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高晓明
作品数:
4
被引量:29
H指数:2
供职机构:
北京医科大学
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
汤健
北京医科大学
吕平
解放军463医院三内科
胡晓
解放军463医院三内科
潘秀芳
北京医科大学
刘斌
北京医科大学
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1999
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重组人IL-18和IL-18-GFP融合蛋白的表达及其生物学活性的研究
被引量:19
1999年
目的在大肠杆菌中表达重组人IL-18(rhIL-18)及rhIL-18-绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白并测定其生物活性。方法构建原核表达质粒pET28a/hIL-18及pTrc99/hIL-18-GFP,并分别转化大肠杆菌BL21。用IPTG诱导重组蛋白的表达,超声裂菌上清中的rhIL-18用镍金属螯合层析柱进行纯化,rhIL-18-GFP用抗GFP亲和层析柱及SephacrylS-100分子筛柱纯化。以人的外周血单核淋巴细胞测定两重组蛋白的生物活性。结果表达的rhIL-18及rhIL-18-GFP均具有促进T细胞增殖,增强NK细胞细胞毒作用及诱导外周血单核淋巴细胞合成IFN-γ的能力,rhIL-18-GFP还具有GFP的绿色荧光特性,可对P815细胞进行标记。结论表达并纯化的rhIL-18及rhIL-18-GFP具有生物活性,可用于进一步的功能研究。
胡晓
吕平
王丽峰
高晓明
关键词:
IL-18
绿色荧光蛋白
融合蛋白
EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因小鼠的制备
被引量:8
1999年
将Epstein-Bars病毒(EBV)膜抗原(MA)BLLF1基因用显微注射法导入昆明种小鼠受精卵的雄性原核以制备转基因小鼠模型。共注射受精卵450枚,存活291枚,植入假孕母鼠的输卵管使之发育,产出仔鼠12只。注射后卵的存活率和仔鼠出生率为65%和4%。用PCR法分析显示5只有BLLF1基因整合,整合率为42%。结果表明携带BLLF1基因的转基因小鼠已经制备成功。该转基因小鼠可作为研究EB病毒致病机理,特别是与自身免疫病关系的动物模型。
郭长占
周为民
潘秀芳
谷淑燕
田枫
刘斌
王兆绰
高晓明
关键词:
转基因小鼠
EB病毒
自身免疫病
膜抗原
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