张滢
- 作品数：8 被引量：5H指数：1
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- 基因工程Th17细胞的研制及其功能的探讨
- 张焕新陈翀曾令宇张滢徐开林
- 关键词：TH17细胞基因工程RORΓT慢病毒载体
- 内皮祖细胞对小鼠异基因骨髓移植后骨髓内皮细胞修复的作用研究被引量：4
- 2012年
- 目的在小鼠异基因骨髓移植（allo—BMT）中，通过输注内皮祖细胞（EPC）对骨髓内皮细胞（Ec）进行修复，并进一步观察其对造血重建的影响。方法将6～8周龄雌性BALB／c（H一2）小鼠随机分为单纯骨髓移植（a11o—BMT）组和联合EPC移植（allo—BMT＋EPC）组，经60Co照射后，allo—BMT组输注C57BL／6（H-2“）小鼠骨髓有核细胞5×10。／只，allo—BMT-I-EPC组在allo—BMT组输注细胞的基础上联合输注EPC5×10’／只。移植后通过常规病理学和免疫组织化学方法观察受鼠骨髓中Ec的形态学变化，同时计数外周血白细胞，用流式细胞术分析外周血中网织红细胞含量及骨髓中造血干细胞含量。结果体外培养的供鼠EPC成功归巢至受鼠骨髓腔中，allo—BMT组受鼠骨髓Ec破坏严重，allo—BMT＋EPC组骨髓EC结构基本正常，移植后10d和15d，allo—BMT＋EPC组骨髓腔中Lin—C—kit’Sca．1’细胞含量为（20．31-4-2．65）×103／只和（10．26±2．19）×103／只，allo—BMT组相应含量为（9．61±0．98）×103／只和（4．09±1．34）×103／只；移植后15d，allo—BMT＋EPC组外周血白细胞计数和网织红细胞比例分别为（1．20±0．11）×109／L和（2．35±0．30）％，allo—BMT组相应含量分别为（0．654-0．10）X109／L和（1．63±0．20）％。结论小鼠allo—BMT中，联合输注EPC可修复受者骨髓EC并促进造血重建。
- 张滢宋国梁潘彬化静徐开林曾令宇
- 关键词：骨髓移植造血重建小鼠
- 基因工程Th17细胞的研制及其功能探讨
- 2011年
- 目的探讨并优化制备基因工程Th17细胞的方法，评估制备的工程Th17细胞是否具有同天然Th17细胞类似的表型和功能。方法包装含RORγt基因的重组慢病毒pXZ9-RORγt和空载体对照质粒pXZ9。C57BL6小鼠CD4^＋CD25^-nfffveT细胞体外活化36h后依据感染慢病毒颗粒的不同及是否添加TGF—β和IL-6，分为五组：pXZ9-RORγt组、TGF—β＋IL-6组（pXZ9＋TGF-β＋IL-6组）、联合组（pXZ9-RORγt＋TGF—β＋IL-6组）、空载体对照组（pXZ9组）及空白对照组。流式细胞术检测各组IL-17A阳性细胞比例，荧光定量PCR检测各组细胞IL-17A、IL-17F、IL-21和IFN-γ表达水平。通过小鼠实验性变应性脑脊髓炎（EAE）模型评估各组细胞是否具有加重EAE的功能。结果①pXZ9-RORγt组、TGF—B＋IL-6组和联合组均制备出工程Th17细胞，其中联合组IL-17A阳性率达（60．59±8．15）％，明显高于pXZ9-RORγt组[（40．25±5．46）％]和TGF—B＋IL-6组[（14．36±5．27）％]。②各组工程Th17细胞均表达IL-17A与IL-17F，而IL-21仅在给予TGF—β和IL-6时明显升高。③各组工程Th17细胞均可加重小鼠EAE。结论成功建立了制备高效工程Th17细胞的方法，其中过表达RORγt基因与联合TGF—β和IL-6不仅可提高Th17细胞的制备效率，而且制备的工程Th17细胞在表型和功能上与天然Th17细胞相类似。
- 张焕新陈翀曾令宇张滢徐开林
- 关键词：TH17细胞基因工程慢病毒载体
- H135.携带小鼠RORγt基因慢病毒载体的构建及其在293FT细胞中的表达
- 陈翀张焕新曾令宇张滢张建军徐开林
- 文献传递
- 内皮祖细胞对小鼠异基因骨髓移植后骨髓内皮细胞修复的作用研究
- 目的：在小鼠异基因骨髓移植中,通过输注内皮祖细胞(Endothelial progenitor cell,EPC)对骨髓内皮细胞(Endothelial cell,EC)进行修复,并进一步观察对造血重建的影响。方法：将6...
- 张滢宋国梁潘彬化静徐开林曾令宇
- 关键词：内皮祖细胞异基因骨髓移植骨髓内皮细胞
- 文献传递
- Th1和Th17细胞之间的平衡关系控制小鼠急性移植物抗宿主病的发病过程
- 目的：采用小鼠急性移植物抗宿主病(GVHD)模型，并通过改变Th1和Th17细胞之间的平衡，以观察Th1/Th17平衡关系在急性GVHD发生中的作用。方法：分别建立小鼠常规GVHD模型和GVHD联合常山酮(HF)干预模型...
- 潘彬程海宋国良张滢陈伟徐开林
- 关键词：急性移植物抗宿主病TH17细胞干预模型流式细胞术
- 携带小鼠RORγt基因慢病毒载体的构建及其在293FT细胞中的表达被引量：1
- 2010年
- 本研究构建携带小鼠ROFγt和glp基因的重组慢病毒载体,检测RORγt蛋白在293FT细胞中的表达。用RT-PCR扩增小鼠RORγt基因,将其克隆至PCR2.1T载体,酶切制备RORγtDNA片段,插入MigR1质粒后将RORγt-IRES-GFP定向连入慢病毒转移质粒pTK208,生成pXZ9-RORγt。用脂质体介导三质粒共转染法转染293FT细胞,荧光显微镜下观察GFP表达情况,以Western blot鉴定RORγt的表达。结果表明,RT-PCR扩增出RORγt基因并克隆入PCR2.1T载体;经亚克隆构建了慢病毒转移质粒XZ9-RORγt。质粒经脂质体转染293FT细胞获慢病毒颗粒,慢病毒颗粒体外高效感染293FT细胞,感染后Western blot检测到RORγt蛋白表达。结论:成功构建慢病毒载体pXZ9-RORγt,并在293细胞内获得表达。
- 陈翀张焕新曾令宇张滢张建军徐开林
- 关键词：慢病毒载体RORΓT
- H154.基因工程Th17细胞的制备及其功能
- 张焕新陈翀曾令宇张滢徐开林
- 文献传递
