单丽伟
- 作品数：30 被引量：258H指数：7
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程农业科学文化科学更多>>
- 小麦种子过氧化物酶WP1基因的原核表达、纯化及多克隆抗体制备被引量：18
- 2011年
- WP1是小麦种子中最主要的阳离子过氧化物酶,该酶不仅参与种子的发育过程,而且影响面粉的加工品质。首先构建了WP1基因原核表达载体pET28a-WP1,并将其转化到T7 Expression大肠杆菌菌株中诱导表达。His-tag融合的WP1主要以包涵体形式存在,使用Ni-NTA亲和层析柱在变性条件下进行纯化,获得纯度大于98%的重组蛋白。重组WP1经尿素梯度透析复性溶解后免疫新西兰大白兔,最终获得WP1多克隆抗体。ELISA分析结果显示制备的WP1兔抗血清的效价大于1∶625 000;Western blotting结果证明制备的多克隆抗体对WP1具有很好的专一性。
- 单丽伟唐如春刘三阳范三红郭蔼光
- 关键词：小麦表达纯化抗体制备
- 产甲烷菌研究进展被引量：107
- 2003年
- 产甲烷菌是重要的环境微生物,在自然界的碳素循环中起重要作用。迄今已有5种产甲烷菌基因组测序完成。基因组信息使人们对产甲烷茵的细胞结构、进化、代谢及环境适应性有了更深的理解。目前已知的甲烷生物合成途径有3种,它们以乙酸、甲基化合物、氢/二氧化碳为起始,通过不同的反应途径都形成了甲基辅酶M,在甲基辅酶M还原酶的催化下最终形成甲烷。
- 单丽伟冯贵颖范三红
- 关键词：基因组产甲烷菌
- 小麦种子过氧化物酶基因wp1的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：4
- 2009年
- 【目的】克隆小麦种子过氧化物酶基因wp1,并利用原核系统表达纯化。【方法】通过RT-PCR从小麦未成熟种子中扩增wp1基因cDNA,构建His-tag和MBP融合表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。使用直链淀粉亲和层析获得MBP-WP1融合蛋白,并以ABTS为底物检测酶活性。【结果】获得的wp1基因cDNA编码一种358个氨基酸残基的蛋白产物,其序列与大麦BP1相似性高达89%;空间结构预测结果表明,小麦WP1属于第三类过氧化物酶,具有该家族成员典型的血红素和钙离子结合位点;His-Tag融合的WP1主要以包涵体形式存在,而MBP融合的WP1主要以可溶形式存在,表达量分别达到总蛋白的18.2%和34.6%;纯化获得的MBP-WP1融合蛋白可检测到过氧化物酶活性。【结论】使用原核系统可高效表达出可溶性的、具有部分活性的WP1蛋白。
- 单丽伟罗海霞范三红郭蔼光
- 关键词：小麦高GC含量基因克隆
- 皂素废水处理中厌氧污泥活性影响因素的研究被引量：3
- 2005年
- 分析了皂素废水水质情况,并研究了温度、pH和Co2+、Ni2+、Mg2+、Zn2+等2价金属离子不同组合 对厌氧颗粒污泥活性的影响。结果表明,在30C和进水pH=6的条件下,经升流式厌氧反应器(UASB)驯化后的厌 氧颗粒污泥的活性较高,另外,添加微量元素Co2+、Ni2+、Mg2+和Zn2+,可以显著提高厌氧污泥的生物活性。
- 朱丹冯贵颖呼世斌单丽伟李新国
- 关键词：皂素废水厌氧污泥生物活性微量元素COD去除率
- 絮凝剂产生菌的筛选及产生絮凝剂的影响因素研究被引量：7
- 2003年
