陈海琴
- 作品数：99 被引量：199H指数：6
- 供职机构：江南大学食品学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程文化科学更多>>
- 高山被孢霉中Δ6脱饱和酶关键位点及其对活性的影响
- 2016年
- 高山被孢霉中Δ6脱饱和酶(Ma FADS6)是决定ω3/ω6多不饱和脂肪酸代谢流的关键酶。利用定点突变技术研究Ma FADS6-Ι一级结构与功能的关系,为高山被孢霉多不饱和脂肪酸的合成提供了理论依据。利用非链取代式质粒扩增技术对已构建质粒p YES2/NT C-Ma FADS6-Ι内的表达单元(即Ma FADS6-Ι)中细胞色素b5区(HPGG)下游的位点进行定点突变,将所有突变体分别转化酿酒酵母进行诱导表达,进一步通过在培养基中添加Δ6脱饱和酶的底物来考察重组菌对各底物的催化作用。实验结果表明,所有突变体催化α-亚麻酸(ALA)的活性没有改变;K61和D68两个位点对催化亚油酸(LA)起关键作用,其对应的4个突变体对LA的转化率分别为(6.2±0.5)%(K61T)、(0.3±0.0)%(K61F)、(8.2±0.7)%(D68N)和(6.6±0.8)%(D68L),相比原始转化率各降低50%以上;G63和T69两个位点对LA的催化无直接影响,但G63T突变体由于突变位点极性改变,其对LA的转化率为(8.5±0.9)%,比原始转化率降低了49.9%;而V66位点的突变体对LA的转化率分别为(22.3±2.6)%(V66T)和(20.7±2.5)%(V66A),比原始转化率分别降低了36.1%和37.8%。确定了Ma FADS6-Ι氨基酸序列中K61和D68两个关键氨基酸位点经突变后均会使其酶活明显降低,这为研究Ma FADS6-Ι一级结构与功能的关系提供了理论依据。
- 史海粟陈海琴顾震南张灏陈永泉陈卫
- 关键词：高山被孢霉定点突变
- 泡菜中生物转化共轭脂肪酸的植物乳杆菌被引量：2
- 2017年
- 共轭脂肪酸是指一类含共轭双键的多不饱和脂肪酸的总称,包括共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA),共轭亚麻酸(conjugated linolenic acid,CLNA)和共轭十八碳四烯酸(conjugated stearidonic acid,CSA)。CLA和CLNA分别是由亚油酸和亚麻酸衍生所得的多种位置与几何异构体的总称,具有多种生理功能,如抗癌、抗动脉粥样硬化、提高机体免疫力和减肥等,已成为功能性脂质的研究热点。采用GC-MS(gas chromatographymass spectrometry)法分析了筛选自泡菜的22株植物乳杆菌转化共轭脂肪酸的能力。结果显示,CCFM47和CCFM232两株菌具有极高的共轭亚油酸和共轭亚麻酸转化能力,其中亚油酸的转化率均超过30%,发酵液中CLA总浓度分别达到0.166 4 mg/ L和0.151 4 mg/mL,而对α-亚麻酸的转化率高达60%,发酵液中CLNA总浓度分别达到0.196 4 mg/mL和0.172 1 mg/mL。
- 杨波王奥纪东张灏陈永泉陈海琴陈卫
- 关键词：共轭亚油酸植物乳杆菌转化率
- 模式生物斑马鱼的脂肪酸组分分析被引量：1
- 2016年
