黄秀芳
- 作品数：33 被引量：97H指数：4
- 供职机构：江门市中心医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金广东省江门市科技计划项目江门市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 抑癌基因p14ARF对顺铂诱导的骨肉瘤细胞凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨抑癌基因p14ARF对顺铂诱导的骨肉瘤细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 在不表达p14ARF的MG63细胞（p53突变）中稳定转染pcDNA3.1-p14ARF质粒,构建稳定表达株MG63-ARF;经反向聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹法鉴定;使用顺铂处理MG63和MG63-ARF细胞,通过MTT法测定细胞生长抑制和IC50;采用流式细胞术和Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡;采用免疫印迹检测p53、Bax、p21、Mdm2、Fas、Caspase-3、Caspase-9、PARP的表达;通过RNA干扰进行p53的表达沉默.采用Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK预处理各组细胞,检测该作用是否依赖Caspase-9.结果 mRNA和蛋白水平,MG63和MG63-vec细胞未见p14ARF表达,MG63-ARF细胞可见p14ARF的高表达.经顺铂处理72 h后,细胞活力在MG63、MG63-vec和MG63-ARF组为84.2％±4.3％、80.8％±4.3％和58.9％±5.4％,IC50值为（11.1±0.6）、（10.7±0.9）、（7.2±0.7） μmol/L,（P＜0.05）.流式细胞术显示MG63、MG63-vec和MG63-ARF组经顺铂处理72 h的凋亡率为：13.6％、18.5％和35.9％.荧光染色表明MG63-ARF细胞相对出现更多更明显的凋亡,在MG63-ARF还出现了更明显的Caspase-3,9和PARP的活化裂解.在顺铂处理的MG63-vec和MG63-ARF细胞中,p53、Bax、p21、Mdm2、Fas的表达无任何改变.在U2OS-vec和U2OS-ARF细胞中转染p53-siRNA明显减弱了p53的表达,再经顺铂处理72 h后,U2OS-vec细胞的转染空白组、转染对照siRNA组和转染p53-siRNA组细胞活力差异无统计学意义（P＞0.05）,U2OS-ARF细胞的转染空白组、转染对照siRNA组和转染p53-siRNA组细胞活力差异无统计学意义（P＞0.05）.Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK预处理后,Z-LEHD-FMK、顺铂、顺铂＋Z-LEHD-FMK组细胞活力为：96.8％±3.6％、54.1％±5.8％和89.5％±5.1％.结论 p14ARF可通过p53非依赖Caspase-9依赖性途径增强顺铂诱导的骨肉瘤MG63细胞凋亡,该作用与内源性线粒体凋亡通路有关.
- 黄秀芳原向伟陈忠羡梁胜根
- 关键词：骨肉瘤顺铂
- p14ARF增强顺铂诱导的骨肉瘤U2OS细胞凋亡的研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨p14ARF对顺铂诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡的影响及其机制,为提高骨肉瘤化疗敏感性提供依据。方法在不表达p14ARF的U2OS细胞中稳定转染pcDNA3.1-p14ARF质粒,构建稳定表达株;采用RT-PCR和Western blot法鉴定其表达;台盼蓝拒染法测定生长抑制作用;Hoechst33258荧光染色检测凋亡;Western blot法检测Caspase-3,9和PARP的表达和活化。结果 mRNA和蛋白水平,U2OS和U2OS-vec细胞未见p14ARF表达,U2OS-ARF细胞可见p14ARF的高表达;p14ARF单独对U2OS细胞的生长无影响,但顺铂(5μM)处理72小时后,U2OS-ARF细胞的生长抑制率明显高于U2OS和U2OS-vec细胞,相对于U2OS和U2OS-vec细胞,U2OS-ARF细胞不仅表现更为明显的凋亡形态学变化,还明显出现了Caspase-3,9和PARP的活化裂解。结论 p14ARF能够增强顺铂诱导的骨肉瘤U2OS细胞毒作用和凋亡,通过激活Caspase-PARP级联活化,提高骨肉瘤U2OS细胞对顺铂的敏感性。
- 原向伟廖威明黄秀芳梁胜根陈忠羡范全秦英朱孝峰
- 关键词：顺铂骨肉瘤细胞凋亡化疗敏感性
