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王建军: 作品数：16 被引量：61H指数：4; 供职机构：江苏大学附属昆山医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学杰出青年基金昆山市科技计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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THP-1分化的巨噬细胞来源Exosomes的生物学特征鉴定: 2014年; 利用佛波酯体外分化人急性单核白血病细胞形成巨噬细胞,并用低温超速离心法从巨噬细胞培养上清收集Exosomes,并分析其生物学特征。Exosomes经透射电显微镜分析形态,并用Western blot方法分析Exosomes膜上特异性蛋白CD80、ICAM-3、HSP-70的表达对其生物学特征进行鉴定。研究结果表明佛波酯成功诱导人急性单核白血病细胞分化成人巨噬细胞。获得的巨噬细胞分泌微小囊泡经透射电镜分析后,微小囊泡的直径在30-100 nm,并且其含有Exosomes的特征性蛋白CD80、ICAM-3、HSP-70等蛋白,表明其为Exosomes。使用低温超速离心法成功收集到Exosomes,为后续开展Exosomes的成份及功能分析提供了保障。; 王建军姚永良陈偲吴建红赵淑玲汤立军; 关键词：巨噬细胞 EXOSOMES 透射电镜超速离心

miRNA在白血病中的研究进展被引量：3: 2011年; microRNA(miRNA)是一种小分子非编码RNA,在细胞增殖、分化和凋亡等多种生理过程中发挥着重要作用.白血病相关miRNA研究进展迅速,并呈现了miRNA介导白血病瘤细胞增殖、分化和凋亡的调控网络.深入了解相关miRNA与白血病的发生、发展关系将为白血病的治疗开辟新途径.; 王建军汤立军; 关键词：MIRNA 白血病

MYETS1基因的原核表达及其在多发性骨髓瘤细胞系中的缺失分析: 2012年; 目的:初步探讨MYETS1基因在多发性骨髓瘤细胞系ARH-77及KM3中表达下调机制及进行MYETS1基因原核表达分析。方法:运用FISH技术检测两株ARH-77和KM3细胞系染色体13q14.3区域缺失情况;RT-PCR扩增MYETS1基因,并构建pGEX-4T-MYETS1重组载体。结果:ARH-77和KM3细胞系中MYETS1基因所在染色体13q14.3区域获得未缺失阳性信号;生物信息学分析MYETS1基因与LECT1基因序列同源,但通过RT-PCR实验证实MYETS1基因开放阅读框与LECT1基因开放阅读框不一致;成功获得MYETS1基因原核表达蛋白产物。结论:ARH-77和KM3两株骨髓瘤细胞系中MYETS1基因所在染色体13q14.3区域未发生缺失,其在多发性骨髓瘤细胞中表达下调可能存在其他机制。; 王建军洪丽萍潘艺刘水平吴坤陆汤立军; 关键词：多发性骨髓瘤

幽门螺杆菌感染胃黏膜上皮细胞来源的外泌体HSPD1蛋白调控巨噬细胞分化: 2025年; 为揭示幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)感染胃黏膜上皮细胞来源的外泌体(exosome)对巨噬细胞极化的影响,分析其蛋白质的组分和功能,收集感染与未感染幽门螺杆菌的胃黏膜上皮细胞GES-1上清液中的外泌体;利用蛋白质印迹法、流式细胞术观察外泌体对巨噬细胞极化的影响;通过蛋白质组学方法分析鉴定出感染与未感染幽门螺杆菌的胃黏膜上皮细胞GES-1来源的外泌体中的差异蛋白质,并采用蛋白质印迹法验证正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(MKN-7、AGS)中差异蛋白质的表达;最后,运用免疫组织化学法分析两组临床组织标本的热休克蛋白家族D成员1(heat shock protein family D member 1,HSPD1)水平,以及M2型巨噬细胞标志物CD163的表达水平。结果显示,幽门螺杆菌感染胃黏膜上皮细胞所释放的外泌体促进M2型巨噬细胞的表面标志物CD163、CD206以及极化相关蛋白质MGL1/2和Arg-1的表达;蛋白质组学共筛选出50个差异表达的蛋白质,其中HSPD1在幽门螺杆菌感染后的GES-1细胞及其释放的外泌体中的表达水平显著高于未感染组。此外,幽门螺杆菌阳性胃癌组织的HSPD1表达水平显著高于幽门螺杆菌阴性胃癌组织;在幽门螺杆菌阳性胃癌组织中,M2型巨噬细胞标志物CD163的表达水平显著增加,且与HSPD1蛋白的表达水平呈明显正相关(r=0.472,P=0.01)。这些研究结果表明,幽门螺杆菌感染胃黏膜上皮细胞来源的外泌体促进巨噬细胞M2型极化。其中,外泌体携带的HSPD1作为关键调控因子,在驱动巨噬细胞表型转化进程中发挥着不可或缺的作用。; 王楠谢怡萍李玉洁翁轶玮王建军; 关键词：外泌体

