宋娜
- 作品数:8 被引量:36H指数:3
- 供职机构:西北农林科技大学更多>>
- 发文基金:高等学校学科创新引智计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 向日葵黑茎病病原菌分离鉴定及快速检测体系的建立
- 向日葵黑茎病菌引起向日葵茎斑、叶斑、叶枯、花盘腐烂、茎折倒伏等症状,造成向日葵严重减产及含油率降低,甚至绝收,是一种毁灭性病害。新疆伊犁河谷地区出现了一种危害严重、扩展迅速的向日葵病害,导致向日葵大面积死亡,造成了严重的...
- 宋娜
- 关键词:特异性引物RDNA-ITS向日葵黑茎病
- 文献传递
- 苹果树腐烂病菌GTP-环化水解酶II基因敲除载体构建及其突变体的表型分析被引量:16
- 2014年
- 【目的】利用反向遗传学方法构建苹果树腐烂病菌(Valsa mali)中表达GTP-环化水解酶II基因Vmgtp1的敲除载体,通过同源重组的方法进行基因敲除分析目标基因的功能,为全面解析苹果树腐烂病菌致病的分子机制奠定基础,并为有效控制苹果树腐烂病的方法技术和药剂研制提供理论依据。【方法】通过对笔者实验室苹果树腐烂病菌转录组数据的分析比对得到GTP-环化水解酶II基因Vmgtp1(暂命名),该基因在接种5 d后,在病组织中表现出一定的上调表达,推测该基因可能与苹果树腐烂病菌致病相关。采用Double-joint PCR方法,将目标基因Vmgtp1的上游片段UP、下游片段DOWN及筛选标记潮霉素磷酸转移酶基因(hph)进行片段融合。对得到的PCR产物及质粒pHIG2RHPH2-GFP-GUS进行双酶切,通过T4连接酶,将片段UP-HPH-DOWN连接到质粒pHIG2RHPH2-GFP-GUS上,转化到JM109菌株中,挑取阳性克隆,提取质粒,得到含有hph的Vmgtp1敲除载体,再利用PEG介导的遗传转化获得抗潮霉素的突变体,然后用4对引物对突变体进行PCR检测及Southern Blot验证得到敲除突变体,最后对敲除突变体及野生型菌株03-8进行菌落颜色、菌落大小、繁殖体产生情况等表型分析和接种在离体苹果烫伤枝条上观察病斑大小的致病性检测,对检测数据用SPSS软件进行差异显著性分析。【结果】通过上述方法成功构建了表达GTP-环化水解酶II基因的Vmgtp1敲除载体,并利用PEG介导的遗传转化方法在苹果树腐烂病菌中进行了转化,共获得101个能够在含潮霉素PDA培养基上生长的突变菌株,经过PCR及Southern Blot对101个突变菌株进行分析验证,得到1个敲除突变体,编号为ΔVmgtp1-90。在PDA培养基上,敲除突变体ΔVmgtp1-90与野生型菌株03-8相比,ΔVmgtp1-90菌落平均生长速率为11.33 mm·d-1,03-8平均生长速率为24.67 mm·d-1,突变体菌落生长速率明显变慢,颜色变浅,气生菌丝稀疏;ΔVmgtp1-90�
- 宋娜戴青青黄丽丽韩青梅韩青梅
- 关键词:同源重组PEG
- 苹果树腐烂病菌4个多聚半乳糖醛酸酶基因功能的初步研究
- 苹果树腐烂病菌(Valsa Mali.)引起的苹果树腐烂病给我国苹果生产造成了严重的威胁。目前虽然对该病害防控的关键技术进行了大量的研究,但是并没有从本质上解决该病害的防控问题。了解病菌致病相关基因,进而从分子水平研究其...
- 宋娜
- 关键词:苹果树腐烂病菌果胶酶多聚半乳糖醛酸酶基因敲除
- 文献传递
- 还原型聚合物载药纳米颗粒的制备及体外性能研究
- 在药物输送系统的研究中,还原型载药纳米颗粒可利用细胞内外显著的还原性差异,选择性的在细胞内高效释放药物,具有提高药物的生物利用率和降低毒副作用的优势。因此,合成具有还原环境敏感性同时具有生物相容性的聚合物材料,并利用其制...
- 宋娜
- 关键词:还原性紫杉醇
- 文献传递
- 苹果黑腐皮壳菌G蛋白-cAMP-PKA信号通路相关基因的功能研究
- 由苹果黑腐皮壳菌(Valsa mali)引起的苹果树腐烂病,是苹果上的一种毁灭性真菌病害。一旦病菌侵入到苹果树枝干的韧皮部和木质部,生产上只能利用外科手术及化学药剂进行防治,但是化学药剂由于很难达到树皮和树干深层,无法很...
- 宋娜
- 关键词:苹果树腐烂病生长速率
- 文献传递
- 苹果树腐烂病菌两个多聚半乳糖醛酸酶基因功能的初步研究
- 苹果树腐烂病是由黑腐皮壳属真菌Valsa mali 引起的枝干皮层腐烂病害,前期研究发现果胶酶可能在病菌致病过程中起重要作用.多聚半乳糖醛酸酶是一类重要的果胶酶,转录组显示Vmpg7、Vmpg8 是侵染过程中上调表达最高...
- 许春景吴玉星戴青青宋娜黄丽丽
- 关键词:苹果树腐烂病多聚半乳糖醛酸酶基因敲除致病力
- 向日葵黑茎病菌的快速分子检测被引量:15
- 2012年
- 从新疆采集的向日葵黑茎病罹病植株的茎秆、叶片和花盘共分离获得20个真菌分离物。经致病性测定,证明分离物XJ011和XJ111是引起该病害的病原物。采用ITS通用引物ITS1/ITS4对XJ011和XJ111菌株的rDNA-ITS区进行PCR扩增和测序,并结合形态学特征,将该菌鉴定为麦氏茎点霉Phoma macdonaldii。同时,在rDNA-ITS的多态性丰富区域设计了一对特异性引物320FOR/320REV,建立了P.macdonaldii病菌的快速分子检测体系,能特异性检测出向日葵黑茎病菌,灵敏度可达到1fg。
- 宋娜陈卫民杨家荣胡小平
- 关键词:特异性引物向日葵
- MircoRNA156家族在小麦非生物胁迫中的表达分析被引量:5
- 2013年
- MircoRNA(miRNA)作为一类20碱基左右的非编码RNA,它在转录水平调控基因的表达,在植物抗逆境胁迫的调节网络中发挥了重要作用。通过对小麦miRNAs的研究,可以扩展小麦抵抗自然灾害的途径,减少损失。有报道表明miRl56作为保守的miRNA在多种植物中参与到抗逆反应,
- 王冰宋娜孙燕飞冯浩王晓杰康振生
- 关键词:非生物胁迫小麦MIRNAS家族调控基因转录水平