童桂香
- 作品数:33 被引量:191H指数:10
- 供职机构:广西大学更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区科技攻关计划广西壮族自治区直属公益性基本科研项目广西留学回国人员基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 香港巨牡蛎ISSR-PCR反应体系的建立及优化被引量:1
- 2011年
- 以香港巨牡蛎(Crassostrea hongkongensis)基因组DNA为模板,采用正交设计及单因素比较试验,分别对Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶和DNA模板浓度的PCR原料进行优化,并通过温度梯度PCR,筛选适宜的退火温度。确立了香港巨牡蛎的最适ISSR-PCR反应体系:25μL反应体系中含PCR 1×Buffer,2.5 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、0.2μmol/L引物、1.2 U Taq DNA聚合酶、20 ng DNA模板。反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,48~54℃(随引物而确定)退火1 min,72℃延伸1.5 min,35个循环;72℃延伸10 min。利用所建立的ISSR-PCR反应体系对香港巨牡蛎基因组DNA进行扩增,获得了清晰、重复性好、多态性高的DNA谱带,为进一步利用ISSR分子标记研究香港巨牡蛎的遗传多样性奠定了基础。
- 黎小正童桂香韦信贤吴祥庆陈康
- 贝类污染腹泻性贝类毒素的调查研究被引量:2
- 2010年
- 介绍了对腹泻性贝类毒素(DSP)的检测方法、判断标准和近年来对国内产区贝类污染DSP的检测情况。结论:腹泻性贝类毒素在国内贝类产区分布广、检出率高,但在地域上存在着差异,可能与DSP的产生机理以及不同贝类品种对DSP的耐受能力有关。提出预防贝类污染DSP和预防人体DSP中毒的措施,为贝类的生产和管理提供理论依据。
- 黄玉柳黎小正吴祥庆庞燕飞韦信贤黄国秋童桂香
- 关键词:贝类
- 黄沙鳖温和气单胞菌的分离鉴定及药敏试验被引量:22
- 2010年
- 从患病黄沙鳖的肝脏组织中分离到一株菌株(NN090617),经人工感染试验证实其具有较强的致病性。对分离菌进行了形态特征、理化特性鉴定,该菌的形态和生理生化表现为:革兰氏阴性、两端钝圆的杆菌,葡萄糖产酸,氧化酶、触酶、V-P阳性,鸟氨酸脱羧酶、脲酶、七叶苷阴性。采用BioFosun微生物鉴定系统对该菌进行鉴定,将适当浊度的细菌悬液接种GN48板条培养16~24 h后读出结果,将结果输入BioFosun-Ⅰ软件分析鉴定为温和气单胞菌(Aeromonas sobria),概率达99%,相似指数和距离指数分别为0.858、2.000,鉴定结果良好,结合形态和生理生化特点将其鉴定为温和气单胞菌。纸片琼脂扩散法药敏试验结果表明,该菌对供试的15种抗菌药物中的头孢拉定、头孢哌酮、氧氟沙星等6种药物敏感,对苯唑青霉素、庆大霉素、克拉霉素等9种药物均存在不同程度的耐药性。
- 童桂香韦信贤黎小正吴祥庆叶欣宇
- 关键词:黄沙鳖温和气单胞菌药敏试验
- 鸡传染性贫血病毒荧光定量PCR检测方法的建立被引量:8
- 2009年
- 根据鸡传染性贫血病毒基因组保守区域设计1对扩增片段为164 bp的特异性引物,应用SYBR GreenⅠ染料建立了鸡传染性贫血病毒(CIAV)荧光定量PCR检测方法。以本室构建的阳性重组质粒作为模板,制定标准曲线,对CIAV阳性样品进行了敏感性、特异性和重复性、稳定性试验,并应用于临床检测。结果表明引物最佳终浓度为0.2μmol/L,制作的标准曲线定量浓度范围宽,最低可检测到每个反应相当于10个拷贝的标准品DNA;与IBDV、ARV、MG都不反应;重复性、稳定性试验的变异系数都较小。对保存的25份疑似CIAV样品进行荧光定量PCR检测,结果检出9份阳性。本研究建立的荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床上鸡感染CIAV的检测。
- 童桂香谢芝勋刘加波庞耀珊邓显文谢志勤谢丽基
- 关键词:鸡传染性贫血病毒SYBR
- 四重PCR检测致病性嗜水气单胞菌被引量:4
