN氨基末端激酶丝裂原活化蛋白激酶分子机制核因子ΚB
