李晨
- 作品数：66 被引量：204H指数：8
- 供职机构：山西大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省回国留学人员科研经费资助项目山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学农业科学文化科学更多>>
- 一种重组蛋白的表达、纯化及应用综合实验设计及实践被引量：4
- 2020年
- 该文将科研项目成果与教学紧密结合,在生化分析与技术实验教学中设计了“一种重组蛋白的表达、纯化及应用”综合性实验项目。该实验设计有助于学生掌握本课程的多种技术与方法,如细胞破碎方法、亲和层析、凝胶过滤、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及一种亲和材料的制备方法。该文探索了将科学研究、实际应用与本科实验教学有机结合的一种途径,有助于培养学生的科研兴趣,通过文献查阅、实验设计、论文撰写及教学探讨等提高学生的综合能力、创新能力及科研能力。
- 李晓玲李晨
- 关键词：实验教学
- 盐肤木查尔酮异构酶的克隆、表达及特性分析被引量：8
- 2019年
- 黄酮类化合物是药用植物盐肤木Rhus chinensis中主要的功能成分,具有多种药理活性,广泛用于疾病治疗和食品保健等领域。查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI,EC 5. 5. 1. 6)是黄酮类化合物生物合成途径的关键酶。该研究通过RTPCR及rapid-amplification of c DNA Ends (RACE)技术克隆了盐肤木查尔酮异构酶(命名为Rc CHI)全长c DNA序列共1 058bp,包含738 bp的开放阅读框,编码245个氨基酸。序列分析表明,Rc CHI与其他植物CHI序列相似性在47. 1%~71. 6%,属于Ⅰ型CHI。通过实时荧光定量PCR检测发现盐肤木不同组织总黄酮含量与Rc CHI的mRNA表达呈正相关。进一步构建原核表达载体p GEX-6P-1-RcCHI并转化大肠杆菌BL21,成功获得了重组Rc CHI的高效可溶表达。该研究为利用基因工程菌株进行黄酮类化合物的生物合成奠定了基础。
- 杨晓月王景李晨任竹梅马文丽
- 关键词：盐肤木查尔酮异构酶分子克隆
- 一种新型胰凝乳蛋白酶抑制剂的原核表达及稳定性研究
- 2025年
- 目的:对荞麦胰蛋白酶抑制剂进行分子改造,获得一种具有良好稳定性的新型Potato I型胰凝乳蛋白酶抑制剂(buckwheat chymotrypsin inhibitor,BCI),为开发蛋白酶吸附剂配体等奠定基础。方法:通过定点突变技术对荞麦胰蛋白酶抑制剂关键活性位点进行突变,经过转化、优化诱导表达条件及亲和纯化制备出BCI,进一步测定BCI对胰凝乳蛋白酶的抑制活性,分析其对热和酸碱的耐受性。结果:成功构建了pQE30-BCI突变体质粒,经优化后确定最佳诱导条件为IPTG(isopropyl-β-d-thiogalactoside)终浓度0.4 mmol/L,诱导时间3.5 h;使用Ni^(2+)-NTA琼脂糖磁珠纯化后,从1 L培养液中可获得18.3 mg电泳纯级别的BCI;该抑制剂对胰凝乳蛋白酶具有较高的抑制活性,半抑制浓度为2.81μmol/L;BCI具有良好的热稳定性和酸碱稳定性,沸水浴加热1 h或在pH 2.0~12.0处理1 h后,BCI的抑制活性未发生明显改变;10 mmol/L的Mg^(2+)、H2O2和KSCN对BCI的活性无显著影响,Zn^(2+)及异丙醇、二甲基乙酰胺则对BCI有抑制作用;荧光光谱分析结果显示,Zn^(2+)通过静态猝灭减弱BCI的内源荧光,两者之间存在直接结合,化学计量结合比约为1∶1,静电相互作用是驱动结合的主要作用力。结论:通过定点突变技术获得了一种具有良好稳定性的新型胰凝乳蛋白酶抑制剂,拓展了Potato I型蛋白酶抑制剂的结构-功能关系研究,为其进一步开发应用提供了理论依据。
- 史正文李文婕李晨
- 关键词：稳定性荧光光谱定点突变
- 一种胰蛋白酶亲和材料及其制备方法与应用
- 本发明属于胰蛋白酶技术领域，具体涉及一种胰蛋白酶亲和材料及其制备方法与应用。所述胰蛋白酶亲和材料的制备方法包括如下步骤：以Fe<SUB>3</SUB>O<SUB>4</SUB>磁性粒子和盐酸多巴胺为原料，制备得到磁性纳米...