鸟结核分枝杆菌刺激巨噬细胞后对细胞骨架蛋白β-actin的调控机制研究被引量：1: 2015年; 目的研究鸟结核分枝杆菌刺激巨噬细胞后其对巨噬细胞骨架蛋白及其调节蛋白的作用机制。方法 RT-PCR方法分析M.avium刺激巨噬细胞后cofilin-1,β-actin基因的表达水平,同时Western blot方法从蛋白水平分析M.avium刺激巨噬细胞后β-actin、cofilin-1蛋白的表达水平。流式细胞术检测M.avium刺激巨噬细胞后巨噬细胞凋亡及坏死的情况。结果β-actin基因及其蛋白在巨噬细胞受M.avium刺激后表达显著下调,而β-actin蛋白的调节蛋白cofilin-1表达显著增强。同时,M.avium刺激巨噬细胞后诱导巨噬细胞凋亡显著增多。结论 M.avium刺激巨噬细胞后可通过调控β-actin及cofilin-1蛋白的表达,从而诱导巨噬细胞凋亡或坏死。; 王建军王泽友姚永良吴建红成阳李光新; 关键词：巨噬细胞 Β-ACTIN

幽门螺杆菌作用巨噬细胞后诱导的炎症反应研究被引量：11: 2015年; 目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)作用巨噬细胞后导致的细胞炎症反应机制及对宿主巨噬细胞的损伤作用。方法:ELISA方法检测幽门螺杆菌感染巨噬细胞后细胞培养上清液中细胞因子IL-23、IL-10、TNF-α及IL-8的含量,Western blot分析幽门螺杆菌作用巨噬细胞后细胞胞内蛋白NOS2、COX2的表达水平;同时流式细胞技术分析幽门螺杆菌处理巨噬细胞后对细胞的凋亡作用。结果:细胞因子IL-23、IL-10、TNF-α、IL-8在幽门螺杆菌作用巨噬细胞后细胞培养上清中分泌显著增多(P<0.05),且NOS2、COX2蛋白表达显著增强(P<0.03);幽门螺杆菌处理巨噬细胞后巨噬细胞凋亡显著增多(P<0.05)。结论:幽门螺杆菌作用巨噬细胞后诱导巨噬细胞增强炎症反应而抑制或杀伤幽门螺杆菌,同时长时间作用能诱导宿主巨噬细胞凋亡。; 王建军王泽友姚永良吴建红李光新; 关键词：幽门螺杆菌巨噬细胞炎症反应

成纤维细胞生长因子-7在巨噬细胞感染结核分枝杆菌中的免疫机制初步研究被引量：3: 2014年; 巨噬细胞分泌的纤维细胞生长因子-7(fibroblast growth factor-7,FGF-7)具有一定的细胞修复作用及抗炎症作用。通过PCR技术、Western-blot及ELISA实验研究分析FGF-7在巨噬细胞感染结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.avium)后的分子免疫机制。研究发现fgf-7基因在结核病患者外周血单个核细胞中表达增强,并且U973巨噬细胞在感染M.avium后,其fgf-7基因与FGF-7蛋白亦表达增强,同时U973巨噬细胞上清中的细胞因子TNF-α与IFN-γ分泌量显著增加。实验结果表明巨噬细胞受M.avium感染后,M.avium可增强巨噬细胞fgf-7基因及其蛋白质的表达,并促进细胞因子TNF-α与IFN-γ的分泌;提示FGF-7可能与TNF-α、IFN-γ等共同引起炎症反应从而参与对M.avium的抑制或杀伤作用,并修复损伤的巨噬细胞。; 王建军唐新储强顾涛汪小葛张庆慧徐姿

