潘晓彦
- 作品数:5 被引量:10H指数:2
- 供职机构:南方医科大学药学院更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学理学更多>>
- 人钙联蛋白S100A8原核表达载体的构建及表达
- 2013年
- 目的:构建人钙联蛋白S100A8的原核表达栽体并进行蛋白表达及纯化,以便进一步研究。方法:从人单核巨噬细胞THP-1中提取总RNA,逆转录后进行PCR,得到目的基因,与TA克隆栽体pMD-T进行连接,得到pMD-S100A8质粒,经BamHI和XhoI双酶切产物或者PCR产物双酶切后,与大肠杆菌pGEX一6P-1表达载体进行连接,得到pGEX-S100A8重组质粒。重组质粒转入E.coliBL21(DE3)表达菌进行蛋白表达。融合GST蛋白用GST柱纯化,冷冻干燥,进行下一步研究。结果:成功构建了TA克隆质粒pMD-S100A8及阳性pGEX-S100A8重组质粒,成功诱导蛋白的原核表达。结论:纯化得到的蛋白为进一步研究S100A8钙联蛋白的结构和功能提供了参考。
- 潘晓彦赵伟李琳刘叔文谭穗懿
- 关键词:S100A8质粒构建纯化
- 人钙联蛋白S100A8/S100A9原核载体的构建与表达
- 目的:构建人钙联蛋白S100A8/S100A9的原核表达载体并进行蛋白表达及纯化,以作进一步研究.方法:从人单核巨噬细胞THP-1中提取总RNA,进行RT-PCR,得到目的基因,与TA克隆载体PMD进行连接,得到PMD-...
- 潘晓彦赵伟谭穗懿
- 关键词:原核表达载体
- 文献传递
- 狼毒大戟提取物通过NF-κB通路激活潜伏HIV被引量:6
- 2015年
- 目的研究狼毒大戟提取物对潜伏HIV激活的影响,探讨其激活潜伏HIV可能的机制以及清除HIV的作用。方法取新鲜狼毒大戟植物根部组织,液氮速冻并粉碎成末,冷冻干燥3 d后称取少量,采用丙酮一步法提取并浓缩。以甲醇-水为流动相,采用HPLC反相C18柱分离,并通过MS鉴定后,得到狼毒大戟提取物(EFE)。以潜伏HIV细胞系J-Lat 10.6为激活模型,以TNF-α(10 ng/m L)作为阳性对照,EFE(50μg/m L)处理24 h后,采用FACS分析GFP阳性率以观测激活活性。采用不同浓度NF-κB抑制剂(Bay 11-7082)抑制EFE活性,并用WB检测2 h内p65入核水平,以及24 h内HIV蛋白p24随时间点变化情况。结果丙酮一步法可简便快速从狼毒大戟植物中提取得到EFE,经鉴定含prostratin及其类似物,分离后测得其中prostratin浓度为0.53 mmol/L。EFE(50μg/m L)作用24 h可产生约50%激活潜伏HIV活性,同时HIV蛋白p24水平随时间显著增加。进一步研究发现NF-κB通路抑制剂(Bay 11-7082)可对EFE活性产生浓度依赖抑制作用,且2 h内胞核p65水平在EFE作用下增加明显。结论狼毒大戟提取物EFE含有效成分prostratin及其类似物,可产生较强激活潜伏HIV活性,其机制为通过激活NF-κB通路促进p65入核从而发挥作用。
- 潘晓彦张明娇曾晓云林健李琳李珉珉赵伟
- 关键词:NF-ΚB狼毒大戟
- HIV治愈:潜伏HIV的清除及其策略被引量:4
- 2015年
- HIV的感染造成机体免疫系统损害,最终引发艾滋病(AIDS),导致全球每年数百万人死于HIV感染引发的肿瘤及感染。高效抗逆转录病毒疗法(HAART)应用于早期感染的患者,可有效抑制HIV的感染,从而避免病毒血症的暴发。但HIV初次感染的不可察觉性和潜伏期,给HIV的预防及治疗带来非常大的难度。除此之外,HIV的整合后潜伏目前,被认为是实现HIV治愈最大的障碍。本文就如何将整合后潜伏的病毒从机体彻底清除,从而实现HIV的根本治愈,并对近年来相关研究的进展进行综述。
- 刘叔文潘晓彦赵伟
- 关键词:激活剂
- 白藜芦醇对潜伏HIV的激活效应及其机制研究
- 目的:研究白藜芦醇对潜伏HIV的激活效应及其可能的作用机制.方法:以J-Lat A2细胞为主要研究对象,运用流式细胞术检测白藜芦醇激活潜伏HIV的效果及其与其他经典潜伏激活剂(prostratin、SAHA及JQ1)的合...
- 曾晓云潘晓彦林健许鑫峰刘叔文
- 关键词:白藜芦醇T细胞活化组蛋白乙酰化