- 李晨崔晓东李娇王朝霞陈兰馨
- 一种重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂突变体以及胰蛋白酶亲和材料
- 本发明公开了一种重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂BTI突变体，命名为e‑BTI，其特征在于，根据BTI的基因序列，设计突变引物，对BTI的S41T以及P44T位点进行突变得到。本发明制得的e‑BTI热稳定性明显高于BTI，而且显...
- 李晨崔晓东李娇
- 文献传递
- 荞麦胰蛋白酶抑制剂的原核表达及纯化被引量：5
- 2007年
- 根据文献报道的荞麦胰蛋白酶抑制剂的氨基酸序列及本研究室先前已获得的部分基因序列设计引物,经过RT-PCR扩增,获得荞麦胰蛋白酶抑制剂编码区基因全序列.将该基因克隆到原核表达载体pQE-31中,并转化至大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达获得可溶性目的蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的25%.该目的蛋白经Ni2+-NTA柱亲和纯化,SDS-PAGE分析显示,在大约9kD处出现明显的目的条带,与预计蛋白分子量大小一致.Western blot鉴定证实,目的蛋白N端带有6个组氨酸标签.活性测定表明,目的蛋白具有专一性的胰蛋白酶抑制剂活性,抑制活性约为77U/mg纯化蛋白.本实验为进一步研究荞麦胰蛋白酶抑制剂结构与功能的关系奠定了基础.
- 李玉英张政李晨王转花
- 关键词：荞麦胰蛋白酶抑制剂抑制活性
- 环境规制、市场竞争与全要素生产率
- 李晨
- 过氧化物酶的固定及同工酶鉴定综合实验设计被引量：1
- 2024年
- 酶学原理及应用是生物化学课程的一个重点和难点内容,具有很强的理论性和实用性。为了提高学生对酶学知识的综合理解及应用能力,在生物化学实验教学中设计了“过氧化物酶的固定及同工酶鉴定”综合性实验项目。该综合实验将酶的重点内容进行了有机整合,着重设计了酶的制备、活性测定、酶学性质(米氏常数及稳定性)表征、酶的固定化和同工酶鉴定5个实验环节。通过深度参与、统筹实施,提升学生分析及解决实际问题的能力,取得了很好的教学效果。
- 李晨谭宗花杨晓月李娇
- 关键词：生物化学固定化
- 食品科学与工程专业实践教学改革探索被引量：3
- 2016年
- 在本科生大规模扩招形势下,就食品科学与工程专业人才培养进行探索。从课程内容、师资队伍、资源配制、创新项目、实训基地等方面进行改进,加强高校实践教学,培养学生的动手能力和创新能力,以适应现代食品行业对人才的需求,更好地服务于社会。
- 李晨张锦华范三红
- 关键词：食品科学与工程实践教学
- 重组荞麦胰蛋白酶抑制剂理化性质的研究被引量：6
- 2006年
- 荞麦胰蛋白酶抑制剂(BuckwheatTrypsinInhibitor,BTI)是存在于荞麦种子中的一种抗营养因子。本文经过原核表达及两步层析纯化得到高纯度的重组荞麦胰蛋白酶抑制剂rBTI。通过分析表明,重组荞麦胰蛋白酶抑制剂与天然荞麦胰蛋白酶抑制剂的性质类似。rBTI的相对分子质量约为11kDa,等电点约为6.2。rBTI对胰蛋白酶有较强的抑制作用,抑制摩尔比(以BApNA为底物)为1:1.5。rBTI的最适pH值为8.0,在pH3.0～8.0之间有较好的热稳定性,100℃加热120min仍保持70%的胰蛋白酶抑制活性。
- 李晨张政李玉英王转花
