李微
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：东北农业大学园艺学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Error-prone PCR致哈茨木霉几丁质酶突变的条件优化被引量：2
- 2013年
- 运用Error-prone PCR对哈茨木霉几丁质酶基因(Chit42)进行人工突变。在常规PCR基础上,通过提高体系中Mg2+浓度,适当加入一定浓度Mn2+,调节四种dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dGTP)浓度,得到产生明显突变效果的试验条件。在Error-prone PCR中,使用5.0 mmol·L-1Mg2+,0.5 mmol·L-1Mn2+,0.04 mmol·L-1dATP和dGTP,1.5 mmol·L-1dTTP和dCTP进行扩增后,随机挑选10个克隆测序,累积13 370个碱基,检测到57个突变,平均突变率为0.4%。为产生优良突变株、酶分子定向进化奠定基础。
- 王傲雪李微陈秀玲李景富
- 关键词：PCR突变
