周兴军
- 作品数：20 被引量：17H指数：3
- 供职机构：华北制药集团新药研究开发有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 一种检测CHO培养细胞中支原体污染的试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种检测CHO培养细胞中支原体污染的试剂盒及其检测方法，属于生物技术检测领域。该试剂盒包括置于同一PCR体系中的特异性扩增CHO细胞甘油醛-3-磷酸脱氢酶DNA序列的引物对与特异性扩增支原体16srRNA保守区...
- 刘晓志周兴军董向峰常亮陈雪静刘素霞赵伟高健段宝玲
- 文献传递
- 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子与乙型肝炎疫苗协同诱导的特异性免疫应答被引量：4
- 2007年
- 目的考察粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Gm-csf)对乙型肝炎疫苗免疫原性及诱导的体液免疫效果的加强作用。方法将Gm-csf和乙肝疫苗分别采用4种不同的免疫顺序,联合免疫BALB/c小鼠。定期用酶联免疫吸附法检测小鼠产生的抗乙型肝炎表面抗原(抗-HBsAg)的抗体水平。结果联合免疫Gm-csf,可提高小鼠产生的抗-HBsAg抗体水平;②单次免疫后7 d,混合疫苗组的血清抗体滴度最高,为疫苗组的7.5倍;直至免疫后35 d,混合疫苗组仍为最高,为疫苗组的9.2倍;③二次免疫后14 d,混合疫苗组血清中抗体滴度与疫苗组相比有显著性提高(P<0.05),随后GM+疫苗组、混合疫苗组和疫苗+GM组血清中抗体滴度都先后达到峰值,分别为疫苗组的10.0,10.1,8.2倍。④小鼠血清中抗体水平达到稳定状态后,用乙肝疫苗原液进行挑战实验,抗体快速达到峰值,分别为挑战实验前的9.2,5.2,12.8,4.8倍。结论通过Gm-csf的联合免疫,可提高乙型肝炎疫苗的免疫原性,增强乙型肝炎疫苗诱导的体液免疫水平。
- 周兴军王世聪宋欣李立敏董爱华王惠欣谢德娟冯利
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子乙型肝炎疫苗体液免疫免疫记忆
- 大肠杆菌分泌表达重组人肝再生增强因子的纯化、鉴定与活性研究被引量：1
- 2006年
- 目的建立一种大肠杆菌分泌表达型重组人肝再生增强因子(rhALR)的纯化工艺,并对产品进行鉴定和活性研究。方法通过沉淀、色谱等方法的条件优化,建立纯化工艺,通过电泳、HPLC、N-末端氨基酸测序、免疫杂交、同位素掺入、全波长扫描等方法对纯化产品进行鉴定和活性测定。结果建立了rhALR的纯化工艺路线,40%(NH4)2SO4沉淀,Butyl-S FF疏水色谱,CM-S FF离子交换色谱,Superdex-75分子筛色谱纯化,重组蛋白质的纯度大于95%。该蛋白质稳定存在的形式为二聚体,其单体的相对分子质量为15 000。该蛋白质结合辅酶黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD),对损伤后的肝细胞具有明显的促进作用,明显优于以包涵体形式表达的rhALR。结论从大肠杆菌分泌表达体系能分离纯化得到高纯度、具有生物学功能和活性的rhALR,是潜在的临床治疗肝病药物。
- 郝爱鱼董爱华赵广荣周兴军宋欣任乐民暴娜高文利贾茜
- 关键词：肝再生增强因子纯化工艺黄素腺嘌呤二核苷酸
- 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在制备治疗或预防乙型肝炎药物中的用途
- 本发明公开了一种重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在制备治疗或预防乙型肝炎药物中的用途，包括同时或先后给予重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和基因工程乙型肝炎疫苗，用于预防或治疗乙型肝炎。
- 周兴军宋欣李立敏王惠欣董爱华王世聪贺建功谢德娟封华
- 文献传递
- 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在制备治疗或预防乙型肝炎药物中的用途
- 本发明公开了一种重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在制备治疗或预防乙型肝炎药物中的用途，包括同时或先后给予重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和基因工程乙型肝炎疫苗，用于预防或治疗乙型肝炎。
- 周兴军宋欣李立敏王惠欣董爱华王世聪贺建功谢德娟封华
- 文献传递
- 重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的质控方法及质量标准的建立被引量：1
- 2010年