- 2013年
- 目的建立一种能够快速准确地检测致病性嗜水气单胞菌的四重PCR方法。方法根据致病性嗜水气单胞菌的丝氨酸蛋白酶(ahpA)基因、气溶素(aerA)基因和溶血素(hlyA)基因的保守序列以及嗜水气单胞菌的16SrRNA基因种属特异性序列分别设计4对特异性引物,通过优化各引物浓度、退火温度和Mg2+浓度,确定了四重PCR的最佳反应条件;然后进行特异性和敏感性试验,并比较其与常规微生物学方法对不同菌株和临床样本的检出率。结果该方法特异性好,能特异性检测并鉴别出嗜水气单胞菌致病性菌株;检测灵敏度高,最低可检测到约100fg的嗜水气单胞菌基因组DNA;对9株嗜水气单胞菌的检测结果与常规微生物学方法一致,对56份送检的水产动物样品的检出率为21.4%,高于常规微生物学方法的16.1%,两者检测结果符合率为94.6%。结论成功建立了能同时检测嗜水气单胞菌16SrRNA、aerA、ahpA和hlyA基因的四重PCR方法,能快速、准确地对嗜水气单胞菌进行检测并区分致病性与非致病性菌株。
- 韦信贤杨先乐童桂香吴祥庆谢宗升黄国秋廖永志叶欣宇黎小正
- 关键词:嗜水气单胞菌RRNA基因
- 禽呼肠孤病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立
- 禽呼肠孤病毒(ARV)感染在世界范围内存在,感染鸡临床症状表现为关节炎,腱鞘炎,慢性呼吸道疾病,吸收障碍综合征(MAS),心包炎,心肌炎,免疫抑制,导致感染鸡生长缓慢和饲料转化率降低,给养禽业造成巨大经济损失。为建立检测...
- 谢芝勋童桂香谢丽基刘加波唐小飞邓显文庞耀珊谢志勤
- 关键词:禽呼肠孤病毒
- 文献传递
- TaqMan-MGB探针法快速检测对虾Taura综合征病毒的研究被引量:1
- 2011年
- 为建立Taura综合征病毒(Taura syndrome virus,简称TSV)的TaqMan-MGB探针荧光定量RT-PC方法,根据TSV衣壳蛋白基因保守序列设计引物和TaqMan-MGB探针,扩增产物长度为118bp。将PCR产物克隆到pGM-T载体,重组质粒经筛选鉴定、SalⅠ单酶切,得到线性化转录模板DNA,经体外转录获得标准品RNA。以体外转录的RNA作为模板,进行一步法荧光定量RT-PCR反应,根据RNA模板拷贝数与Ct(Cycle threshold,Ct)值制备了标准曲线,制作的标准曲线在2×101拷贝/μL≤TSV RNA≤2×107拷贝/μL的范围内具良好的线性关系,可以用于TSV的定量分析,检测灵敏度为20个拷贝数。特异性、重复性试验结果表明,该方法对SPF对虾组织RNA没有扩增反应,表现出良好的特异性;组内和组间实验变异系数分别为0.32%~1.84%和0.79%~2.71%。利用TaqMan-MGB探针建立检测TSV的一步法荧光定量RT-PCR方法可用于对虾TSV的检测。
- 韦信贤童桂香谢宗升黎小正吴祥庆廖永志黄国秋
- 关键词:TSVTAQMAN-MGB探针RT-PCR
- 北部湾近江牡蛎地理标志产品标准化及产业化技术研究和应用示范
- 黎小正韦信贤吴祥庆庞燕飞黄玉柳廖永志黄鸾玉童桂香秦振发吴明媛陈静谢宗升
- 项目所属科学技术领域为水产(养殖)学、分子生物学领域。主要技术内容1、针对近江牡蛎的随机扩增多态DNA(RAPD)、微卫星标记(ISSR-PCR)及同工酶电泳分析。2、研究分析钦州湾近江牡蛎区分于其他地区近江牡蛎的相关分...
- 关键词:
- 关键词:牡蛎分子生物学水产养殖
- 鱼类寄生虫病的检测与诊断程序及其应用被引量:1
- 2010年
- 借鉴GB18448-2001和GB14922.1-2001,参考国内外实验动物寄生虫学质量控制的有关文献资料,结合实际检测中积累的大量实验数据和相关经验,对鱼类寄生虫病的检测和诊断技术进行了整理归纳,总结出科学合理、操作性强,检出率高的检测及诊断程序,为防治和控制鱼类寄生虫病提供科学依据。
- 黄玉柳黎小正吴祥庆庞燕飞黄国秋韦信贤童桂香
- 关键词:鱼类寄生虫病
- 一种蛋鸡养殖场粪便清理装置
- 本实用新型公开了一种蛋鸡养殖场粪便清理装置,包括粪便清理机器人、养殖线、粪道、养殖房和粪便处理装置;所述养殖房的养殖腔内的地面设置有曲折状所述粪道;所述养殖线沿粪道的曲折线分布,且养殖线架设在粪道正上方,所述养殖线下方的...
- 韦平韦信贤童桂香
- 文献传递