- 为进一步确定膳食多不饱和脂肪酸的添加提供依据,本文选取与人类基因高度相似的模式生物斑马鱼为研究对象,采用气质联用法分析斑马鱼不同生长时间(四月龄,六月龄和七月龄)和不同生理部位(大脑、心脏、肾脏、尾鳍、鱼腹肉以及整鱼)中的脂肪酸的含量与组成。分析结果表明:在斑马鱼中共鉴定出25种脂肪酸;除斑马鱼整鱼外,鱼腹肉中的脂肪酸种类最多,为20种;其它器官中的脂肪酸皆为10余种。在所有的组织中,棕榈酸(C_(16:0)),硬脂酸(C_(18:0))和油酸(C_(18:1))都是主要的脂肪酸,约占各组织器官总脂肪酸的50%以上;在整鱼与鱼腹肉中,不饱和脂肪酸的含量高于饱和脂肪酸,而在大脑、心脏、肾脏和尾鳍中,情况相反。对成熟斑马鱼大脑的不同部位(端脑、视顶盖和小脑)中的脂肪酸组成研究表明,各部分的脂肪酸的种类无显著性差异。
- 杨芹杨波陈海琴申延琴陈卫陈永泉
- 关键词：斑马鱼脂肪酸模式生物气相色谱质谱联用
- 食品微生物学实验教学改革的探索与实践被引量：4
- 2009年
- 食品微生物学实验是高等学校食品类专业的一门专业必修课。为了提高食品微生物学实验课教学质量,培养具有创新精神和能力的新一代高素质人才,本文从该课程的教学内容、教学方式和教学平台建设等角度进行了探索和总结。
- 夏雨田丰伟赵建新陈海琴陈卫张灏
- 关键词：教学改革微生物学实验
- 婴幼儿配方乳粉核心配料的制备与应用研究进展
- 2025年
- 母乳中的营养和功能性组分对婴幼儿健康成长有重要影响。随着对母乳研究的不断深入,越来越多的功能性组分被提取制备并作为核心配料添加至婴幼儿配方乳粉中。作者综述了母乳中功能性蛋白质、功能性脂质、母乳低聚糖(human milk oligosaccharides,HMOs)、益生菌的种类和含量对婴幼儿的健康功效,总结了婴幼儿配方乳粉核心配料的制备与应用现状。为解决婴幼儿配方乳粉核心配料生产中的“卡脖子”难题及实现我国婴幼儿配方乳粉产业健康发展具有指导意义。
- 蒋士龙姜楚琦张书文王筠钠逄晓阳杨波翟齐啸陈海琴吕加平
- 关键词：母乳婴幼儿配方乳粉
- 膳食添加深海鱼油对机体内EPA和DHA质量分数的影响被引量：2
- 2017年
- 为了研究体内EPA和DHA随膳食补充的变化规律,根据能量平衡原则,设计不同EPA和DHA组成的合成饲料,分为ω-3组,ω-6组和对照组(Ctl组)进行小鼠饲养实验,同时进行深海鱼油膳食补充人体实验,研究机体对EPA和DHA吸收效率。结果表明,饲养前后,在ω-3组中血液总脂肪酸EPA和DHA的质量分数分别增加9.1倍和1.99倍。饲养后ω-3组与ω-6组相比,肝脏总脂肪酸中EPA和DHA的质量分数分别增加66倍和3倍;附睾脂肪垫总脂肪酸中EPA和DHA的质量分数分别增加8.1倍和4.9倍。饲养后ω-3组与Ctl组相比,肝脏总脂肪酸中EPA和DHA的质量分数分别增加35倍和3.5倍;附睾脂肪垫总脂肪酸中EPA和DHA的质量分数分别增加8.1倍和5.8倍。人体补充深海鱼油后,血液总脂肪酸中EPA的质量分数上升4.4倍,而DHA的质量分数上升1.4倍。因此在膳食中富含或缺乏EPA时,机体内EPA的质量分数会快速升高或降低,而DHA则相对稳定,EPA比DHA更容易受到膳食脂肪酸的影响。
- 王顺合顾震南陈海琴张灏陈卫陈永泉
- 关键词：二十碳五烯酸二十二碳六烯酸膳食脂肪酸
- 高山被孢霉生长和产脂的影响因素分析被引量：2
- 2020年
- 为探究影响高山被孢霉生长和产脂的因素,分析不同初始葡萄糖质量浓度、活化次数、接种量、装液量、发酵时间、菌球打碎时间等条件下高山被孢霉生长和产脂特点。结果表明,初始葡萄糖质量浓度、装液量和发酵时间对菌株生长和产脂的影响最为显著,且初始葡萄糖质量浓度与花生四烯酸的产量呈负相关性。根据不同条件下菌株生长和产脂情况,得到高山被孢霉最佳培养条件为:菌株活化3次,用高速分散机8000 r/min打碎20 s至均匀状态,按2%~3%(体积分数)接种量接入初始葡萄糖质量浓度为50 g/L、装液量为20%(体积分数)的发酵培养基中,200 r/min、28℃培养8.5 d。
