薛云 作品数:116 被引量:339 H指数:11 供职机构: 河南科技大学医学技术与工程学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省科技攻关计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 一般工业技术 更多>>
南阳黄牛CD14基因扩增及序列分析 被引量:1 2012年 根据GenBank发表的荷斯坦奶牛CD14基因的序列设计引物,通过PCR方法对南阳黄牛的CD14基因进行分段扩增并测序,拼接后得到包含CD14完整编码区以及5’端和3’端非编码区的2 969 bp的全序列。序列分析结果表明:南阳黄牛CD14基因开放阅读框全长966 bp,共编码321个氨基酸,碱基组成分别为A(18.4%)、T(18.4%)、C(32.9%)、G(30.2%),编码区与荷斯坦奶牛CD14基因相比发生了2个碱基突变,没有引起氨基酸的改变。在5’端和3’端存在较长的非编码区,与荷斯坦奶牛CD14基因相比发生了7个碱基突变。南阳黄牛的CD14基因与荷斯坦奶牛、水牛、绵羊、山羊、猪、猕猴、大猩猩、人、小鼠的同源性依次降低,分别为99.8%、98.2%、96.8%、92.8%、83.5%、79.8%、79.7%、79.5%、71.9%。进化树所得的聚类结果与传统的分类结果一致。通过蛋白质结构预测,发现南阳黄牛CD14没有跨膜结构域。 马蓓蓓 龙塔 薛云 周峰 赵战勤关键词:南阳黄牛 CD14 河南省猪圆环病毒2型感染的病原流行病学研究 被引量:9 2012年 采用PCR方法,从来自河南省不同地区的822份猪肺脏等病料组织中共检出514份猪圆环病毒2型(PCV2)阳性样品,总检出率为62.6%。2011年3-12月,PCV2在河南省的检出率介于41.6%~85.3%。其中,9-12月的检出率显著高于3-8月(P<0.05)。在河南省不同地区的猪群中,PCV2的检出率介于44.6%~87.9%;其中,驻马店市、漯河市、信阳市3个地区PCV2的检出率显著高于全省其他地区(P<0.05)。PCR检测过程中还发现,PCV2的检出率与猪群类别(日龄)有一定关系,其检出率随猪年龄的增长而升高(P<0.05)。在211份PCV2阳性样品中,有144份(占69.2%)能分离出不同的共感染菌。最常见的共感染菌是链球菌(52.1%,75/144)、副猪嗜血杆菌(42.4%,61/144)、大肠杆菌(39.6%,57/144)和多杀性巴氏杆菌(20.1%,29/144)。研究表明,PCV2在河南省10多个地区的猪群中广泛存在,且与病原菌的共感染情况非常严重。 薛云 赵战勤 王清义 龙塔 庞有志 董发明关键词:猪圆环病毒2型 PCR 流行病学 猪源支气管败血波氏杆菌百日咳杆菌黏附素基因的原核表达及其免疫原性与抗体检测ELISA方法研究 支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)可引起猪发生肺炎和萎缩性鼻炎。更重要的是,该菌的先期感染易于导致其它多种病原的继发感染,加重病情造成较严重损失。百日咳杆菌黏附素是由Bbprn... 赵战勤 薛云 吴斌 汤细彪 何华 胡睿铭 张建民 陈焕春关键词:支气管败血波氏杆菌 免疫原性 ELISA 文献传递 支气管败血波氏杆菌dnt基因的克隆、表达及活性鉴定 被引量:3 2010年 通过PCR扩增获得支气管败血波氏杆菌的全长4 395 bpdnt基因,并利用pET-28a/BL21系统对其进行了融合表达。Western-blot检测结果表明,表达产物具有良好的免疫学活性。使用His-band purification kit纯化后,得到纯度为93.2%的融合蛋白HIS6-DNT。在乳鼠皮肤坏死试验中,表达产物HIS6-DNT和天然DNT均能导致乳鼠皮肤产生坏死性病变。在乳鼠皮肤坏死阻断试验中,兔抗HIS6-DNT血清能中和天然DNT,使其失去对乳鼠皮肤的坏死毒性。试验结果表明,重组蛋白具有天然DNT的生物学毒性和免疫原性,所产生的抗体具有中和活性,为DNT的结构和功能研究奠定了基础。 赵战勤 薛云 裴洁 王臣 丁轲 程相朝关键词:支气管败血波氏杆菌 猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 被引量:31 2008年 【目的】探讨2003~2006年间支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)在中国湖北等十余省市猪群中的流行病学分布和协同感染特性并对部分菌株进行生物学特性研究。【方法】采用病原菌的形态学观察、生化鉴定和PCR鉴定,从2 057份有肺炎或萎缩性鼻炎症状猪的肺脏等病料组织中分离出190株Bb和不同数量的其它共感染菌。经生化鉴定,药敏试验、血凝试验及动物试验等方法进行检测和分析。【结果】在中国湖北等十余省市的猪群中,不同省份Bb的总分离率介于7.3%~14.1%之间;不同年份Bb的总分离率介于7.3%~11.8%之间;2003~2006年间的Bb总分离率为9.2%;Bb的分离率与猪日龄有一定的关系。