唐志娇
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：长沙理工大学化学与生物工程学院更多>>
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- 以荧光高分子为相分离载体和指示物的免疫分析新方法
- 2011年
- 以6-甲氧基-β-(5-乙烯基-2-奎宁环基)-4-喹啉甲醇(奎尼丁,Qd)为单体合成了一种pH敏感荧光高分子聚N-异丙基丙烯酰胺(NIP)-奎尼丁-N,N,-二甲基氨丙基甲基丙烯酰胺(DMAPM)[P(NIP-DMAPM-Qd)]。采用共聚法将布氏杆菌抗原(BrAg)与P(NIP-DMAPM-Qd)连接,制备了P(NIP-DMAPM-Qd)-BrAg连接物。加入待测布氏杆菌抗体(BrAb),免疫反应后,调节至pH7.6,使高分子相变,从而将体系中的免疫反应复合物P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)-BrAb和未反应连接物P(NIP-DMAPM-Qd)-BrAg与非特异性组分以及未反应的待测BrAb分离.利用蛋白A对抗体的亲和性,捕获P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)-BrAb,从而将其与P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)分开,通过测定P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)-BrAb的荧光来定量BrAb。该方法通过高分子相变分离和蛋白A捕获双重分离作用,基本消除了非特异性组分以及未反应的特异性免疫成分等的干扰;以高分子自身荧光为检测信号源,无须另外的标记物,大大提高了免疫分析的灵敏度和简便性。以布氏杆菌抗体(BrAb)为检测对象,测得线性范围为0～168ng/L,抗体检出限为1.2ng/L,结果令人满意。
- 龚福春唐志娇林尤宜曹忠谭淑珍