miR-421在胃癌中的表达及对BGC-823细胞增殖的作用被引量：4: 2014年; 目的探讨miR-421在胃癌细胞中的表达水平及对BGC-823胃癌细胞增殖的作用。方法利用PCR方法分析miR-421在胃癌组织细胞及多种胃癌细胞株中的表达水平,并通过RNA转染技术将miR-421 mimics与miR-421 inhibitors转染BGC-823胃癌细胞;通过CKK-8试剂盒检测转染后BGC-823细胞的增殖情况。结果 miR-421在胃癌组织细胞及多种胃癌细胞株中均表达增强(P<0.05);miR-421 mimics转染BGC-823后,癌细胞增殖能力增强(P<0.05),而miR-421 inhibitors转染的BGC-823细胞则增殖力受到明显抑制(P<0.05)。结论 miR-421在胃癌组织细胞及多种胃癌细胞株中均过表达,而miR-421可能直接或间接参与调控BGC-823胃癌细胞的增殖。; 吴建红浦雄勇张弦孙王伟王泽友王建军; 关键词：微RNAS 转染细胞增殖聚合酶链反应

鸟结核分枝杆菌感染巨噬细胞后的外泌体刺激巨噬细胞产生的细胞因子及其蛋白质表达改变被引量：10: 2013年; 目的探讨鸟结核分枝杆菌(M.avium)感染巨噬细胞后分泌的外泌体[(+)外泌体]刺激巨噬细胞后产生的分子免疫机制及其差异蛋白质成分研究。方法冷冻高速离心法收集经鸟分枝结核杆菌感染及未感染的巨噬细胞上清中的外泌体,然后利用外泌体刺激巨噬细胞;ELISA方法检测经外泌体刺激巨噬细胞后细胞上清中IFN-γ、TNF-α的含量;流式细胞术从蛋白水平检测巨噬细胞受外泌体刺激后CD80、CD86蛋白表达情况;2-DE MALDI-TOF/TOF MS技术分析鉴定巨噬细胞受M.avium感染后分泌的外泌体中的差异蛋白。结果 IFN-γ、TNF-α在(+)外泌体刺激巨噬细胞后培养上清中含量增加;CD80、CD86蛋白在巨噬细胞受(+)外泌体刺激后表达上调。外泌体经2-DE MALDI TOF/TOF MS分析获得18个差异蛋白,且质谱成功鉴定12个。结论 (+)外泌体促进巨噬细胞TNF-α、IFN-γ的分泌从而增强巨噬细胞的炎症反应,并且可促进巨噬细胞CD80、CD86蛋白表达增强;筛选出差异蛋白的功能与细胞骨架结构、蛋白质合成与加工,炎症反应密切相关。; 王建军陈偲谢萍芳潘艺谭云洪汤立军; 关键词：巨噬细胞外泌体 AVIUM 2-DE MALDI-TOF TOFMS

外泌体作为诊断结核分枝杆菌感染的标志物研究被引量：4: 2024年; 外泌体(exosome)是一种直径为30~150 nm的囊泡状物质,其通过携载脂质、蛋白质、m RNA和非编码RNA等多种生物活性物质在机体的免疫调节过程以及细胞间的信息传递发挥至关重要的作用。近年来,越来越多的研究发现外泌体积极地参与了结核分枝杆菌感染的发生与发展。外泌体成分作为结核病感染的潜在标志物,拥有特异性强、稳定性好等特点,在结核病的诊断、疗效评估、预后监测中发挥重要的作用。本文针对外泌体作为结核病诊断标志物的价值,及在结核病中的潜在作用进行综述,为其作为诊断标志物提供理论基础。; 王楠吴建红李玉洁郑志焕姚丽洪王建军; 关键词：外泌体结核分枝杆菌标志物

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