王卫芳
- 作品数：14 被引量：25H指数：2
- 供职机构：长春中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 中医院校生物化学实验教学改革，提高学生的实践能力
- 中医药院校要积极推进生物化学实验教学改革，运用多种方式提高、促进学生实践能力、创新能力的提高，培养出社会需要的真正合格的中医药人才。
- 王卫芳
- 关键词：生物化学实验教学中医院校
- 基于LC-MS技术探讨仙鹤草干预非小细胞肺癌A549细胞的代谢组学研究被引量：2
- 2024年
- 本研究应用体外细胞实验分析仙鹤草(Agrimonia pilosa, AP)干预A549细胞后, A549细胞的细胞活力、细胞凋亡、细胞周期的变化,探讨仙鹤草在体外的抗肿瘤活性,同时利用液相色谱-质谱(liquid chromatographymass spectrometry, LC-MS)联用的代谢组学技术分析细胞内代谢物的变化及代谢通路,为研究仙鹤草治疗非小细胞肺癌A549细胞的作用机制提供理论基础和实验依据。实验结果显示随着仙鹤草药物浓度的增加, A549细胞的细胞核发生皱缩,出现明显的凋亡现象;细胞的存活率降低,在低、高剂量条件下抑制率分别达到21.5%、91.74%;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)含量上升(P <0.05)。代谢组学结果显示两组间代谢差异明显,推测出LysoPC(24:0/0:0)、LysoPC(17:0/0:0)和PC(O-40:5)等33个差异代谢物;通路富集发现,中药仙鹤草主要通过调节A549细胞的甘油磷脂代谢、嘌呤代谢等发挥抗肿瘤作用,其中对甘油磷脂代谢通路的影响最为显著。结合药效结果提示,仙鹤草有可能通过调节A549细胞内LysoPC(24:0/0:0)、LysoPC(17:0/0:0)和PC(O-40:5)代谢物,诱导细胞凋亡和抑制A549细胞的生长。
- 同泽华郭文军邹瀚锐徐丽伟徐雅娟王卫芳
- 关键词：仙鹤草代谢组学A549细胞细胞周期
- DNase Ⅱ融合蛋白(PLTD)的表达及其对肿瘤细胞抑制作用的研究
- DNaseⅡ(脱氧核糖核酸酶Ⅱ)是核酸内切酶,可以参与细胞凋亡。为了使DNaseⅡ蛋白具有更好地参与促进肿瘤细胞凋亡的活性,本实验首次构建了LHRH-TAT-DNaseⅡ(PLTD)重组蛋白。其中LHRH可作为导向部分,...
- 王卫芳
- 关键词：DNASEIILHRH抗肿瘤
- 文献传递
- 旋毛虫虫体蛋白对肝癌细胞H7402的抑制作用被引量：14
- 2007年
- 目的:研究旋毛虫虫体蛋白对肝癌H7402细胞的抑制作用,确认其对肝癌细胞的抗肿瘤活性。方法:通过体内、体外培养获得旋毛虫成虫与新生幼虫的混合物,采用匀浆、离心方法制备旋毛虫虫体蛋白,紫外分光光度计检测蛋白浓度。分别设0.035、0.070、0.140 mg/ml与H7402细胞作用为实验组,并设虫体蛋白对正常肝细胞HL-7702细胞作用为对照组,采用MTT检测细胞增殖能力,划痕实验、侵袭实验检测旋毛虫虫体蛋白对H7402的迁移及侵袭能力的影响,采用TUNEL法和流式细胞术分析肿瘤细胞凋亡和细胞周期。结果:成功制备了旋毛虫虫体蛋白。0.035、0.070、0.140 mg/ml旋毛虫虫体蛋白对H7402细胞增殖的抑制率分别为(22.40±13.80)%、(29.45±16.80)%、(39.38±17.80)%。TUNEL实验和流式细胞术可观察到旋毛虫虫体蛋白诱导H7402凋亡,其凋亡率为(39.07±0.90)%,细胞周期阻滞于S期。划痕和侵袭的实验表明旋毛虫虫体蛋白对H7402细胞迁徙能力有抑制作用,对其侵袭的抑制率为(63.79±13.71)%。结论:旋毛虫虫体蛋白对肝癌H7402细胞的增殖、迁移和侵袭具有抑制作用,可能是一个有潜在应用价值的抗肝癌生物制剂。
- 王学林杨世杰吴秀萍于申业叶春艳邓洪宽魏征仁王卫芳王芯蕊刘明远
- 关键词：旋毛虫抗肿瘤抗增殖
- LTD蛋白体外对HeLa细胞毒性的影响
- 2017年
- 目的探讨LTD蛋白在体外对HeLa细胞毒性的影响。方法将不同浓度的LTD蛋白作用于HeLa细胞,光学显微镜下观察细胞形态等变化,MTT法检测细胞增殖情况,激光共聚焦显微镜观察蛋白在细胞内的定位,HE染色和TUNNEL试剂盒检测细胞凋亡情况。结果 LTD蛋白对HeLa细胞具有毒性作用,能抑制细胞增殖,引起细胞凋亡。随着蛋白浓度的增加及作用时间的延长,HeLa细胞凋亡现象明显,生长抑制作用增强,蛋白浓度与细胞A_(490)值之间明显相关;且LTD由定位于细胞膜变为定位于胞浆和细胞核。结论 LTD蛋白促进HeLa细胞凋亡,对其增殖具有明显的抑制作用。
