李冰香
- 作品数：13 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 一种检测血清中抗EV‑D68病毒抗体的方法
- 本发明公开了一种检测血清中抗EV‑D68病毒抗体的方法。提取EV‑D68病毒基因组RNA，通过反转录和PCR扩增反应得到VP1基因的cDNA，将其克隆到克隆载体，再将转入表达载体得到重组表达质粒，转化宿主菌并用IPTG诱...
- 刘龙丁郑惠文孙明王晶晶郭磊李冰香龙海亭李洪哲范海涛杨泽宁储曼曼黄星
- 文献传递
- 一种抗水痘-带状疱疹病毒单克隆抗体及其应用
- 本发明提供了一种抗水痘‑带状疱疹病毒单克隆抗体及其应用，涉及单克隆抗体筛选和制备技术领域，更具体的说是一种通过重组水痘‑带状疱疹病毒gE三聚体蛋白疫苗免疫小鼠，并通过杂交瘤方式筛选和制备抗水痘‑带状疱疹病毒单克隆抗体，以...
- 孙明王红叶陈硕史荔姚宇峰李冰香朱小永黄宇杭郭馨文杨欢
- 浅析制药企业中验证管理工作的开展
- 2011年
- 制药企业验证管理意义重大，但在执行中面临执行力度不够等方面的问题，可以从加强培训，强化管理，强化监督等方面推动验证管理工作的深入。
- 李冰香
- 肠道病毒EV-D68表面结构蛋白VP2、VP3的原核表达及其特异性分析
- 2018年
- 目的原核表达肠道病毒68型(enterovirus D68,EV—D68)表面结构蛋白VP2、VP3,分析其亲和力和结合力,得到具备高结合力的、可结合特异性记忆性B细胞的EV-D68病毒表面结构蛋白。方法采用PCR法扩增EV-D68病毒的VP2、VP3蛋白基因,插入原核表达载体pGEX-5X-1,构建重组表达质粒pGEX-5X-1-VP2和pGEX-5X-1-VP3,转化到工程菌Rosetta(DE3)pLy中,异丙基硫代半乳糖苷(i-sopropyl β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,表达的重组蛋白形成包涵体,经超声洗涤、透析复性;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel immunosorbent,SDS-PAGE)电泳、westem-blot鉴定重组蛋白;竞争性酶联免疫吸附检测(eIlzyme linked immunosorbent assay,EusA)检测蛋白VP2、VP3的蛋白活性和亲和力;藻红蛋白荧光素(phycoeryth面,PE)标记VP2和VP3重组蛋白,结合CD19-APC、CD27-nTc抗体,流式细胞术检测VP2、VP3蛋白结合特异性记忆性B细胞的情况。结果成功构建出重组表达质粒pGEX-5X-1-VP2和pGEX-5X-1-VP3,通过双酶切鉴定及测序分析,确认表达载体构建正确,通过表达纯化,成功获得EV-D68的VP2、VP3蛋白,SDS-PAGE电泳灰度扫描显示,VP2蛋白的纯度可达80%,VP3蛋白的纯度可达75%;经westem-blot和EusA鉴定,均有抗原特异性;通过竞争EusA检测,VP2亲和力常数为2.7×10^7M^-1,为中等亲和力;VP3亲和力常数为3.25×10^6M^-1,为低亲和力;通过流式细胞术可以检测到病毒攻击小鼠后脾脏细胞中的特异性记忆性B细胞。结论成功原核表达,复性纯化得到EV-D68VP2、EV-D68VP3蛋白,两个蛋白均具有较强的抗原特异性,利用流式细胞仪能检测到特异性记忆性B细胞。最终获得了具有较强结合能力,可用于分选抗原特异性记忆性B细胞的EV-D68表面结构蛋白VP2、VP3,为研究VP2、VP3蛋白的中和抗原表位及其广谱中和抗体的分选检测打下了基础。
- 龙海亭孔璟郑惠文李冰香张寒李恒刘玉斌范海涛于丽廖国阳孙明刘龙丁
- 关键词：VP2蛋白VP3蛋白原核表达
- HIV1型C/B亚型DNA、MVA疫苗免疫原性和免疫策略研究
- 研究背景:HIV的基因组中含有gag、pol和env等基因,gag基因为组成病毒核心的核酸核蛋白的编码,pol基因为复制逆转录酶的编码,其编码的蛋白是联接包膜与核心的跨膜蛋白,这些基因编码蛋白在各种类型的艾滋病毒中是一致...