- 唐鑫顾舒婕常璐璐赵建新张灏陈海琴陈卫
- 关键词：高山被孢霉产脂
- 组学技术在产油微生物中的应用被引量：6
- 2021年
- 微生物油脂是未来燃料和食品用油的重要潜在资源。近年来,随着系统生物学技术的快速发展,从全局角度理解产油微生物生理代谢及脂质积累的特征成为研究热点。组学技术作为系统生物学研究的重要工具被广泛用于揭示产油微生物脂质高效生产的机制研究中,这为产油微生物理性遗传改造和发酵过程控制提供了基础。文中对组学技术在产油微生物中的应用概况进行了综述,介绍了产油微生物组学分析常用的样品前处理及数据分析方法,综述了包括基因组、转录组、蛋白(修饰)组及代谢(脂质)组等在内的多种组学技术,以及组学数据基础上的数学模型在揭示产油微生物脂质高效生产机制中的研究,并对未来发展和应用进行了展望。
- 卢恒谦陈海琴唐鑫赵建新张灏陈卫
- 关键词：基因组转录组蛋白组产油微生物
- 乳酸菌源共轭亚麻酸的分离制备被引量：2
- 2019年
- 乳酸菌发酵产生的共轭亚麻酸(CLNA)在慢性疾病中有重要的生理功能,CLNA由多种异构体组成,各种异构体的生理功能存在差异。建立了分离制备乳酸菌发酵液中游离态CLNA异构体的方法,成功获得了结构单一的CLNA异构体。结果表明:在现有条件下乳酸菌源CLNA单一异构体无法通过薄层色谱法分离;高效液相色谱法可实现乳酸菌源CLNA单一异构体的分离,最优分离制备条件为高效液相色谱柱Ultimate(5XB-C30,4. 6 mm×250 mm)、流动相甲醇-水-甲酸(体积比70∶30∶0. 01)、流速1 m L/min、检测紫外波长205 nm和233 nm。在最优分离制备条件下,保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0. 05%～0. 38%、1. 88%～4. 65%,制备得到的CLNA1纯度为97. 48%,CLNA2的纯度为100%,CLNA3的纯度为65. 30%。该方法重复性好,分离度高,适合分离乳酸菌发酵液中游离形式CLNA。
- 朱光贞杨波杨芹唐鑫张灏陈永泉陈海琴陈卫
- 关键词：乳酸菌高效液相色谱
- 动物双歧杆菌肌球交叉反应抗原MCRA酶学功能的研究
- 2012年
- 目的:将肌球蛋白交叉反应抗原基因(Myosin cross reactive antigen,MCRA)在毕赤酵母中重组表达,对其酶学功能进行研究。方法:利用动物双歧杆菌BB-12(Bifidobacterium animalissubsp.lactis BB-12)的肌球交叉反应抗原(MCRA)基因序列特征设计引物进行PCR扩增后克隆至毕赤酵母表达载体pPinkα-HC,电转化获得PichiaPinkTM重组菌。通过SDS-PAGE和Westernblot检测重组蛋白的表达情况,GC-MS分析重组菌的脂质组成情况,最终确定重组蛋白的活性及其催化特性。结果:SDS-PAGE及Western blot结果表明动物双歧杆菌BB-12的MCRA蛋白在重组毕赤酵母菌PichiaPinkTMpPinkα-HC-MCRA中成功表达且定位至细胞膜,大小为82 kDa。GC-MS结果显示,添加底物亚油酸培养基后,重组菌将亚油酸转变为羟基化衍生物,产物为10-羟基-顺-12-十八碳烯酸(10-HOE)。结论:这是首次对该类蛋白成功定位后对其酶学功能进行研究,动物双歧杆菌BB-12的MCRA基因首次在毕赤酵母中实现了活性表达,产物为10-羟基-顺-12-十八碳烯酸。
- 杨波陈海琴宋元达张灏陈卫
- 关键词：亚油酸毕赤酵母表达系统