Bb最常见的共感染菌依次是链球菌(55.9%)、副猪嗜血杆菌(50.0%)、大肠杆菌(43.1%)、巴氏杆菌(25.5%)、绿脓杆菌(17.6%)和沙门氏菌(11.8%)。在43份有典型萎缩性鼻炎症状猪的病料中,分离出22株Bb、7株产毒素巴氏杆菌和6株绿脓杆菌;在分离出产毒素巴氏杆菌的7份病料中均同时分离出了Bb,而其中6份又同时分离出了绿脓杆菌。对2003年分离的31株Bb进行药敏试验、红细胞凝集试验和乳鼠皮肤坏死试验。结果表明:各菌株对15种药物的耐药谱不同,但对卡那霉素、庆大霉素、多粘菌素B、环丙沙星和舒普深高度敏感;各菌株均可凝集猪和羊的红细胞且能不同程度导致乳鼠皮肤坏死。【结论】在中国湖北等十余省市的猪群中,Bb与其它病原菌的共感染情况非常严重,且在萎缩性鼻炎的病猪中检出率最高。 赵战勤 裴洁 薛云 汤细彪 吴斌 何华 周学利 程相朝 何启盖 陈焕春关键词:支气管败血波氏杆菌 流行病学 毒力因子 指数富集的配体系统进化技术筛选大肠杆菌表达的人CD20胞外蛋白特异性适配体 2025年 CD20是B细胞淋巴瘤表面标志蛋白,其膜外区是特异性抗体和药物的作用靶点。为了获得靶向CD20的特异性适配体,首先根据密码子简并性对CD20胞外区基因进行优化,使之易于在大肠杆菌中表达;然后将优化后的基因克隆到pGEX-4T-1载体中,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中表达;蛋白纯化后用SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定;通过指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选出与融合蛋白特异性结合的ssDNA适配体,并用流式细胞术检测适配体与CD20的亲和力;再通过细胞毒性试验检测适配体抑制B淋巴瘤细胞的效果。本研究建立了CD20的原核表达方法,获得了特异性结合CD20胞外区蛋白的适配体,为靶向CD20的治疗药物的开发奠定了基础。 陈凡 杨凡 高蕾 胡月 薛云 周菁 康建华 王伟关键词:CD20 原核表达 适配体 一种低温敏感磁性磷酸钙骨水泥的制备方法 一种低温敏感磁性磷酸钙骨水泥的制备方法,利用溶胶‑凝胶法合成镧锶锰铁氧体磁性粉体;然后使用二氧化硅对镧锶锰铁氧体磁性粉体进行改性;再将改性后的镧锶锰铁氧体磁性粉体按一定比例与固相磷酸盐粉体复合,制得磁性骨水泥。本发明制得... 李光大 张开丽 薛云 吕舒心 张楠 张可馨 张鲲鹏 赵三团 冯文坡 商文超 梁高峰文献传递 绵羊肺炎支原体主要免疫原蛋白及疫苗的研究进展 被引量:5 2018年 绵羊肺炎支原体能特异性地感染绵羊和山羊,是引起羊支原体肺炎的病原体。在最近几年,规模化羊场发展趋势日趋成熟,羊的发病率也逐年增加,一旦发病,会给养羊行业带来无法挽回的经济损失。由于支原体对营养需求高、培养较为困难、培养周期长、免疫原性较弱等情况使得传统疫苗的保护不理想。目前,更多的研究者已经从分子水平入手,利用基因工程技术进行疫苗的研究来寻找合适的免疫原。文章以国内外的大量研究为依据,综合阐述了绵羊肺炎支原体在其免疫原蛋白及疫苗方面的研究现状。 吴酩 赵战勤 薛云 丁文文关键词:绵羊肺炎支原体 基因工程 疫苗 一种用于防治结核病的结核多肽疫苗及其制备方法、应用 本发明涉及一种用于防治结核病的结核多肽疫苗及其制备方法、应用,属于生物制药工程技术领域。本发明中的结核多肽疫苗包括结核多肽和载体,所述结核多肽包括结核分枝杆菌Rv0180c蛋白81~100位氨基酸片段、Rv0227c蛋白... 薛云 王梦娅 高伟娜 赵战勤 祖向阳结核多肽壳聚糖纳米粒的制备及表征 2020年 采用离子交联法制备壳聚糖纳米粒(CS-NPs)载体,并以粒径和多分散系数(PDI)为主要评价指标优化了工艺参数。通过文献检索,筛选出结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTC)标准强菌株H37Rv的保护性抗原蛋白Rv0180c(GLDKNKFDIRVVSPDEARRLY),经异硫氰荧光素(FITC)标记后载入优化的空白CS-NPs中,获得结核多肽壳聚糖纳米粒(Pep-CS-NPs)。所得空白CS-NPs的平均粒径、PDI和ζ电位分别为(148.13±2.24)nm、0.197±0.013和(+18.00±0.89)mV;4℃放置28 d,粒径未见显著增大。Pep-CS-NPs的平均粒径、PDI和ζ电位分别为(186.93±8.80)nm、0.254±0.014和(+12.07±1.68)mV,包封率和载药量为(45.20±2.95)%和(12.92±1.12)%。体外释放结果表明,Pep-CS-NPs缓慢释放多肽,48 h累积释放率为56.6%。本试验表明,离子交联法制备载多肽CS-NPs的工艺简便稳定、条件温和,所得制品粒径大小适宜、分布均匀,且具有明显缓释作用,有望作为治疗结核病的新型疫苗。 王梦娅 祖向阳 陈凡 赵战勤 薛云关键词:结核病 壳聚糖 纳米粒 体外释放