- PICC置管结合奥伦自理模式在胃肠癌行5-FU泵化疗患者中的应用被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨经外周穿刺中心静脉置管(PICC)结合奥伦自理模式在胃肠癌行5-氟尿嘧啶(5-FU)泵化疗患者中的应用效果。方法:选取2019年1月1日~8月31日行5-FU泵化疗的46例胃肠癌患者为对照组,采取PICC常规护理;选取2019年9月1日~2020年6月30日行5-FU泵化疗的42例胃肠癌患者为观察组,采取奥伦自理模式护理;比较两组自护能力[采用自我护理能力测定量表(ESCA)]、疾病健康知识掌握情况、置管并发症发生率、舒适度(采用Kolcaba舒适度量表)和护理满意度评分。结果:护理后,两组ESCA评分均高于护理前(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05);观察组疾病健康知识掌握程度评分高于对照组(P<0.05);化疗期间,观察组渗血发生率低于对照组(P<0.05);观察组舒适度量表中心理、精神维度评分和总分均高于对照组(P<0.05);观察组护理满意度评分均高于对照组(P<0.05)。结论:使用PICC置管结合奥伦自理模式对滴注5-FU泵进行化疗的胃肠癌患者实施护理,可提高患者自护能力、疾病健康知识掌握程度和舒适度,减少渗血的发生,提高患者护理服务满意度。
- 温棉棉黄秀芳
- 关键词：外周中心静脉置管奥伦自理模式化疗泵胃肠癌
- α干扰素增强骨肉瘤细胞对依托泊苷敏感性的实验研究被引量：4
- 2014年
- 目的探讨α干扰素(IFN-α)在人骨肉瘤U2OS和MG63细胞中对依托泊苷敏感性的作用及其机制。方法采用IFN-α和依托泊苷单独或联合处理骨肉瘤U2OS和MG63细胞72 h,应用流式细胞术和DNA Ladder检测细胞凋亡的变化,Western blot法检测PARP、p53、MDM2、Bax、Bcl-2的表达。结果流式细胞术表明IFN-α在p53正常的U2OS细胞中明显增强依托泊苷诱导的凋亡(P<0.05),却对依托泊苷诱导p53突变的MG63细胞凋亡无明显影响(P>0.05);DNA Ladder表明与单药组相比,IFN-α与依托泊苷联用72 h在U2OS细胞出现明显的DNA梯形条带,而在MG63细胞中无此现象;Western blot结果表明在U2OS细胞中联合用药组出现PARP的明显裂解活化,并且IFN-α明显增强依托泊苷引起的p53信号通路p53、MDM2、Bax等凋亡基因的表达,并抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达,而在MG63细胞中则无此现象。结论 IFN-α能够通过激活p53依赖性信号通路增强依托泊苷诱导的骨肉瘤U2OS细胞凋亡,联合应用IFN-α和传统化疗药物如依托泊苷可能成为提高骨肉瘤化疗敏感性的有效途径。
- 黄秀芳原向伟
- 关键词：Α干扰素依托泊苷骨肉瘤P53
- α干扰素通过 p53依赖性通路增强阿霉素诱导的骨肉瘤细胞凋亡被引量：1
- 2016年
- 目的：探讨α干扰素（IFNα）对阿霉素诱导骨肉瘤细胞凋亡的影响及其分子机制。方法采用α干扰素（IFN）和阿霉素单独或联合处理骨肉瘤 U2OS 和 MG63细胞72 h，通过 MTT 法测定细胞生长抑制，应用流式细胞术、Hochest 33258荧光染色和 DNA Ladder 检测细胞凋亡，免疫印迹法检测聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶（PARP）、凋亡相关蛋白（p53、Bax、Bcl－2、Mdm2、p21、Caspase－3）和PARP 的表达，实时聚合酶链反应（RT－PCR）检测 p53在 mRNA 水平的表达，通过 siRNA 干扰进行 p53的表达沉默。结果IFNα本身对 U2OS 和 MG63无细胞毒作用，但在 p53正常的 U2OS 而非 p53突变的 MG63细胞中增强阿霉素引起的细胞毒作用和凋亡，在 IFNα＋阿霉素组的 U2OS 细胞出现更明显的凋亡形态学改变和 DNA 梯形条带。在 U2OS 细胞中，IFNα对各基因的表达无影响，p53、Bax、Mdm2、p21可被阿霉素上调，并被联合用药进一步增强。而 Bcl－2在阿霉素作用后下调，并被联合用药进一步下调，在 MG63细胞中，各基因的表达无明显变化。在 U2OS 细胞中转染 p53－siRNA 阻断了p53的表达，经联合用药处理72 h 后，较空白组和对照 siRNA 组，转染 p53－siRNA 组的细胞活力明显增高明显，并且相对于对照 siRNA 组，联合用药引起的 caspase－3和 PARP 的活化也在 p53－siRNA 组明显减弱。结论IFNα可通过 p53依赖性凋亡途径增强阿霉素诱导的骨肉瘤细胞凋亡，联合 IFNα生物治疗和化疗可望应用于骨肉瘤的治疗。
- 原向伟黄秀芳陈忠羡梁胜根廖威明
- 关键词：骨肉瘤Α干扰素阿霉素P53凋亡
- 经皮椎体后凸成形术治疗多发骨质疏松性胸腰椎压缩骨折疗效分析被引量：2
- 2017年
