胡雪梅
- 作品数：86 被引量：271H指数：11
- 供职机构：滨州医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省研究生教育创新计划江苏省重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>
- 重组质粒pGEX-6P-1/Sj-FABPc的构建及在大肠杆菌中的表达
- 2000年
- 目的构建基因工程菌株,获得重组蛋白Sj-FABPc(日本血吸虫脂肪酸结合蛋白)。方法用PCR法从日本血吸虫cDNA文库中扩增Sj-FABPc基因片段,再将该片段重组于pGEMT中并进行DNA测序鉴定,经酶切后将目的片段构建成重组质粒pGEX-6P-1/Sj-FABPc,转化于大肠杆菌BL_(21),IPTG诱导表达。用Glutathione Sepharose^(TM) 4B亲和层析柱对表达产物进行纯化,PreScission^(TM) Protease酶对融合蛋白进行分离,获得纯化的14kDa Sj-FABPc。SDSPAGE和Western blot方法对表达产物进行鉴定。结果获得pGEX-6P-1/Sj-FABPc菌株,分离纯化出14kDa Sj-FABPc,表达量为10.52mg/L。Western blot显示,表达蛋白能被日本血吸虫免疫兔血清识别。结论重组蛋白Sj-FABPc可高效表达并有良好的抗原性。
- 赵巍苏川吴海玮胡雪梅沈蕾王荣芝马磊陈淑贞张兆松
- 关键词：日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因克隆重组抗原
- 日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因克隆及特性鉴定
- 2000年
- 目的为探索血吸虫病疫苗的新路径,对日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因克隆及特性鉴定。方法分析本室筛选日本血吸虫成虫cDNA文库获得的一cDNA片段(Sj338/24)的开读框序列,在其上下游分别设计引物A和B,并以该cDNA片段为模板进行PCR扩增后将该片段重组于pGEM-T中并进行DNA测序鉴定及检索。再经酶切后将该基因片段亚克隆入表达载体pGEX-6P-1,并进行蛋白表达、纯化及抗原性鉴定。结果该目的基因PCR产物全长共487bp,其开读框由459bp组成,编码153个氨基酸残基组成的多肽。DNA序列同源性分析发现,Sj338克隆基因与人及褐鼠的线粒体外膜蛋白的部分编码基因较高度同源。重组质料pPEX-6P-1/Sj338能高效融合表达,融合蛋白的分子量为43kDa。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,重组蛋白rSj338具有良好的抗原性。结论·Sj338可能为日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因,重组蛋白有望成为新的疫苗侯选分子。
- 胡雪梅吴海玮张兆松苏川赵巍沈蕾王荣芝马磊周吉礼陈淑贞吴观陵
- 关键词：日本血吸虫线粒体基因克隆重组抗原线粒体相关蛋白
- 孕期弓形虫感染对小鼠胎盘补体调节蛋白表达水平的影响
- 2011年
- 目的通过检测弓形虫感染对C57BL／6孕鼠胎盘补体调节蛋白的表达水平，探索孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子免疫机制。方法将C57BL／6孕鼠随机分为感染组和正常对照组，每组12只，感染组每只孕鼠于孕8d腹腔注射200个弓形虫强毒株（RH株）速殖子，对照组于相应时间注射等量生理盐水。所有孕鼠均于孕14d无菌分离胚胎组织，观察胎鼠发育情况。采用实时荧光定量PCR检测胎盘补体调节蛋白Crry、GPI-DAF及CD59a的mRNA的表达水平；采用流式细胞术检测胎盘单细胞悬液中Crry、GPI．DAF阳性细胞率。结果弓形虫感染导致感染组死胎率显著升高（感染组死胎率为80．95％，对照组为4．41％），两组之间差异有统计学意义（P〈0．01）；弓形虫感染组及对照组Crry、GPI-DAF和CD59a的mRNA表达水平分别为0．786±0．199、0．594±0．096、0．880±0．179和0．550±0．077、0．221±0．074、0．591±0．075，3类补体调节蛋白感染组与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）；感染组和对照组Crry、GPI-DAF的阳性细胞百分率分别为（10．03±2．11）％、（2．95±1．04l％和（3．15±1．32）％、（0．66±0．26）％，两类补体调节蛋白感染组与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论弓形虫感染导致孕鼠胎盘3种补体调节蛋白Crry、GPI—DAF及CD59a表达水平均升高，打破了母胎界面维持正常妊娠所需的免疫微环境，这可能是孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子免疫棚制之一．
- 刘现兵胡雪梅张海霞张瑞金付强徐晓艳
- 关键词：不良妊娠
- 日本血吸虫病疫苗的免疫学与生物学基础研究
- 苏川季旻珺刘丰张兆松吴观陵张蕾陶芳芳胡雪梅吴海玮王勇李光富赵巍
- 血吸虫病(schistosomiasis)是一个严重的全球性公共卫生问题，在非洲、中东、南美洲和东南亚流行地区，有超过2亿人口被感染，近6亿人口受到共计6种血吸虫感染的威胁，估计每年至少2万人死于血吸虫病。在中国流行的是...
