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基于网络药理学构建中药复方改善加速性动脉粥样硬化的作用研究被引量：7: 2019年; 目的将网络药理学和传统中医理论结合构建出改善慢性肾衰竭加速性动脉粥样硬化的新型中药复方——益肾降脂方,并探讨其治疗效果。方法从中药网络药理学数据库TCMSP中获取中药、成分和靶点等相关信息,使用Cytoscape软件从中筛选出可以作用于慢性肾衰竭加速性动脉粥样硬化相关靶点的中药,然后根据中医辨证理论和组方原则进一步筛选并构建复方。最后通过动物实验观察益肾降脂方对动脉粥样硬化的作用,检测血脂、组织形态学及血清生化指标水平的变化。结果确认益肾降脂方组成成分为杜仲、淫羊藿、丹参、沙棘和甘草,动物实验结果表明益肾降脂方能降低血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和单核趋化蛋白-1(MCP-1)的水平,提高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平,并且可以显著减少动脉粥样硬化斑块的形成,部分恢复肾功能,对肝功能指标没有影响。结论运用网络药理学和传统中医理论构建的益肾降脂方具有改善慢性肾衰竭加速性动脉粥样硬化的作用。; 马韵词陈凯田楠楠杨丹妮全东令管怡晴吴少瑜郭志坚; 关键词：动脉粥样硬化网络药理学中药复方

晚期糖基化终产物通过其受体促进内皮细胞分泌IL-8的研究被引量：5: 2008年; 探讨晚期糖基化终产物(AGE)修饰蛋白对内皮细胞生成白介素8(IL-8)的作用,及晚期糖基化终产物受体(RAGE)在此病理过程中的作用.内皮细胞来自培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC).将内皮细胞与不同浓度的AGE修饰人血清白蛋白(AGE-HSA)在体外共同培养,或以可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)对AGE-HSA进行预处理后再与HUVEC共同培养.用蛋白质液相芯片法检测HUVEC培养上清中IL-8水平,并提取细胞RNA,进行RT-PCR反应,检测细胞中IL-8mRNA的表达水平.结果表明,AGE-HSA以时间和剂量依赖的方式刺激HUVEC生成IL-8,未经修饰的HSA无此作用.AGE-HSA用sRAGE预处理后,刺激HUVEC生成IL-8的作用被抑制,并且此抑制作用呈剂量依赖的方式.AGE-HSA刺激HUVEC使IL-8mRNA表达增高,未经修饰的HSA无此作用.sRAGE能够阻断AGE-HSA诱导HUVEC表达IL-8mRNA的作用.整个变化趋势与蛋白质水平一致.研究首次证实,AGE-HSA与细胞表面受体RAGE相互作用可刺激内皮细胞分泌IL-8,并上调IL-8mRNA的表达.这为研究加速型血管病变的发病机制提供了新视角,也为治疗由AGE增多和潴留所引起的病理损害提供了新靶点.; 赵善超刘靖华宋先璐郭志坚邓鹏刘志强张训侯凡凡姜勇; 关键词：晚期糖基化终产物受体内皮细胞白介素-8

一种单核细胞渗出模型的建立及其在内皮细胞通透性检测中的应用被引量：1: 2011年; 目的建立一种单核细胞渗出模型并探讨其作为内皮细胞通透性检测模型的可行性。方法将培养的人脐静脉内皮细胞与浓度为100μg／ml晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白分别共同培养2、4、6、8、12h，同样浓度的人血清白蛋白加入人脐静脉内皮细胞作为对照组，然后采用Transewell模型，利用5一氯甲基二乙酸荧光素标记的人白血病单核细胞渗出数量反映内皮细胞的通透性。结果与对照组相比，晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白以时间依赖的方式增加白血病单核细胞渗出的数量，且在刺激8h组白血病单核细胞渗出的数量达高峰（P〈0．05）。结论用5一氯甲基二乙酸荧光素标记的白血病单核细胞建立的单核细胞渗出模型为体外研究内皮细胞通透性提供了一种简便、可行的方法。; 张瑛郭志坚胡丽莉; 关键词：内皮细胞单核细胞白血病

西藏胡黄连醇提物对动脉粥样硬化小鼠主动脉PPARγ和PON1表达的影响: 2019年; 目的观察西藏胡黄连醇提物(ethanol extraction of Picrorhiza scrophulariiflora,EPS)对apoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的干预机制。方法将30只apoE^(-/-)小鼠随机分为对照组,模型组,EPS低、中、高剂量组和辛伐他汀组,每组5只。分别给予相应药物灌胃,对照组和模型组给予等体积的蒸馏水,连续灌胃12周。超声和病理切片观察各组主动脉中的斑块形成情况,试剂盒检测血清生化指标,蛋白免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链式反应检测PPARγ和PON1的表达。结果与模型组比较,EPS和辛伐他汀组可以显著减少动脉粥样硬化斑块的形成,降低血清TC,LDL-C,TNF-α,IL-6,MCP-1,MDA水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001),显著升高GSH-Px,SOD活性(P<0.01,P<0.001),增加主动脉中PPARγ和PON1的表达显(P<0.001)。结论西藏胡黄连具有改善动脉粥样硬化的功能,其机制可能与上调动脉壁中PPARγ和PON1的表达有关。; 马韵词陈凯田楠楠党文振杨丹妮吴少瑜郭志坚; 关键词：西藏胡黄连动脉粥样硬化过氧化物酶体增殖物活化受体Γ 对氧磷酶1

晚期糖基化终产物诱导人近端肾小管上皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1表达上调并活化NADPH氧化酶被引量：3: 2009年; 目的:研究晚期糖基化终产物(AGES)修饰蛋白诱导人近端肾小管上皮HK-2细胞分泌纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响及其相关的氧化应激传导途径。方法:采用不同浓度AGES修饰的人血清白蛋白(AGES-HSA)与肾小管上皮HK-2细胞共培养。用光泽精化学发光法检测细胞匀浆中NADPH氧化酶活性,ELISA检测细胞上清液中PAI-1蛋白分泌,RT-PCR法检测PAI-1mRNA表达。结果:AGES-HSA诱导HK-2细胞NADPH氧化酶活化,并以时间、剂量依赖方式上调PAI-1蛋白和mRNA的表达。运用NADPH氧化酶抑制剂DPI、apocynin、氧自由基清除剂SOD可以明显阻断AG-ES-HSA诱导的PAI-1表达。结论:AGES-HSA可通过NADPH氧化酶依赖的氧化应激途径上调肾小管上皮细胞PAI-1表达。; 傅碧玲郭志坚田建伟刘志强曹维; 关键词：晚期糖基化终产物肾小管上皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1 NADPH氧化酶

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郭志坚