- 王卫芳刘明远吴广谋吴秀萍
- 关键词：HELA细胞细胞毒性
- 促黄体激素释放激素及其受体的研究进展被引量：2
- 2010年
- 对促黄体激素释放激素及其受体的结构、分布、功能以及研究现状进行了阐述,归纳了促黄体激素释放激素的主要功能。促黄体激素释放激素及其类似物LHRH激动剂和拮抗剂临床上主要用于闭经的治疗、不孕症的诱发排卵治疗、子宫内膜异位症及妇科肿瘤等治疗。促黄体激素释放激素的结构和分布特点对于进一步研究促黄体激素释放激素及其类似物抑制肿瘤、导向传递药物治疗癌症方面有重要的意义。
- 王卫芳
- 关键词：肿瘤治疗
- 小鼠脱氧核糖核酸酶Ⅱα融合基因的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2016年
- 目的原核表达LHRH-TAT-DNaseⅡα融合基因(LTD),并制备多克隆抗体。方法采用PCR法克隆LTD基因片段,插入p ET-28a载体,构建重组原核表达质粒p ET-28a-LTD,转化大肠埃希菌BL21(Rossetta),经IPTG诱导表达。融合蛋白经电洗脱分离纯化后,免疫獭兔,制备LTD蛋白多克隆抗体,采用ELISA法检测抗血清效价。结果构建的重组原核表达质粒经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确;纯化得到的融合蛋白相对分子质量为39 270,浓度为0.5 mg/ml,可被兔抗LTD抗体识别。血清抗体效价可达1∶6 400。结论成功原核表达了DNaseⅡ融合蛋白LTD,并制备了多克隆抗体,为进一步研究DNaseⅡ蛋白体内外抗肿瘤活性及作用机制奠定了基础。
- 王卫芳刘明远吴广谋吴秀萍
- 关键词：融合基因原核细胞基因表达多克隆抗体
- 猪肌生成抑制素功能区编码基因的原核表达及纯化
- 肌生成抑制素是骨骼肌生长、分化的负调控因子,它的相关研究在畜牧生产、动物遗传育种以及临床治疗肌肉消耗和衰竭方面具有重要的潜在应用价值。根据猪肌生成抑制素基因全序列同源部分设计2条引物,PCR扩增出330bp的肌生成抑制素...
- 王卫芳
- 关键词：肌生成抑制素基因克隆原核表达
- 文献传递
- 鼠脱氧核糖核酸酶(DNase Ⅱα)基因的克隆及原核表达
- 2009年
- 根据鼠脱氧核糖核酸酶Ⅱ(DNaseⅡ)基因设计引物,通过RT-PCR扩增出鼠DNaseⅡα基因片段,克隆到pMD-18T载体,然后转化至大肠杆菌JM109。经鉴定及序列测定,克隆基因与鼠DNaseⅡα基因序列完全一致,大小为1 008 bp。将重组质粒pMD-DNaseⅡα进行酶切后连接到原核表达载体pET-28a中,重组质粒经PCR和双酶切鉴定及序列分析正确后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE检测,然后进行初步纯化,Western-blot鉴定。结果表明,本试验成功构建了pET-28a-DNaseⅡα表达载体;表达产物以包涵体形式存在,相对分子质量约为38 800;初步纯化的目的蛋白在SDS-PAGE图谱上呈单一条带,Western-blot鉴定能与抗体发生特异免疫反应。
- 王卫芳刘明远欧阳红生吴秀萍王学林刘玛峰杨勇孙磊王子见张瑞于艳玲
- 关键词：克隆原核表达
- 白英提取物抑瘤有效成分的初步筛选被引量：4
- 2018年
- 目的从分离白英水提液得到的不同组分中筛选抑瘤作用的主要有效成分,对不同肿瘤细胞体外增殖的抑制作用进行验证,为研究其诱导细胞凋亡机制奠定基础。方法选取人宫颈癌细胞He La、人胃癌细胞BGC-823细胞为研究对象,用阳性对照药(5-Fu)及白英不同组分进行干预。CCK-8法检测药物抑瘤率,并计算IC50值,比较组间药效强度。HE、AO/EB染色及镜下观察给予不同浓度药物处理时细胞数目、形态和细胞凋亡情况的变化。结果白英提取物不同组分均有一定的抗肿瘤作用,其中皂苷元的抑瘤作用最强,以中剂量(0.067 6 mg/mL)效果最好,对2种肿瘤细胞抑瘤率分别达到86.21%和88.92%。结论白英提取物具有抑制肿瘤细胞增殖的活性,能诱导肿瘤细胞凋亡,实验组与阳性对照组比较,差异无统计学意义。
- 王卫芳刘悦刘悦杨唐张迪徐雅娟
- 关键词：抑瘤作用