- 关键词：
- 关键词：血吸虫病生物制剂
- 妊娠高血压患者采用甲基多巴联合拉贝洛尔治疗的临床效果评价被引量：12
- 2014年
- 目的对妊娠高血压患者采用甲基多巴联合拉贝洛尔治疗所取得的临床效果进行评价。方法 80例妊娠高血压患者随机分为对照组和实验组,每组40例。对照组单纯性使用硫酸镁治疗,实验组使用甲基多巴联合拉贝洛尔治疗。观察两组患者的治疗效果。结果实验组在降低尿蛋白、动脉压的效果明显好于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲基多巴联合拉贝洛尔治疗对于患严重妊娠高血压孕妇疗效好,副作用较小,可使母婴的安全性大大提高。
- 訾苹苹秦娟胡雪梅
- 关键词：妊娠高血压甲基多巴拉贝洛尔
- 胸腺五肽联合替比夫定治疗慢性乙型肝炎的疗效
- 2014年
- 目的研究胸腺五肽联合替比夫定治疗慢性乙型肝炎疗效及患者血清IL-10、IFN-γ水平的变化方法将90例慢性乙型肝炎患者随机分为观察组和对照组,对照组服用替比夫定治疗,观察组在替比夫定治疗的基础上联合用胸腺五肽治疗。疗程均为24周。分别比较两组患者治疗4周、12周、24周时ALT、HBVDNA、IL-10、IFN-γ的变化。结果治疗12周、24周时观察组患者ALT、HBVDNA的复常率明显高于对照组(P<0.05),IFN-γ含量从第4周开始出现明显上升,而IL-10表现为从第4周起持续下降。结论胸腺五肽联合替比夫定治疗慢性乙型肝炎患者近期疗效显著,主要作用机制为抑制HBV复制,改善肝功能和改善慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ、IL-10水平失衡,有助于慢性乙型肝炎感染者免疫力的恢复。
- 孙孟炎胡雪梅
- 关键词：慢性乙型肝炎胸腺五肽细胞因子
- 日本血吸虫线粒体相关蛋白的表位筛选及其免疫保护性研究
- 目的 筛选和鉴定重组的日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白rSj338的表位,并对其有效抗原表位免疫保护作用进行研究,预测其在抗血吸虫感染中的作用。方法用纯化的rSj338/26GST免疫家兔获得抗rSj338/26G...
