沈丙权 作品数:8 被引量:38 H指数:4 供职机构: 河南农业大学国家小麦工程技术研究中心 更多>> 发文基金: 河南省教育厅自然科学基金 中国博士后科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
小麦GAPDH基因克隆及序列分析 被引量:18 2008年 采用Trizol法提取高质量小麦总RNA,并运用RT-PCR方法克隆了小麦GAPDH(甘油醛三磷酸脱氢酶)基因的部分序列(EU022331),长度为604bp,核苷酸序列比对结果表明,该序列与大麦(M36650)、玉米(AY109397)、番茄(BT012693)GAPDH核苷酸序列的同源性分别为95%、86%和84%。GAPDH基因的克隆为在禾谷类作物研究的应用提供了一个较好的对照基因。 岳彩凤 康国章 刘超 郭天财 朱云集 沈丙权关键词:小麦 小麦叶片内几个抗冷相关基因cDNA片段的克隆 被引量:2 2009年 运用RT-PCR法,从小麦叶片中克隆出SOD、CAT、APX、GR、CBF、GI等几个抗冷相关基因的cDNA片段,序列比对结果显示,这些基因与GenBank上已登录的大麦、小麦、玉米、水稻等相关基因的同源性较高,表明克隆出了上述几个小麦抗冷相关基因,其中的APX和GR为普通小麦中首次报道。 康国章 岳彩凤 沈丙权 刘超 王永华 郭天财关键词:小麦 克隆 玉米AGPase胞质型小亚基ZmSSUI基因的克隆及在籽粒发育过程中的表达 被引量:2 2010年 利用RT-PCR方法从普通玉米浚单20中克隆出淀粉合成关键酶-腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP-Glucose Pyrophosphorylase,AGPase)胞质型小亚基(cytosolic small subunit,SSUI)基因的cDNA序列,命名为ZmSSUI(GenBank登录号:GU550073)。序列分析表明,该cDNA序列长度1554 bp,包含一个完整的开放阅读框(2~1 429 bp),长度为1 428 bp,编码476个氨基酸,克隆基因编码的氨基酸序列与其他植物SSUI氨基酸序列有较高同源性。半定量RT-PCR分析表明,在籽粒发育过程中,ZmSSUI基因的表达呈单峰状变化,与已报道的AGPase酶活性及淀粉积累速率趋势基本一致,推测其在玉米淀粉合成中发挥着重要作用。 沈丙权 郑贝贝 彭慧芳 郭天财 康国章关键词:玉米 AGPASE 淀粉 小麦籽粒内AGPase质体型小亚基的克隆和序列分析 被引量:4 2008年 文章从小麦籽粒中克隆了淀粉合成关键酶AGPase的质体型小亚基(SSU Ⅱ)的cDNA序列。其中间部分与3'端序列与大麦SSU Ⅱ(Z48563)的同源性高达97%,但在5'端特异的转移肽切割位点却比Z48563缺失一段113bp序列。本文克隆的SSU Ⅱ其特异5'端序列与已报道的大麦(Z48563)、小麦(536819)、玉米(AF334960)进行多序列比对和同源性比较显示,它们的亲缘关系较远,表明这可能是一个新的SSU Ⅱ基因。另外,在检测的22个现今推广面积较大的小麦品种中,SSU Ⅱ 5'端缺失序列的现象都普遍存在。 康国章 沈丙权 王永华 刘超 郭天财 朱云集关键词:小麦 淀粉 AGPASE 小麦AGPase胞质型大亚基基因的克隆与表达分析 被引量:4 2008年 从大粒型小麦品种豫教2号中克隆出调控小麦ADPG焦磷酸化酶(AGPase)胞质型大亚基基因(LSUI)cDNA全长。在花后15d的小麦植株中,通过半定量PCR法,发现LSUI基因在叶、籽粒、叶鞘和颖壳中表达量较高,但在根和茎中表达量较低,表明在绿色光合功能器官和淀粉合成器官中,LSUI基因量表达较高。