吕凤祥
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- GST-p16融合蛋白的表达、纯化及鉴定
- 2004年
- 目的 利用GST融合基因表达系统表达、纯化及鉴定GST p16融合蛋白。方法 以质粒pM p16为模板 ,扩增出p16基因片段 ,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX 6P 1,将所构建的重组质粒pGEX p16转化大肠杆菌BL2 1并诱导表达 ,采用GST蛋白纯化系统进行纯化 ,所得产物进行SDS PAGE及Westernblot鉴定。结果 大肠杆菌细胞经诱导高效表达出约 4 2kD蛋白 ,其分子量与GST p16融合蛋白相符。Westernblot结果显示该蛋白能够被p16抗体特异性识别。结论 本实验在大肠杆菌表达系统中高效表达了有活性的GST
- 史从宁吕凤祥王天英郭卓维傅国辉
- 关键词：P16WESTERNBLOT
- 利用定点突变技术构建血型糖蛋白Ac末端突变体
- 2004年
- 目的 构建血型糖蛋白A(GlycophorinA)c末端突变体 ,为GPAc末端与阴离子交换蛋白 1(AnionExchang er1,AE1)酸性c端域相互作用位点研究奠定基础。方法 以pM GPA Ct为基础质粒 ,利用TransformerTM定点突变技术 ,构建GPAc末端突变体pM GPA L118F、pM GPA S119R。结果 经过测序证实突变成功。结论 本实验成功构建了GPAc末端的突变体 ,并证实TransformerTM定点突变方法具有简便、突变效率高等优点 ,是体外构建突变体的有效方法。
- 吕凤祥彭琳一王天英傅国辉
- 关键词：定点突变突变血型糖蛋白A
- 带3蛋白6种跨膜截断体阴离子转运功能的研究被引量：1
- 2004年
- 目的 探寻带 3蛋白膜段域不同跨膜片段在带 3蛋白离子转运过程中的作用。方法 构建编码带 3蛋白膜段域片段的重组质粒 ,将其转入酵母细胞诱导表达 ,并以蛋白免疫印记及荧光探针的方法检测目的蛋白。结果 拥有前 1 0个跨膜α螺旋的带 3蛋白片段TM1 1 0具有氯离子转运活性 ,而TM1 8,TM1 9则完全失去功能。此外 ,删除C末端后 1 6个氨基酸的带 3蛋白膜段域片段功能与拥有全长膜段域的带 3蛋白相仿。结论 TM1 0在带
- 郭卓维史从宁吕凤祥王天英傅国辉
- 关键词：阴离子转运功能氨基酸