- 胡雪梅张兆松吴海玮李春林苏川季王诗宁王勇吴观陵
- 关键词：噬菌体肽库表位日本血吸虫线粒体融合蛋白免疫保护融合蛋白
- 文献传递
- 日本血吸虫特异性IgE抗体相关肽表位的筛选与免疫学鉴定被引量：3
- 2004年
- 目的 从噬菌体表面显示肽库筛选并鉴定日本血吸虫特异性IgE抗体相关表位。 方法用ABC 酶联免疫吸附 (ELISA)法检测日本血吸虫病流行区居民血清 15 0份 ,选择其中 15份具高滴度血吸虫特异性IgE抗体的血清 ,混合后经蛋白G柱亲和层析祛除IgG抗体 ,用于对 12肽的噬菌体表面显示肽库进行 5轮免疫亲和淘筛。从所获噬菌体克隆中挑取 35个克隆 ,经DNA序列测定 ,对各独立肽表位进行免疫学鉴定。结果 经 5轮筛选 ,DNA序列测定显示共有 4个独立噬菌体克隆 ,其中 phage 3和 phage 6有较多重复克隆存在 ,为优势克隆 ;Westernblot分析显示 ,筛库血清中特异性IgE抗体能有效识别各噬菌体克隆。分别用各克隆噬菌体免疫小鼠 ,均能诱导特异性IgE抗体产生。结论 从 12肽噬菌体表面显示肽库中成功筛选到日本血吸虫特异性IgE抗体相关肽表位。
- 王勇吴海玮张兆松胡雪梅刘丰李春玲季旻珺吴观陵
- 关键词：特异性IGE抗体表位噬菌体日本血吸虫免疫学鉴定
- 孕期刚地弓形虫感染对滋养层细胞和蜕膜免疫细胞表面CD73表达的影响及其与不良妊娠的关系
- 2025年
- 目的 探讨孕期刚地弓形虫感染对滋养层细胞及蜕膜免疫细胞表面CD73表达的影响,并分析其与不良妊娠结局的关系。方法 收集健康早孕期正常流产的蜕膜和绒毛组织4个,采用聚蔗糖-泛影葡胺淋巴细胞分离液分离蜕膜单个核细胞,percoll法分离滋养层细胞,将纯化的蜕膜单个核细胞和滋养层细胞分别分为对照组和感染组,每组1×107个,感染组按细胞与弓形虫3∶1感染,感染后24 h,采用流式细胞术检测滋养层细胞、蜕膜自然杀伤细胞(decidualnaturalkiller,dNK)、蜕膜巨噬细胞(decidualmacrophage,dMφ)和蜕膜树突状细胞(decidualdendriticcell,dDC)表面CD73表达。将分离的滋养层细胞分为对照组和感染组,每组1×10^(7)个,感染组按细胞与弓形虫1∶1感染,感染后24 h提取蛋白,蛋白质免疫印记(Westernblotting)分析弓形虫感染后滋养层细胞CD73蛋白的相对表达水平。野生型C57BL/6J雌鼠60只与雄鼠30只,CD73基因敲除(CD73^(-/-))雌鼠60只与雄鼠30只均分别按雌雄比为2∶1随机合笼过夜。孕鼠随机均分为野生型对照组和野生型感染组,CD73^(-/-)对照组和CD73^(-/-)感染组,孕8 d,感染组孕鼠分别经腹腔注射400个弓形虫速殖子,对照组注射等量生理盐水。孕14 d,解剖子宫并观察胎盘、胎鼠情况,计算异常胎率。免疫组化染色检测胎盘组织中CD73的表达。采用GraphPad Prism9.0软件进行统计学分析,组间数据分析采用独立样本Student’st检验。结果 流式细胞术结果显示,对照组滋养层细胞表面CD73阳性细胞比例为(39.25±1.43)%,高于感染组的(31.27±2.79)%(t=5.31,P <0.05),对照组dDC、dMφ和dNK细胞表面CD73阳性细胞比例分别为(38.17±7.71)%、(25.80±6.85)%、(9.39±0.75)%,高于感染组的(36.33±7.64)%、(20.58±5.18)%、(7.74±1.08)%(t=4.25、5.24、3.57,均P <0.05);Westernblotting结果显示,对照组滋养层细胞CD73蛋白相对表达水平为0.79±0.07,较感染组的0.38±0.05显著下调(t=24.80,P
- 景天宇牟汝涛张帆刘现兵胡雪梅张海霞张海霞
- 关键词：刚地弓形虫不良妊娠CD73滋养层细胞免疫微环境
- 日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白rSj338的免疫细胞化学定位被引量：3
- 2002年
- 目的 应用免疫电镜技术观察日本血吸虫线粒体相关蛋白rSj338在成虫组织细胞中的分布和定位。 方法 收集新鲜的日本血吸虫成虫 ,常规固定、包埋 ,制备日本血吸虫成虫超薄冷冻切片。用纯化的抗rSj338单特异多克隆抗体为一抗 ,同时 ,以正常兔血清作阴性对照 ;以直径为 10nm胶体金颗粒标记的蛋白A进行定位 ,进行组织化学反应 ,透射电镜观察日本血吸虫线粒体相关蛋白rSj338在成虫组织细胞中的分布和定位。 结果 高密度胶体金颗粒主要分布于日本血吸虫线粒体外膜上 ,在线粒体的嵴上也见分布。结论 rSj338蛋白确为日本血吸虫线粒体相关蛋白 。
- 胡雪梅张兆松吴海玮李春林苏川季旻王勇朱翔吴观陵
- 关键词：日本血吸虫线粒体相关蛋白免疫细胞化学免疫电镜