比较了LSUI基因在千粒重不同的豫教2号和兰考矮早八两小麦品种籽粒发育过程中的表达差异后,发现在籽粒形成期,LSUI基因在两品种籽粒内表达相似,但在籽粒灌浆期和成熟期间,LSUI基因在千粒重较高的豫教2号内表达量明显高于千粒重较低的兰考矮早八,这个表达差异与两品种间淀粉积累差异趋势相似,表明LSUI基因的表达量可能与淀粉的积累量密切相关。 康国章 王永华 刘超 沈丙权 郭天财 朱云集关键词:小麦 基因克隆 RT-PCR 基因表达 小麦AGPase4个亚基的克隆及其组织特异性表达 被引量:7 2009年 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号发育籽粒中克隆出小麦淀粉合成关键酶—AGPase的胞质型小亚基(cytosolic small subunit,SSUⅠ)、质体型小亚基(plastidial small subunit,SSUⅡ)、胞质型大亚基(cy-tosolic large subunit,LSUⅠ)和质体型大亚基(plastidial large subunit,LSUⅡ)的cDNA序列。所克隆的基因cDNA序列长度分别为1 4651、6311、941和535 bp。序列比对结果显示SSUⅠ、LSUⅠ和LSUⅡ与已往报道的大麦、小麦、玉米、水稻等相关基因的同源性较高,而SSUⅡ的cDNA序列为首次克隆,与大麦SSUⅡ相比,5'端缺失编码转移肽的一段序列,表明其可能对质体AGPase活性产生一定影响。通过半定量PCR法发现SSUⅠ与LSUⅠ在籽粒中表达量较高,而SSUⅡ和LSUⅡ在叶片中丰富表达。 康国章 刘超 沈丙权 肖向丽 郭天财关键词:小麦 克隆 组织特异性表达 冻害胁迫下小麦叶片内一些抗冻基因转录水平研究 被引量:4 2010年 研究了大田条件下,4个小麦品种幼穗发育不同阶段植株的冻害情况,并比较叶片内谷胱甘肽还原酶(GR)、抗坏血酸过氧化酶(APX)、超氧物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)等基因的转录水平。结果表明,幼穗发育进程慢的小麦植株受冻害较轻,其叶片内的APX和SOD基因的转录水平较高,与植株的抗冻性表现相一致,表明它们可作为评价小麦抗冻性的鉴定指标;冻害胁迫下,CAT和GR基因的转录水平与小麦植株抗冻性表现不相一致,表明这2个基因可能不适宜作为小麦抗冻性的鉴定指标。 康国章 岳彩凤 沈丙权 郑贝贝 彭慧芳 郭天财关键词:小麦 转录水平 抗冻性 小麦AGPase基因LSU Ⅱ的克隆及反义表达与RNAi干扰载体的构建 被引量:1 2009年 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出小麦淀粉合成关键酶—AGPase质体型大亚基(AGPase plastidial large subunit,LSU Ⅱ)cDNA一段特异保守序列,长度为535 bp(GenBank No.EF378944),与DQ409820(小麦)、U66876(大麦)、AK069296(水稻)和DQ406819(玉米)分别有98%,97%,88%,88%的同源性,表明克隆出了小麦LSU Ⅱ基因的部分cDNA序列。以pWM101质粒表达载体为基础,将LSU Ⅱ反向置于pWM101质粒的CaMV35S启动子之后,构建了LSU Ⅱ的反义表达载体pWM101LSUIIA;另外,用pFGC5941干扰载体构建了LSU Ⅱ基因的RNAi载体pFGC5941 LSU ⅡSA,这些载体的构建为研究LSU Ⅱ基因的功能打下了基础。 刘超 康国章 郭天财 岳彩风 沈丙权关键词:小麦 AGPASE LSU