目的:建立一种荧光定量PCR方法用于血浆循环DNA定量,并讨论血浆循环DNA检测在乳腺癌诊断及预后中的意义。方法:以61例乳腺癌患者、33例乳腺良性病变患者和25例健康对照者血浆为材料,用Qiagen纯化柱提取血浆DNA,采用荧光定量PCR技术(SYBR Green I染料法)对血浆DNA水平进行检测,DNA水平用临界域值时的循环数(Ct值)表示,并应用ROC曲线分析血浆循环DNA定量在乳腺癌诊断中的价值。结果:乳腺癌血浆循环DNA水平(27.71±1.41)显著高于健康对照(30.37±1.32)和良性对照(29.7±1.12)(P<0.001),ROC曲线下面积分别为0.921和0.837。循环DNA水平与分期、淋巴结转移、肿瘤大小、年龄及雌激素受体状况均无相关性(P>0.05)。术后乳腺癌患者血浆循环DNA水平显著下降,其中复发患者血浆循环DNA水平显著高于未复发者。结论:血浆循环DNA水平对于乳腺癌诊断和预后均具有一定临床意义。
目的建立一种实时荧光定量PCR方法,并用该方法检测乳腺癌患者血浆循环DNA水平。方法用QIAamp血液DNA抽提试剂盒提取61例乳腺癌患者和25例健康妇女血浆循环DNA,用实时荧光定量PCR技术(SYBR Green I染料法)进行定量,结果用设定临界域值时的循环数的值(Ct值)表示,并对定量结果进行ROC曲线分析。结果:乳腺癌患者Ct值(27.71±1.41)显著低于健康对照(30.37±1.32,P<0.001),说明乳腺癌患者血浆循环DNA水平显著高于健康对照组;ROC曲线下面积为0.921。结论应用实时PCR技术检测乳腺癌患者血浆循环DNA水平有可能成为一种无创性乳腺癌分子诊断方法。
