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王丽娟: 作品数：32 被引量：32H指数：3; 供职机构：中国科学院海洋研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家海洋公益性行业科研专项国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程天文地球更多>>

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一种鲆鲽鱼类温度急性胁迫评估的方法及应用: 本发明属于海水鱼类养殖及育种技术领域，具体涉及一种鲆鲽鱼类温度急性胁迫评估的方法及应用。将鲆鲽鱼放入养殖区中，设置实验水流流速，对水体逐渐升温或降温，待鲆鲽鱼无法平伏水底，被水流带入检测位时，记录该时刻对应温度或时间，即...; 吴志昊王丽娟尤锋宋宗诚

牙鲆芳香化酶Cyp19a多克隆抗体制备及其应用被引量：2: 2022年; 芳香化酶Cyp19a在鱼类性别决定和性别分化中起关键作用,通过调控体内雌、雄激素的转化来影响鱼类性别表型形成。为深入研究Cyp19a在牙鲆(Paralichthys olivaceus)性腺分化和发育过程中的表达规律及作用机制,本文从牙鲆cDNA中克隆获得1557 bp的cyp19a基因编码序列,并成功构建了原核重组表达质粒。经体外重组与纯化获得较高纯度的重组Cyp19a蛋白;以此作为抗原免疫兔子,制备多克隆抗体。用间接酶联免疫吸附剂测定(ELISA)技术检测抗血清效价,评估其免疫原性。结果表明免疫结束后得到的抗体血清效价超过了1∶50000,且纯化后抗体具有较好活性。Western Blot(WB)检测结果表明Cyp19a兔多抗可以特异性识别牙鲆重组Cyp19a蛋白和内源性Cyp19a蛋白。蛋白水平的雌雄性腺差异表达分析显示,牙鲆Cyp19a蛋白在卵巢中高表达,在精巢中微量表达。利用Foxl2和Dmrt1重组蛋白处理牙鲆性腺分化期幼鱼可分别显著上调和下调Cyp19a的表达(P<0.05)。综上所述,本研究成功制备了牙鲆Cyp19a多克隆抗体并进行了应用,为深入研究牙鲆等鱼类性别分化机制提供有力工具。; 舒畅王丽娟邹聪聪邹玉霞邹玉霞吴志昊李泽吴志昊; 关键词：重组蛋白多克隆抗体蛋白表达

基于CR及Cytb基因序列的大泷六线鱼野生群体遗传多样性分析被引量：4: 2019年; 为进一步了解山东省内大泷六线鱼(Hexagrammos otakii)群体遗传背景和分化情况,合理保护与开发利用渔业资源,选取线粒体控制区(CR)和细胞色素b基因(Cytb)对分布于山东省近海沿岸的3个大泷六线鱼野生群体以及北黄海1个离岸大泷六线鱼野生群体的线粒体基因序列进行对比,分析它们的序列特征、遗传多样性和种群历史动态情况。经PCR扩增得到大泷六线鱼野生群体的CR和Cytb基因序列,全长分别为485bp和651bp。基于CR基因序列共检测到40个多态位点,单倍型多样性平均值为0.908,核苷酸多样性平均值为0.006,定义了53种单倍型。基于Cytb基因序列检测到56个多态位点,转换颠换比值为19.04,种内单倍型多样性平均值为0.934,核苷酸多样性平均值为0.005,定义了38种单倍型。对比分析表明,4个大泷六线鱼野生群体均具有高单倍型多样性和低核苷酸多样性。NJ系统进化树、群体间/内平均遗传距离、Fst值、基因流及AMOVA分析结果显示:山东省内近海沿岸大泷六线鱼野生群体和北黄海离岸野生群体遗传差异不显著,群体间存在频繁的基因交流,未形成显著的遗传分化。种群动态结果表明大泷六线鱼于更新世晚期经历了快速扩张,并形成了现有遗传格局。山东省内近海沿岸大泷六线鱼野生群体和北黄海离岸野生群体遗传结构之间不存在显著的地理隔离,这可能与人为增殖放流和秋冬季节黄海沿岸流及暖流有关,从而使得群体之间基因交流广泛。; 赵文溪刘莹于超勇王丽娟宋爱环刘洪军张树东官曙光; 关键词：大泷六线鱼细胞色素B基因群体遗传结构

牙鲆耐寒相关基因CIRP、HMGB1的克隆及表达特征分析被引量：7: 2015年; 为鲆鲽鱼耐低温标记辅助育种研究和应用提供候选基因，并了解耐寒相关基因在低温下的表达图示，作者通过同源克隆以及5￠/3￠RACE 的方法扩增得到了牙鲆（Paralichthys olivaceus）CIRP 和HMGB1基因。组织表达谱分析显示，这两个基因在脑、鳃、心脏、肌肉、肝脏、肠等组织均有表达，但HMGB1基因在鳃中表达较弱。低温胁迫后，两基因随着胁迫时间的延长其表达量在肌肉中都出现先上升后下降的趋势：在0~12 h逐渐上升并达到最大值，然后下降恢复至最初水平。但在肝脏和脑组织中的变化趋势却不同，低温胁迫后0~2 h HMGB1基因在脑中的表达量上升至最高，然后下降至最初水平，在肝脏中变化不大。而CIRP基因在低温胁迫后0~2 h在肝脏中表达量处于上升趋势，然后下降至初始水平，在脑中变化不大。由此推测，这两个基因在低温条件下都参与了机体对外界的抵抗，特别是在抵抗外界寒冷的主要组织—肌肉中发挥作用，可能共同参与了机体的免疫反应，对低温胁迫环境下的鱼体进行保护，可以作为鱼类耐低温标记筛选的候选基因。; 胡金伟尤锋王倩王丽娟翁申达辛梦娇; 关键词：低温胁迫 RT-PCR