- 目的观察并分析经皮后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PKP)在多发骨质疏松性胸腰椎压缩骨折中的应用及其疗效。方法对2013年1月~2015年12月本院确诊超过2个节段的骨质疏松性胸腰椎新鲜压缩骨折患者42例共94椎进行PKP治疗,并获得完整随访,比较治疗前后视觉模拟评分(VAS)、后凸Cobb角、椎体矢状位指数(VSI)、生活质量评分(Barthel指数)等指标及手术并发症。结果术前、术后3天和术后1年的VAS评分为(7.56±1.24)、(2.65±1.31)、(1.96±0.89)分,Cobb角为(32.83±6.78)°、(10.11±5.75)°、(9.79±4.81)°,VSI为(0.61±0.21)、(0.89±0.26)、(0.85±0.19),Barthel指数为(29.11±11.95)、(75.75±13.88)、(71.47±12.03)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。42例发生并发症15例,发生率35.71%,其中穿刺并发症2例,骨水泥渗漏7例,发生率为16.67%,至术后1年发生临近椎体骨折6例(14.29%)。结论 PKP治疗多发骨质疏松性胸腰椎压缩骨折可明显改善患者症状、恢复椎体前缘高度、恢复Cobb氏角、改善生活质量。
- 原向伟黄秀芳陈忠羡范全梁胜根秦英
- 关键词：经皮椎体后凸成形术骨质疏松症
- 乳腺癌差异表达的MicroRNA的筛选研究被引量：27
- 2009年
- 【目的】应用miRNA芯片技术筛选乳腺癌及癌旁组织差异表达的miRNA,发现与乳腺癌相关的miRNA,为进一步阐明其在乳腺癌发病机制中的作用打下基础。【方法】收集8例新鲜的乳腺癌及其癌旁组织,抽提总RNA并分离出小RNA进行Cy3荧光标记,将标记的小RNA在miRNA芯片上进行杂交反应,应用实时定量RT-PCR方法验证miRNAs芯片结果的可靠性。【结果】对芯片数据进行SAM分析,结果筛选获得16个乳腺癌相关miRNAs,相对于癌旁组织,在乳腺癌组织中9个miRNAs表达上调,7个miRNAs表达下调。其中显著上调的有miR-21,miR-365,显著下调的有miR-497,miR-31。【结论】筛选得到乳腺癌miRNA差异表达谱,其可能与乳腺癌的发生发展有关。
- 黄秀芳邵建永颜黎栩李晓霞杜紫明邓玲梁小曼
- 关键词：MIRNA乳腺癌MIRNA芯片实时定量RT-PCR
- 原发性脑淋巴瘤的CT、MRI表现与病理对照研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨原发性脑淋巴瘤(PLB)的CT、MRI表现特征及病理基础。方法收集经手术、病理和免疫组化证实,资料齐全的PLB 17例,分析其CT、MRI及病理表现。结果17例患者中单发11例,多发6例,共25个病灶,分布于脑深部中线附近病灶19个(76.00%),分布于灰白质交界区及脑表面病灶6个(24.00%)。肿瘤形态多为类圆形肿块或结节,瘤周水肿多为轻至中度水肿。CT平扫多呈等密度或略高密度影。T1WI呈等、低信号,T2WI呈等、高信号,增强后呈明显均匀增强。B细胞来源的14例,多为LCA、CD20、CD79阳性;T细胞来源的3例,多为LCA、CD45RO、CD3阳性。结论PLB的病理学基础决定其CT及MRI表现特征,结合临床及影像学表现特征可以对该病作出正确诊断。
- 金志发龙晚生罗学毛左克扬胡茂清黄秀芳
- 关键词：淋巴瘤计算机体层摄影磁共振成像
- α干扰素增强阿霉素诱导的骨肉瘤细胞凋亡被引量：1
- 2014年
- 目的探讨α干扰素（Interferonα，IFNα）联合化疗药物阿霉素诱导人骨肉瘤U20S细胞凋亡的作用及其机制，为提高骨肉瘤化疗敏感性探索新的治疗方法。方法应用台盼蓝拒染法测定IFNα和阿霉素单用以及联用对U20S细胞的生长抑制作用；Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡形态学变化；Westernblot法检测Caspase-3、PARP的活化；采用Caspase抑制剂Z—VAD—FMK预处理各组细胞，检测该作用是否依赖Caspase。结果IFNα处理24h、48h、72h对U20S细胞无抑制作用，却明显增强阿霉素诱导的生长抑制作用，具有时间依赖性；联合用药72h后U20S细胞出现更为明显的凋亡形态学变化；联合用药组的凋亡关键酶Caspase-3、PARP均发生断裂活化；Caspase抑制剂Z—VAD—FMK预处理明显减弱联合用药引起的生长抑制。结论IFNd通过Caspase依赖性凋亡通路增强阿霉素诱导的骨肉瘤U2OS细胞生长抑制和凋亡，二者联合应用可能成为提高骨肉瘤化疗敏感性的有效途径。
- 黄秀芳原向伟
- 关键词：Α干扰素阿霉素骨肉瘤凋亡天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶
- ELP2/STAT3/SETD2基因组拷贝数变异与胃癌化疗反应的相关性研究
- 刘琼茹黄秀芳张鑫
