田孝祥
- 作品数：122 被引量：114H指数：6
- 供职机构：沈阳军区总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划辽宁省自然科学基金更多>>
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- 过表达CREG抑制ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖
- 2015年
- 目的:探讨E1A激活基因阻遏子(Cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG)在氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)引起的人血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖中的作用及可能机制。方法:用60μg/m L ox-LDL处理人胸主动脉VSMC,在不同时间点(0 h,12 h,24 h,48 h)计数细胞并绘制生长曲线;在48 h时间点进行Brd U染色检测增殖细胞的比率;采用Western Blot检测各时间点CREG表达。通过向VSMC中转染携带CREG基因的质粒载体,筛选获得过表达CREG的VSMC(VSMCCREG)。进一步用ox-LDL处理VSMCCREG,采用前述方法绘制生长曲线、进行48 h时间点Brd U染色并检测CREG和磷酸化Erk1/2的表达。结果:与未经处理的对照组VSMC相比,ox-LDL处理的VMSC细胞总数及Brd U阳性细胞比率显著增加;并且,CREG表达随处理时间延长逐渐降低。此外,与ox-LDL处理的VSMC组相比,ox-LDL处理的VSMCCREG组细胞总数及Brd U阳性细胞比率均显著下降;并且CREG表达增加、磷酸化Erk1/2水平下降。结论:过表达CREG可能通过降低Erk1/2磷酸化抑制ox-LDL诱导的人VSMC增殖。
- 杨桂棠韩雅玲闫承慧田孝祥李洋
- 关键词：血管平滑肌细胞增殖动脉粥样硬化
- CREG修饰的胚胎干细胞移植改善小鼠心肌梗死后心功能
- 张剑闫承慧田孝祥韩雅玲
- 神经生长因子对体外培养的小鼠主动脉环血管新生的影响及TrkA的关键作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨神经生长因子(NGF)对体外培养的小鼠主动脉环血管新生的影响。方法①将小鼠主动脉环在三维基质胶中以含不同浓度的NGF的无血清培养基培养不同天数后,对出芽的细胞进行免疫荧光染色细胞学鉴定,或在倒置显微镜下观察、摄像,并以ImagePro图像分析软件计算每高倍视野中平均出芽的面积。②向培养基中预先加入抗NGF的中和抗体或血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)拮抗剂SU5416,观察NGF或VEGF对出芽性血管新生的影响。③向培养基中预先加入酪氨酸受体激酶A(TrkA)受体拮抗剂K252a,观察NGF是否可通过TrkA受体促血管新生。结果①外源性NGF呈浓度依赖性促进基质胶中培养的小鼠主动脉环出芽。出芽的细胞上CD31的表达阳性。抗NGF的中和抗体能明显阻断NGF诱导的出芽性血管的新生。②SU5416可显著减少VEGF诱导的血管新生;但对NGF诱导的血管新生无明显影响。③K252a可明显抑制NGF诱导的血管新生。结论NGF可通过TrkA受体促进小鼠主动脉环血管新生,为促血管新生治疗方案的选择提供了新的思路。
- 齐岩梅韩雅玲康建李娜田孝祥闫承慧
- 关键词：神经生长因子主动脉环血管新生小鼠
- 人参皂苷Rg1抑制大鼠急性心肌梗死后心肌纤维化被引量：14
- 2017年
- 目的:观察人参皂苷Rg1对大鼠心肌梗死后心脏纤维化发生的影响。方法:通过结扎SD大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌梗死模型,并将40只雄性SD大鼠随机分单纯手术组与人参皂苷Rg1治疗组。治疗组的大鼠造模1 h后将预先配成药液的人参皂甙Rgl按5 rag/(kg·d)剂量腹腔注射,1/日至处死当日。对照组则腹腔注射等量生理盐水1/日至处死当日。分别于手术后1、2周时对比两组大鼠的基本生命指标,后通过马松染色对比观察各组大鼠心脏细胞形态特征以及瘢痕形成情况。结果:(1)无论是手术后1周还是2周,两组大鼠的体重、心脏重量、心重/体重、鼠尾收缩压、心率比较均没有统计学意义(P>0.05);(2)无论是手术后1周后还是2周后,人参皂苷Rg1治疗组心脏瘢痕形成要明显少于对照组。结论:人参皂苷Rg1能够有效抑制大鼠急性心肌梗后心脏纤维化的发生。
- 彭程飞李佳田孝祥刘丹李洋
- 关键词：人参皂苷RG1急性心肌梗死心肌纤维化
- CREG促进胚胎干细胞来源的卵黄囊形成及血管新生
- 血管新生是形成新生血管的关键步骤，它不仅参与生理情况下的胚胎发生,而且与缺血性心脏病、卒中以及恶性肿瘤等多种疾病的发生发展密切相关。全面理解其调控机制及分子基础对未来发展新的治疗上述疾病的方法至关重要。前期的系列研究已经...