黄渤海近岸表层海水及地下水中Fe分布特征分析被引量：1: 2014年; 采用菲咯嗪法对黄渤海沿岸部分地点2009年表层水样以及山东荣成湾内的天鹅湖、近岸和远海部分站点2009~2011年采集的表层水样进行了Fe含量的测定,此外还检测了天津、荣成及日照采集的地下水水样。结果显示渤海沿岸除河北秦皇岛东山浴场,营口、秦皇岛西浴场、天津、东营支脉河口和昌邑沿岸表层水样的Fe（Ⅲ）以及Fe（t）浓度明显高于山东省黄海沿岸,而黄渤海沿岸各水样中Fe（Ⅱ）浓度均较低且差异不明显。荣成湾近岸和远海以及其内的天鹅湖站点水样的Fe（Ⅱ）、Fe（Ⅲ）和Fe（t）浓度周年变化不明显,Fe（t）浓度总体上为天鹅湖〉近岸〉远海。地下水中Fe（Ⅲ）浓度高于Fe（Ⅱ）,但一些地下水中Fe（Ⅱ）浓度仍处于较高水平。; 吴志昊尤锋王丽娟段德麟邵展茹刘梦侠; 关键词：黄渤海地下水 FE

动物全基因组关联分析的混合模型方法被引量：1: 2017年; 在动物全基因组关联分析(Genome-Wide Association Studies,GWAS)中,线性混合模型通过校正群体分层、个体间亲缘关系和微效多基因对标记关联检验的影响有效地控制了数量性状基因座(Quantitative Trait Locus,QTL)检测的假阳性率。文章综述了混合模型之于GWAS基因定位的求解策略和方法,包括逐个标记的GWAS方法和联合多标记的GWAS方法。评论了这些方法在计算效率、QTL检测效率和模型拟合度方面的优缺点。指出了完善的全基因组关联分析方法不仅能够高效率地检测QTL,还能够最优地拟合性状表型值和预测基因组育种值。; 韩丹丹赵敬丽王丽娟杨润清; 关键词：线性混合模型主效基因

一种快速建立大泷六线鱼近交系的方法: 本发明涉及染色体操作技术，具体地说是一种高效快速建立大泷六线鱼近交系的方法。收集大泷六线鱼精液灭活，利用遗传灭活的精子与分离成单粒的卵进行人工授精，再通过静水压力抑制第二极体排放，而后诱导雌核发育获得大泷六线鱼近交系。采...; 吴志昊尤锋宋宗诚王丽娟谭训刚王凌; 文献传递

一种耐高温且生长快的牙鲆三倍体新品系制备方法: 本发明属于遗传育种技术领域，具体涉及一种耐高温且生长快的牙鲆三倍体新品系制备方法。该方法分别以耐高温性能和体重作为筛选指标，利用群体选育和雌核发育等技术构建获得牙鲆耐高温配套系和速生配套系，再以配套系为父母本，采集成熟精...; 王丽娟吴志吴尤锋宋宗诚岳新璐

一种牙鲆17β-羟类固醇脱氢酶12b的应用: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体地说是一种牙鲆17β‑羟类固醇脱氢酶12b的应用。牙鲆17β‑羟类固醇脱氢酶12b(Hsd17b12b)在调控牙鲆性激素合成中的应用。本发明还公开了通过活体腹腔注射Hsd17b12b重组...; 邹聪聪尤锋王丽娟谭训刚邹玉霞肖坤李泽王国玉

1种牙鲆囊胚期细胞系的构建及初步应用研究: 2025年; 采用研磨杵压破胚胎外膜、分离出细胞,采用DF12培养基,并添加抗生素、胎牛血清和生长因子等,在25℃下从牙鲆囊胚中构建了1种多突起且边缘清晰的新细胞系,命名为PoEC,目前已经培养至40代。线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因片段测序确定该细胞系来源于牙鲆。该细胞系具有典型的生长曲线。根据相关基因和酶活性结果,该细胞系不具有全能性。绿色荧光蛋白基因能够成功地转染该细胞系细胞,说明该细胞系可以进行牙鲆或其他鱼类基因功能研究。更重要的是,采用10、20、30、40 mg/L重金属铬处理细胞,探究重金属对细胞的影响,发现低质量浓度铬(10 mg/L)处理1 h内可以严重影响其存活率。所以该细胞系可以作为鱼类研究重金属毒理的有力工具,以体外生物学系统应用于海水鱼类生物技术和毒理学研究中。; 聂苗苗吴志昊王丽娟尤锋; 关键词：牙鲆囊胚细胞系毒理研究

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