沈云峰
- 作品数:5 被引量:11H指数:2
- 供职机构:中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 中国早发2型糖尿病家系MODY 1-5基因测定被引量:5
- 2009年
- 【目的】通过对早发2型糖尿病家系先证者进行直接测序,寻找中国人群中可能存在的青少年的成人发病型糖尿病(MODY)1-5基因突变。【方法】对19个早发2型糖尿病家系的先证者进行MODY1-5基因扩增和DNA直接测序。【结果】19个先证者未发现MODY基因突变,但发现MODY1-5基因分别存在6、5、15、1、1种多态性。【结论】MODY相关基因突变具有种族异质性,MODY1-5基因突变不是该19个早发糖尿病家系的致病因素。
- 严晋华沈云峰余秋琼梁华蔡梦茵翁建平
- 关键词:早发2型糖尿病基因突变
- 小型猪骨髓间充质干细胞超顺磁氧化铁、增强型绿色荧光蛋白双标记及体外磁共振成像示踪的研究
- 2011年
- 目的探讨超顺磁氧化铁(SPIO)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)体外双标记、磁共振成像(MRI)示踪1型糖尿病(T1DM)小型猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)的可行性和标记方法。方法采集T1DM小型猪骨髓,密度梯度离心和贴壁培养法分离BMSCs。选用携带EGFP慢病毒(LV)颗粒转染BMSCs。选用SPIO和左旋多聚赖氨酸(PLL)复合物标记LV—EGFP转染的BMSCs。对SPIO标记细胞进行普鲁士蓝染色、透射电镜观察和体外MRI。结果LV-EGFP与BMSCs转染复数(MOI)为30:1转染后96h荧光表达最强,阳性转染率43.2%。Fe^3+标记浓度为25mg/LBMSCs阳性标记率93.1%。透射电镜检测发现,SPIO粒子密集于BMSCs细胞质,次级溶酶体内多见。MRI显示,Fe^3+标记浓度为25mg/L、1×10^4/ml细胞浓度标记后3周和6周在快速自旋回波序列(TSE)T1WI、TSET,WI及快速小角度激发成像(FLASH)T2WI信号强度变化率(ASI)依次为12%、41%、63%和7%、28%、46%,均为后二者大于前者(分别P〈0.01和P〈0.05),提示SPIO该标记浓度和细胞密度标记后3周和6周在T2WI及T2WI呈现较明显的信号变化。结论采用体外EGFP和SPIO双重标记的方法,结合MRI和细胞化学染色法可以稳定地对T1DM小型猪BMSCs进行体外示踪。
- 唐宽晓沈云峰杨旭斌顾慧敏段何江严朝霞翁建平
- 关键词:间质干细胞小型猪细胞示踪
- 葡萄糖激酶基因突变与功能学研究进展被引量:4
- 2008年
- 葡萄糖激酶(GCK)基因突变包括激活突变和失活突变,激活突变引起持续性高胰岛素血症低血糖(PHH I),完全性失活突变引起永久性新生儿糖尿病(PNDM),部分性失活突变导致成年起病的青少年糖尿病2型(MODY2)。目前已报道了近200个GCK基因突变,其中只对约1/5的突变进行了功能学研究。本文就GCK基因突变及其目前的功能学研究进展作一综述。
- 沈云峰翁建平
- 关键词:葡萄糖激酶基因突变
- 葡萄糖激酶基因E339K突变的功能学研究被引量:2
- 2010年
- 目的 探讨葡萄糖激酶(GCK)基因E339K突变引起青少年的成年起病型糖尿病2型(MODY2)的分子机制.方法 MODY2家系成员进行葡萄糖耐量试验,测定空腹及负荷后2h血糖、糖化血红蛋白、空腹胰岛素.PCR扩增GCK基因并直接测序.构建E339K突变质粒.表达并纯化野生型和突变型GCK蛋白.酶偶联分析法进行功能学测定.结果 与非突变成员相比,突变者空腹、负荷后2 h血糖、糖化血红蛋白更高;空腹胰岛素、胰岛素分泌指数明显降低;胰岛素抵抗指数无显著差异.突变导致GCK蛋白产量降低[(12.7±1.72)mg/L比(16.2±2.65)mg/L,P<0.01];当ATP为饱和浓度时酶促反应速度达到1/2最大反应速度时的葡萄糖浓度(S0.5)[(13.96±1.89)mmol/L比(5.92±0.99)mmol/L,P<0.001]和当葡萄糖为饱和浓度时酶促反应速度达到1/2最大反应速度时的ATP浓度(ATP-Km)显著升高[(3.27±1.14)mmol/L比(0.30±0.09)mmol/L,P<0.001];GCK对葡萄糖的催化常数显著下降[(1.62±0.35)/s比(25.18±2.10)/s,P<0.001];热稳定性下降,表现为在相对更低的孵育温度下或同一温度相对更短的时间内活性丧失.结论 GCK基因E339K突变导致的蛋白表达下降、对葡萄糖和ATP的亲和力下降以及热稳定性下降是造成胰岛β细胞分泌胰岛素减少进而发生MODY2的可能分子机制.
- 沈云峰梁华蔡梦茵翁建平
- 关键词:突变
- 空腹血糖升高——查房选录(333)
- 2010年
- 沈云峰翁建平
- 关键词:空腹血糖血糖升高查房选录胰岛素治疗妊娠40周2H血糖