陈万义
- 作品数：43 被引量：140H指数：8
- 供职机构：光明乳业股份有限公司更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生生物学石油与天然气工程更多>>
- 添有扩增内标的副溶血弧菌PCR检测方法
- 本发明涉及的是一种食品安全技术领域的添有扩增内标的副溶血弧菌PCR检测方法。本发明包括(1)人工构建合成扩增内标序列，并设计特异引物；(2)使PCR反应体系处于最优的反应条件；(3)PCR扩增；(4)提取不同血清型的副溶...
- 史贤明龙飞施春雷陈万义张忠明
- 文献传递
- 添加有扩增内标的副溶血弧菌PCR检测方法被引量：20
- 2010年
- 【目的】发掘副溶血弧菌特异性更强的检测靶点,并人工构建扩增内标,建立可以有效避免假阴性的新PCR检测体系。【方法】利用生物信息学方法,从副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)基因组DNA中发掘特异性很高的序列,并设计相应的特异性引物,人工构建扩增内标,建立PCR检测体系。【结果】本研究发掘得到的序列vp1332特异性很强,经检索,该序列是编码ABC转运子接合蛋白组分的基因片段,根据此序列设计一对特异检测引物(vp1332L/vp1332R),同时,构建了扩增内标,并建立了PCR检测体系。利用该体系对296株副溶血弧菌和33株非副溶血弧菌进行检测,结果显示,所有以副溶血弧菌为模板的PCR反应均可扩增到一条343bp的特异片段,而模板来源于非副溶血弧菌的则只能扩增到一条499bp的扩增内标片段。灵敏度实验表明,该PCR反应体系的检测灵敏度为1.6×102cfu/mL。人工污染实验表明,起始染菌量为1.24cfu/25g样品时经8h增菌,即可检测到副溶血弧菌。实际样品检测结果也证实该方法的有效性。【结论】本研究建立的PCR反应体系能特异地检测副溶血弧菌,并可有效地排除假阴性,提高检测准确率。
- 何晓华余水静陈万义施春雷孟江洪史贤明
- 关键词：副溶血弧菌PCR检测扩增内标假阴性
- 生鲜蔬菜中阪崎克罗诺杆菌的分离与鉴定被引量：11
- 2014年
- 从上海市售蔬菜中共采集样品102份,按照国标方法GB 4789.40—2010进行阪崎克罗诺杆菌的分离与鉴定。采用生化实验、PCR检测方法、BAX System Q7全自动病原微生物检测仪、API 20E试剂条鉴定和16S rDNA序列的测定对分离到的可疑菌株进行鉴定与确证。根据国标法的鉴定结果,102份样品中共有18份样品分离到可疑阪崎克罗诺杆菌菌株,进一步结合其他4种鉴定方法确定13份样品中分离到的可疑菌株为阪崎克罗诺杆菌菌株,分离率达13%(13/102)。通过研究说明生鲜蔬菜也是阪崎克罗诺杆菌比较常见的宿主或者污染源之一。
- 陈万义任婧吴正钧杭锋刘振民郭本恒
- 一株产胞外多糖的短乳杆菌及其应用
- 本发明公开了一株产胞外多糖的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)及其应用。本发明的短乳杆菌BDLB0001保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No.5223。本发明的短乳...
- 艾连中郭本恒孙克杰陈卫张灏邵丽吴正钧陈万义穆海菠
- 一种检测干酪乳杆菌菌株的方法及其试剂盒和引物对
- 本发明公开了一种检测干酪乳杆菌菌株(Lactobacillus casei)的方法及其试剂盒和引物对。该引物对的核苷酸序列分别如序列表中SEQ ID NO.1所示和如序列表中SEQ ID NO.2所示。所述的方法包括以下...
- 陈万义任婧郭本恒刘振民
- 文献传递
- 一种检测干酪乳杆菌菌株的方法及其试剂盒和引物对
- 本发明公开了一种检测干酪乳杆菌菌株(Lactobacillus casei)的方法及其试剂盒和引物对。该引物对的核苷酸序列分别如序列表中SEQ ID NO.1所示和如序列表中SEQ ID NO.2所示。所述的方法包括以下...
- 陈万义任婧郭本恒刘振民
- 不同来源副溶血弧菌分离株的遗传相关性分析被引量：3
- 2015年
- 选取来自上海、宁波、舟山的109株临床、食品和环境分离株,对其进行血清分型和ERIC-PCR分型研究。通过玻片凝集反应进行血清分型,结果显示:在26种血清型中,O3∶K6和O4∶K8所占比例较高,分别为20.7%和19.5%,合计达40.2%;其次为O4∶K68,O1∶K25,O3∶K68,O3∶K25,O3∶K8和O1∶K6等。结合来源分析表明:环境分离株的血清型分布呈现出显著的多样性,与食品和临床分离株差异较大。采用ERIC-PCR基因分型方法,结合聚类分析比较各分离株之间的遗传相关性,结果显示:ERIC-PCR指纹图谱可将109株副溶血弧菌分为65个型,31个类群,分辨力指数为0.942。亲缘关系分析结果显示:不同来源的分离株可聚为一类,在基因水平上存在一定的相关性。本研究揭示了不同来源的副溶血弧菌血清型分布情况及遗传相关性,结合血清分型和ERIC-PCR分型可进行流行病学溯源,为副溶血弧菌的预防控制提供理论依据。
- 茆丹陈万义周秀娟王宏勋周敏施春雷史贤明
- 关键词：副溶血弧菌血清分型
- 婴儿配方粉中克罗诺杆菌属菌株的分子溯源技术被引量：3
- 2016年
- 克罗诺杆菌属菌株水平上的快速准确的鉴定和区分对于控制由该属引起的食源性疾病的监控、预防和控制具有十分重要的意义。同时,对于分子流行病学的研究也是至关重要的。越来越多的基因分型方法已经被用于克罗诺杆菌属内菌株的分子分型。为了切断克罗诺杆菌属菌株的传播途径和快速确定感染源,本综述主要针对目前克罗诺杆菌属菌株的分子分型方法进行了较为详细的探讨。简要介绍了克罗诺杆菌属分子分型方法的最新研究进展,以便发生乳粉污染克罗诺杆菌属菌株时能够快速溯源,防止食物中毒事件的进一步蔓延。
- 陈万义刘振民任婧
- 关键词：分子分型
- 一种检测阪崎克罗诺杆菌的方法及其试剂盒和引物
- 本发明公开了一种检测阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter？sakazakii)的方法及其试剂盒和引物。所述的方法包括以下步骤：(1)提取待测样品的基因组DNA；(2)以步骤(1)所得的基因组DNA为模板，以序列如SEQ...
- 陈万义任婧杭锋穆海菠艾连中郭本恒
- 文献传递
- 阪崎克罗诺杆菌分离菌株的核糖体分型研究被引量：3
- 2016年
- 利用Riboprinter对分离到的15株阪崎克罗诺杆菌进行了鉴定及核糖体分型,并利用Bio Numeicrus软件对其结果进行分析,如果按照相似性大于80%计算,根据辛普森方程计算该分型方法的分辨率可达到0.808。结果表明,核糖体分型(ribotyping)是一种适用于阪崎克罗诺杆菌的快速分子分型方法,可将不通来源的阪崎克罗诺杆菌分离菌株区别开来,能够对由该菌引起的食品中毒事件能够进行快速的溯源。
- 陈万义游春苹吴正钧刘振民
- 关键词：分子分型