- 目的建立重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体(rhRMcAb)的质控方法和质量标准。方法采用小鼠中和试验(MNT)和快速荧光灶抑制试验(RFFIT)分别测定6批rhRMcAb样品的中和活性;还原、非还原SDS-PAGE检测rhRMcAb样品的纯度;还原烷基化胰蛋白酶酶切和反相高效液相色谱法分析rhRMcAb的肽图;焦谷氨酸肽酶去除N-端焦谷氨酸封闭后,氨基酸序列分析仪测定rhRMcAb的N-端氨基酸序列;表面等离子共振法(Surface plasmon resonance,SPR)测定rhRMcAb与狂犬病病毒糖蛋白的亲和常数;按《中国药典》三部(2005版)要求检测rhRMcAb的各项其他指标,并建立其质量标准。结果采用MNT和RFFIT2种方法检测6批rhRMcAb的中和活性,批间活性基本一致;3批rhRMcAb原液的还原SDS-PAGE纯度大于99.0%,非还原SDS-PAGE除抗体主带外,在高、低相对分子质量处分别存在一些次带;3批原液样品的肽图图谱与理化测定对照品一致;N-端氨基酸序列与理论序列一致;结合狂犬病病毒糖蛋白抗原的亲和常数为1.86×108/M;其他各项指标均符合《中国药典》三部(2005版)要求;建立的质量标准中,中和活性应不低于500IU/mg,SDS-PAGE及HPLC纯度应不低于98.0%。结论已建立了rhRMcAb的质控方法和质量标准,可用于rhRMcAb产品的检定。
- 魏敬双程立均赵伟周兴军刘进怀贾茜
- 关键词：狂犬病病毒
- 固化床反应器大规模灌注培养CHO-C28细胞生产乙型肝炎病毒表面抗原被引量：2
- 2014年
- 目的开发一种应用固定化反应器大规模培养CHO-C28细胞的灌注培养工艺,用于制备重组乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。方法利用自行研发的微型反应器以轴向旋转模拟固化床内培养基流经载体表面,分析固化床反应器灌注培养CHO-C28细胞表达HBsAg的可行性;使用AP20小型固化床反应器进行小试工艺;将AP20反应器消化后收集的2.3×1010个细胞接种至AP200固化床反应器,对灌注工艺进行中试放大,收获培养液,测定溶氧、pH、葡萄糖、乳酸及HBsAg蛋白浓度,并与转瓶培养工艺进行比较。结果预装无纺纸片的微型反应器接种CHO-C28细胞后,可连续灌注培养60 d,HBsAg表达水平为1 100 ng/ml。AP20反应器接种CHO-C28细胞后,HBsAg表达水平在维持期约1 100 ng/ml;将AP20反应器培养至第10天的CHO-C28细胞消化后,收集2.3×1010个细胞,接种AP200反应器,可连续灌注培养60 d,生长期中,葡萄糖消耗速率最高可达450 g/d,维持期葡萄糖消耗速率降至250 g/d,整个维持期内葡萄糖浓度维持在约1.5 g/L,收液中乳酸积累量为22 mmol/L,HBsAg表达水平约1 200 ng/ml。固化床灌注培养工艺的工艺条件控制精度高,培养环境更适合CHO-C28细胞生长,培养周期与转瓶工艺相当。结论固化床反应器灌注培养CHO-C28细胞工艺与转瓶工艺HBsAg表达水平相当,具备较高的产业化应用价值。
- 刘伯宁王英周兴军赵宏远侯丽媛彭瑞珍耿欣李幼勃容艳勇刘欢欢高健
- 关键词：乙型肝炎表面抗原反应器灌注培养
- 链脲佐菌素致迟发型大鼠1型糖尿病模型的研究被引量：2
- 2006年
- 目的探讨链脲佐菌素(streptozocin,STZ)致迟发型大鼠1型糖尿病模型建立的方法。方法将8只大鼠随机分为对照组3只,实验组5只;实验组将福氏完全佐剂(CFA)与小剂量STZ联合使用,连续3周大鼠腹腔注射,制造Wistar大鼠1型糖尿病模型,并对2组大鼠的进食量、饮水量、尿量、体重、血糖及尿糖进行密切监测,同时对实验组及对照组大鼠进行葡萄糖耐量实验(OGTT)。结果3只大鼠(60%)成模,实验组大鼠表现出多饮、多食、多尿、高血糖、高尿糖的1型糖尿病典型症状,与对照组大鼠的各项指标差异均有统计学意义(P<0.05),且实验组大鼠表现出葡萄糖耐量异常。结论CFA与小剂量STZ联合使用可制造Wistar大鼠1型糖尿病模型。
- 耿娅纪丽曼周兴军谭丽霞
- 关键词：福氏完全佐剂链脲佐菌素糖尿病
- 工业化哺乳动物细胞高效表达技术研究与应用
- 高健刘晓志董向峰常亮周兴军刘文献魏敬双杜威世赵伟程立均王慧欣王志明时蕾马志珺曹霖张宇婷
- 本研究涉及真核生物通用基因表达机制研究，首次提出并通过实验初步证明了以下两个观点：哺乳动物细胞基因的表达在染色质水平的结构调控主要与DNA的一级结构，即DNA的GC含量有关；非编码的富含GC的DNA片段(包括内含子)是一...
- 关键词：
- 关键词：哺乳动物细胞基因表达基因工程制药
- 重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的质控方法及质量标准的建立
- 目的建立重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体(rhRMcAb)的质控方法和质量标准。方法采用小鼠中和试验(MNT)和快速荧光灶抑制试验(RFFIT)分别测定6批rhRMcAb样品的中和活性;还原、非还原SDS-PAGE检测rh...
- 魏敬双程立均赵伟周兴军刘进怀贾茜
- 关键词：狂犬病病毒