- 从活性污泥中分离出 6 3株菌株 ,培养、筛选得到具有絮凝活性的菌株 17株 ,其中 2株絮凝活性较高。研究了这 2株菌在不同培养时间的生长情况及其絮凝活性等 ,得出絮凝活性与菌生长量呈正相关关系。通过改变培养基的碳源、氮源、无机盐等因素 ,得出 2株絮凝活性较高的菌株产生絮凝剂的最佳条件 :真菌 IV- 2 1,以蔗糖为碳源 ,蛋白胨为氮源 ,Na Cl为无机盐 ,p H为 6 .0 ,培养温度为 30℃时 ,絮凝效果最好 ;细菌 I- 9,以葡萄糖为碳源 ,尿素为氮源 ,K2 HPO4 为无机盐 ,培养基初始 p H偏碱性 ,培养温度为 30℃时 ,絮凝效果最好。
- 王正林冯贵颖岳晓勤单丽伟王月红刘晓荣
- 关键词：微生物絮凝剂絮凝活性活性污泥
- 浅谈无机及分析化学课程网络试题库与教学被引量：1
- 2017年
- 农林院校的无机及分析化学课程试题库系统除用于考试出卷外,应该结合网络成为网络试题库,应用于平时教学中,可促进教学方法改革,给学生课外进行基础训练,引入科学前沿工作,提高学生学习兴趣,引导学生自主学习。
- 蒲亮张忠王文己杨正亮单丽伟
- 关键词：无机及分析化学网络试题库教学
- 大豆类黄酮生物合成关键酶CHS基因的克隆及表达分析被引量：9
- 2012年
- 根据查尔酮合成酶(CHS)基因DNA序列的保守区域设计了PCR引物,通过RT-PCR扩增从大豆叶片中克隆出3个参与类黄酮合成的CHS基因,分别命名为GmCHS1、GmCHS2和GmCHS3。在大豆基因组数据库进行同源比对,发现这3个基因分别与大豆基因组上Gm08g11610、Gm05g28610和Gm08g11520相对应,DNA序列一致性达95%～98%,推导氨基酸序列一致性达98%以上。进化分析显示,大豆中3个CHS蛋白与决明、菜豆CHS蛋白亲缘关系较近。表达分析显示,这3个基因在不同品种间有表达水平的差异,这可能是不同大豆品种中类黄酮含量不同的重要原因之一。
- 单丽伟汪勇王美玲王中华
- 关键词：大豆异黄酮类黄酮查尔酮合成酶
- 玉米脂肪酸α-双加氧酶cDNA克隆与表达分析被引量：2
- 2012年
- 以玉米自交系丹340为实验材料,同源克隆到玉米脂肪酸α-双加氧酶基因(ZmDOX)cDNA序列,并利用半定量与定量RT-PCR分析其在不同组织和PEG胁迫下的表达特征。序列分析结果表明,该cDNA序列包含1 857 bp完整的开放阅读框,编码619个氨基酸残基的蛋白产物。玉米、水稻、小麦中DOX氨基酸序列高度同源,聚集在同一进化枝,而双子叶植物存在两类DOX蛋白。组织表达特征分析发现,ZmDOX在根、茎、叶中均有表达,其中在根中表达量最高。PEG胁迫条件下,根中ZmDOX对胁迫的响应较快且增加幅度较大,而在叶中表达量有降低的趋势。
- 单丽伟张丙凯王美艳魏少华范三红
- 关键词：玉米同源克隆
- 小麦种子过氧化物酶WP1的研究及其对面团流变学特性的影响
- 面粉是众多食品加工的主要原料,如何改善面粉的加工性能是当前小麦育种和食品加工领域的研究热点。育种研究者希望通过改变面粉中各种组分的含量改变面粉的加工性能,而食品加工研究者则希望通过在面粉中添加外源添加剂改变面粉的性质。小...
- 单丽伟
- 关键词：纯化表达谱
- 文献传递
- 一种人工设计质粒pM5500及其在DNA marker制备中的应用
- 本发明公开了一种人工设计质粒pM5500及其在DNA marker制备中的应用，所述质粒的长度为5500bp，序列为：SEQ ID NO：1，包含高拷贝复制起始点序列和氨苄青霉素抗性基因编码序列，以及各种人工设计组合的D...
- 单丽伟范三红胡小平