- 田孝祥张娜韩雅玲康建李少华闫承慧
- 关键词：血管新生平滑肌细胞缺血性心脏病胚胎干细胞
- CREG蛋白用于预防或治疗体重超重、肥胖及其相关疾病的医药用途
- 本发明涉及E1A激活基因阻遏子(CREG)蛋白的用途，具体涉及CREG蛋白或其活性片段在制备用于预防和/或治疗超重、肥胖、胰岛素抵抗、高脂血症及其相关疾病的药物中的用途。本发明还涉及表达CREG蛋白或其活性片段的重组载体...
- 韩雅玲田孝祥闫承慧张权宇张效林刘丹
- 文献传递
- E1A激活基因阻遏子基因过表达改善小鼠心肌梗死后心脏功能
- 目的:我们的系列研究发现,CREG可促进损伤血管内皮细胞的快速修复、维持血管平滑肌细胞分化稳态及存活,并抑制间充质干细胞在缺氧和低糖状态下的凋亡.还观察到,腺病毒介导的CREG基因转染以及外源重组CREG蛋白干预均可增强...
- 张剑田孝祥闫承慧张效林康建韩雅玲
- 成年SD大鼠心肌原代成纤维细胞分离及培养的优化方案被引量：6
- 2016年
- 目的:摸索及优选成年SD大鼠心肌原代成纤维细胞的体外分离、培养及鉴定的实验方法。方法:将成年SD大鼠心脏剪成小组织块,采用以下四种方案(A:0.08%胰酶+0.1%胶原酶II消化15 min,B:0.2%胶原酶II消化15 min,C:0.2%胶原酶II消化60min,D:0.2%胶原酶II消化90 min)提取成年大鼠心脏原代成纤维细胞,再通过差速贴壁分离方法培养原代成纤维细胞。采用倒置显微镜观察成纤维细胞的基本形态特征,并进行Vimentiin免疫荧光染色对培养的原代细胞进行荧光鉴定;采用台盼兰染色对培养的原代成纤维细胞存活率进行鉴定;采用细胞计数对培养的成纤维细胞生长趋势进行鉴定。结果:四种方法均能培养成纤维细胞,但单酶消化60 min可一次性提取较多细胞,并且细胞状态佳,3 d即可传代。72 h成纤维细胞Vimentin免疫荧光染色阳性率高达97%。台盼兰染色可见其细胞死亡率明显降低,并且细胞计数可见细胞生长状态极佳。结论:单酶消化60 min是提取成年SD大鼠心肌原代成纤维细胞的高效、快速、稳定的实验方法,为心脏疾病的基础及临床研究提供了较为理想的细胞学实验模型。
- 刘美丽刘丹刘艳霞田孝祥闫承慧
- 关键词：成年SD大鼠原代培养
- E1A激活基因阻遏子基因过表达改善小鼠心肌梗死后心脏功能
- 张剑田孝祥闫承慧张效林康建韩雅玲
- MicroRNA-495对人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的影响
- 2018年
- 目的:探讨MicroRNA-495(miR495)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的影响。方法:体外分离培养HUVECs,将HUVECs铺至6孔板中,待细胞融合至80%时,将miR495模拟物(miR495 mimics)、miR495抑制剂(miR495 inhibitor)及其相应的对照negative control(NC)、inhibitor NC分别转染到6孔板的HUVECs中,于转染后不同时间点(12 h、24 h和48 h)收集细胞进行RNA及蛋白提取。荧光定量PCR方法检测HUVECs中miR495及ICAM-1基因mRNA表达。Western blotting检测HUVECs中ICAM-1蛋白表达。结果:(1)与NC相比较,miR495 mimics组中miR495水平显著升高;与inhibitor NC组比较,miR495 inhibitor组中miR495表达明显下降。(2)与NC组比,miR495 mimics组明显降低HUVECs中ICAM-1的mRNA及蛋白表达;与inhibitor NC组比,而miR495 inhibitor组能显著增加HUVECs中ICAM-1的m RNA及蛋白表达。结论:MiR495能降低HUVECs中ICAM-1基因mRNA和蛋白表达。
- 刘丹刘美丽刘艳霞田孝祥齐艳萍
- 关键词：人脐静脉内皮细胞细胞间粘附分子-1动脉粥样硬化