- 孙明蒋国润周东霞王玺李冰香黄小琴史荔褚嘉祐
- 关键词：免疫原性免疫策略DNAMVA
- 文献传递
- SARS相关冠状病毒通用抗原及其制备方法和应用
- 本发明提供了SARS相关冠状病毒通用抗原及其制备方法和应用，属于免疫技术领域。本发明制备的候选抗原对S309抗体和检测血清结合活性较高，使用候选抗原免疫小鼠得到的血清的效价对VOCs的交叉结合活性高于模板抗原免疫血清；同...
- 孙明姚宇峰史荔王红叶李静雯李冰香朱小永杨友王圣滢黄宇航
- 基于受体结合域的新型冠状病毒亚单位疫苗的研发策略
- 2023年
- 2019年底由新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒感染疫情暴发,为预防病毒感染,降低病毒的感染率,减少重症率及死亡病例,各国持续加快推进多种类型的疫苗研发及接种。其中,蛋白亚单位疫苗以其安全、高效、可规模化生产等优点,受到了广泛的关注。截至2023年初,全球共有36种亚单位疫苗进入Ⅲ期临床研究,19种亚单位疫苗已被授权紧急使用。本文通过分析比较新型冠状病毒不同蛋白组分作为新型冠状病毒疫苗靶点设计的优缺点,聚焦基于受体结合域(receptor binding domain,RBD)的亚单位疫苗设计策略,从蛋白结构、表达系统、纯化方法、佐剂类别及预防效果等方面,对不同的RBD亚单位疫苗的研究进展及临床结果进行了概述,并对RBD亚单位疫苗开发中可能遇到的挑战进行了探讨,以期为新型冠状病毒及其他病原体亚单位疫苗的设计研发提供可行思路。
- 马良李冰香王红叶孙明
- 关键词：新型冠状病毒佐剂
- 一种利用高密度CHO-S细胞无血清培养表达制备双因子抗体的方法
- 本发明公开了一种利用高密度CHO‑S细胞无血清培养表达制备双因子抗体的方法，包括以下步骤：S1：首先从液氮中取出装CHO‑S细胞离心管，并在37℃水浴中快速解冻；S2：将CHO‑S细胞离心管完全解冻后，再用70％乙醇清洁...
- 孙明王红叶李冰香朱小永
- 文献传递
- HIV-1 C/B’亚型多价重组MVA病毒疫苗免疫原性的研究
- 2008年
- 目的:检测人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)C/B’亚型与痘苗病毒安卡拉株(MVA)的多价重组疫苗的免疫原性,此疫苗中包含HIV-1C/B’CRF株的5个基因,分别是env,gag,pol,nef,tat。方法:设105pfu/ml,106pfu/ml,107pfu/mlADMVA3个剂量组,用ELISPOT方法检测细胞免疫反应。同时,以Gag蛋白作为包被抗原,使用间接ELISA的方法检测体液免疫反应。结果:免疫后的小鼠对插入基因env,gag,pol和nef所表达蛋白均产生了特异性细胞免疫应答,且免疫效果与免疫剂量呈正相关。ELISA结果表明,MVA重组疫苗免疫诱导产生了特异性体液免疫,抗HIV-1Gag的抗体滴度与免疫次数和免疫剂量都存在正相关性。结论:多价MVA重组疫苗能有效地诱导小鼠产生特异的细胞免疫和体液免疫反应。
- 高燕孙明蒋国润张银川王玺李冰香黄小琴陈丹周东霞褚嘉祐
- 关键词：HIV-1免疫原性
- 抗HIV痘苗病毒载体(MVA)生产及纯化工艺的研究
- 研究背景:MVA是一种宿主自限性的病毒株,来自疫苗病毒Ankara株,是痘苗病毒科正痘病毒属成员,是目前已知结构最为复杂的病毒之一,其在鸡胚成纤维细胞(CEF)中进行多代次传代后,失去了包括宿主决定基因在内的大量DNA片...
- 孙明李冰香王玺蒋国润张银川黄小琴史荔周东霞褚嘉祐
- 关键词：痘苗病毒载体纯化工艺HIVMVA
- 文献传递
