秦立篷
- 作品数：7 被引量：1H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤相关蛋白spindlin 1的表达、纯化及多克隆抗体的制备(英文)
- 2014年
- 目的制备spindlin 1蛋白的多克隆抗体,为spindlin 1的功能研究和肿瘤筛查奠定基础。方法 spindlin 1-谷胱甘肽S转移酶融合蛋白(spindlin 1-GST)在大肠杆菌中表达,切除GST后,将纯化的spindlin 1蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。Hitrap Protein A柱纯化spindlin 1抗血清,ELISA测定抗体效价。用Western蛋白质印迹法和免疫组化方法检测抗体的特异性。结果 ELISA检测结果表明,纯化的spindlin 1多克隆抗体效价为1∶2000。Western蛋白质印迹法实验结果表明,纯化的spindlin 1多克隆抗体能够与转染pAdeasy-myc-spindlin 1载体的HeLa细胞抽提物中spindlin 1蛋白结合,与Myc抗体检测位置一致。免疫组化结果表明,转染增强型绿色荧蛋白(EGFP)和spindlin 1(pEGFP-C3-spindlin 1)的HeLa细胞发绿色荧光,其细胞核中有spindlin 1蛋白表达。且spindlin 1多克隆抗体能够特异性识别卵巢癌组织中的spindlin 1蛋白。结论成功制备肿瘤相关蛋白spindlin 1的多克隆抗体,能够特异性检测细胞和组织中spindlin 1蛋白表达。
- 陈琳曾泉张鹏王静雪秦立篷吕洋南雪岳文裴雪涛
- 关键词：多克隆抗体卵巢肿瘤
- Spindlin1的蛋白结构解析及相互作用蛋白的寻找
- spindlin1是ssty//spin家族成员,编码一个237个残基的多肽链。它的功能和结构基础目前所知甚少。德国学者对已经报告的spin//ssty家族成员进行了生物信息学分析,发现了一个Spin//Ssty rep...
- 秦立篷
- 关键词：突变
- 文献传递
- 含有CD34标志基因用于转染细胞分选的载体的构建及其应用
- 本发明涉及生物医学领域，具体的说是一种含有CD34标志基因用于转染细胞分选的载体的构建方法及其应用。本发明构建了包含有编码细胞表面分子CD34的核苷酸序列的载体，采用了多基因共表达载体的构建方式，将目的核苷酸序列插入该载...
- 裴雪涛岳文曲笑霞秦立篷高艳红闫舫
- 文献传递
- 微环境调控干细胞增殖分化的作用机制及其应用基础研究
- 裴雪涛岳文李艳华贾雅丽周军年曾泉南雪王韫芳张静裴海云陈琳秦立篷王静雪习佳飞阎新龙
- 该成果属于基础医学研究领域。干细胞研究与应用是生物医药领域国际竞争的热点，但其应用中依然面临着干细胞安全高效地扩增和诱导分化、治疗安全性和有效性等一系列问题。微环境是干细胞发育的土壤，其在干细胞增殖分化、功能发挥以及疾病...
- 关键词：
- 关键词：细胞增殖
- spindlin1基因的原核表达及多克隆抗体制备
- 2006年
- 目的:明确人新基因spindlin1的组织表达谱、相互作用蛋白。方法与结果:应用PCR技术获得spindlin1的开放读框,并将其插入原核表达载体pGEX-2T,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,融合蛋白GST-Spindlin1获得了可溶性表达。用SDS-PAGE胶上的目的条带做抗原制备了多克隆抗体,进行了抗体纯化。结论:spindlin1在OVCar3细胞中可能以二聚体形式存在,这一现象还有待于进一步研究。
- 秦立篷岳文陈琳高艳红张鹏裴雪涛
- 关键词：分子克隆
- 含有CD34标志基因用于转染细胞分选的载体的构建及其应用
- 本发明涉及生物医学领域，具体的说是一种含有CD34标志基因用于转染细胞分选的载体的构建方法及其应用。本发明构建了包含有编码细胞表面分子CD34的核苷酸序列的载体，采用了多基因共表达载体的构建方式，将目的核苷酸序列插入该载...
- 裴雪涛岳文曲笑霞秦立篷高艳红闫舫
- 文献传递
- Spindlin1编码的蛋白质定位于细胞核并使NIH3T3细胞发生恶性转化被引量：1
- 2004年
- 研究了卵巢癌中高表达的新基因spindlin1的亚细胞定位及其对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响 ,并探讨了人spindlin1基因的生物学功能 .采用脂质体转染法将构建的融合蛋白表达载体 pEGFP N1/pEGFP N1 spindlin1瞬时转染COS 7细胞 ,观察spindlin1基因的亚细胞定位 ;同时稳定转染NIH3T3细胞 ,经G4 18抗性筛选后 ,用RT PCR筛选并鉴定表达spindlin1的稳定细胞株 ;通过细胞增殖活性、流式细胞检测、软琼脂克隆形成、迁移实验及裸鼠成瘤等对转染细胞的生物学行为进行检测 .结果表明 ,spindlin1定位于胞核 ;并促进NIH3T3细胞的增殖 ,使其处于G2 /M期的细胞比例显著增加 ;同时证实过表达spindlin1的NIH3T3细胞不仅具明显的克隆形成及迁移能力 ,而且能使裸鼠成瘤 .由此我们得出结论 :spindlin1基因过表达可促使NIH3T3细胞发生恶性转化 ,提示spindlin1可能是一种与肿瘤形成相关的原癌基因 .
- 高艳红秦立篷张鹏陈琳袁红丰白慈贤闫舫岳文裴雪涛
- 关键词：细胞核成瘤性
